胰岛素在严重烧伤大鼠急性肺损伤中的保护作用

目的:观察胰岛素对严重烧伤所致的急性肺损伤的保护效应。方法:实验于2006-01/08在解放军第四军医大学西京医院全军烧伤中心实验室完成。取成年雄性SD大鼠36只,随机分成3组,每组12只:①烫伤 胰岛素组:水浴锅94℃,20s,制备30%总体表面积全层皮肤烫伤模型,伤后即刻腹腔注射生理盐水40mL/kg,并皮下注射胰岛素3U/kg。②烫伤组:造模和腹腔注射同烫伤 胰岛素组,皮下注射等体积生理盐水。③假烫组:用室温水浴模拟烫伤过程,伤后不给予补液。烫伤24h后,收集动脉血测定超氧化物歧化酶活性,收集支气管肺泡灌洗液测定蛋白含量,取肺组织进行苏木精-伊红染色观察病理变化,并测定髓过氧化物酶活性,同时电镜观察胸主动脉血管内皮细胞变化情况。结果:36只大鼠进入结果分析。①肺病理变化:烫伤 胰岛素组肺脏渗出和水肿较烫伤组明显减轻。②肺泡灌洗液中蛋白的质量浓度:烫伤组和烫伤 胰岛素组高于假烫组[(702.9±169.5),(486.5±149.2),(240.5±140.7)mg/L,P<0.05],烫伤 胰岛素组低于烫伤组(P<0.05)。③肺脏髓过氧化物酶活性:烫伤 胰岛素组低于烫伤组[(36.01±8.17),(59.51±12.50)nkat/g,P<0.05],与假烫组比较差异不显著。④血清超氧化物歧化酶活性:烫伤组和烫伤 胰岛素组低于假烫组[(2.27±0.18),(2.63±0.19),(2.81±0.21)mkat/L,P<0.01,0.05],烫伤 胰岛素组高于烫伤组(P<0.01)。⑤电镜下可见烫伤 胰岛素组内皮细胞损伤较烫伤组轻。结论:严重烧伤早期外源性胰岛素干预后可减轻急性肺损伤,具有明显的肺脏保护作用,这种作用可能与胰岛素的内皮细胞保护效应有关。     

P27基因转染对瘢痕成纤维细胞超微结构的影响

目的:观察P27基因转染对体外培养增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响,探讨P27基因抑制瘢痕的作用。方法:实验于2001-06/2002-01在第四军医大学烧伤科实验室、第四军医大学电镜中心完成。pcDNA-p273真核表达质粒由第一作者构建,应用基因转染技术将所构建的pcDNA3-p27载体转染成纤维细胞,培养的增生性瘢痕成纤维细胞分为空白对照组(即未经转染的增生性瘢痕成纤维细胞)、转pcDNA3空载体组、转pcDNA3-P27组。获得稳定的P27表达后,用透射电镜观察成纤维细胞内细胞器形态和数量的变化。结果:①空白对照组成纤维细胞核大而呈圆形,核仁明显,胞浆内具有较丰富的粗面内质网,较发达的高尔基复合体,较多的线粒体、微丝、微管,细胞表面微绒毛及突起较多。②转pcDNA3空载体组粗面内质网、线粒体较丰富。③转pcDNA3-P27组细胞胞浆内粗面内质网、线粒体、微丝、微管明显减少,大部分细胞出现染色体边聚,粗面内质网上的核糖体明显减少,部分细胞呈现凋亡,大部分细胞呈典型的生长抑制像。④P27明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的合成功能。结论:P27可能通过抑制成纤维细胞的细胞合成、增殖功能来抑制瘢痕形成。     

激活Hacat细胞表面Toll样受体促进创面愈合的机制

目的:细胞表面Toll样受体对激发先天性免疫、抵抗微生物感染有重要作用.最近研究发现激活细胞表面Toll样受体不仅可以预防微生物感染,还可以促进组织再生.实验通过脂多糖激活体外培养的角质细胞株Hacat细胞表面Toll样受体,观察其促进创面愈合的可能机制.方法:实验于2007-07在解放军第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科完成.①实验分组及方法:角质细胞株Hacat由解放军第四军医大学西京医院皮肤科馈赠;脂多糖为Sigma公司产品;小鼠抗人Toll样受体2单克隆抗体、兔抗人Toll样受体4多克隆抗体购于ebioscience公司.体外培养Hacat细胞,根据脂多糖(500 ng/L)与Hacat细胞共培养24,48,72 h将细胞随机分为脂多糖作用24 h 组、脂多糖作用48 h 组、脂多糖作用72 h 组,另设对照组,只加溶剂二甲基亚枫.②实验评估:蛋白免疫印迹技术检测脂多糖对Hacat细胞Toll样受体2、Toll样受体4及核因子-κB表达的影响;荧光定量聚合酶链反应检测脂多糖作用后Hacat细胞内基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子的表达.结果:光学显微镜下正常人皮肤表皮及角质细胞Toll样受体2、Toll样受体4表达呈蓝黑色;脂多糖作用于Hacat细胞24,48,72 h 后Toll样受体2、Toll样受体4、核因子-κB表达均高于对照组(P ＜ 0.01).与对照组相比,其他3组基质金属蛋白酶3及血管内皮生长因子表达均增高(P ＜ 0.01,P ＜ 0.05).脂多糖作用24 h 组基质金属蛋白酶9表达与对照组差异无显著性(P ＞ 0.05),脂多糖作用48,72 h 组与对照组比较,差异显著(P ＜ 0.05).结论:激活Hacat细胞表面Toll样受体有促进创面愈合作用,其机制可能与脂多糖作用于Toll样受体从而激活核因子-κB信号传导通路促进细胞释放基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子等因素有关.     

人组织工程全层活性皮肤在深度烧伤创面的临床应用

目的 :观察人组织工程全层活性皮肤 (ActivSkin)在深度烧伤创面的临床应用效果 .方法 :采用ActivSkin修复深度创面 31例 ,观察创面愈合情况 ;观察应用ActivSkin后受体、供体的性别对创面愈合的影响 .并对病例进行随访 .结果 :治疗组深II度创面 2 5例 ,愈合时间比对照组提前 6d(P <0 .0 5 ) .III度创面 6例 ,愈合时间比对照组提前 2 0d(P <0 .0 5 ) .随访病例提示 :ActivSkin移植后组织相容性好 ,作为角质细胞和成纤维细胞三维结构支架的牛胶原膜在体内可降解 ,无免疫排异及局部炎症反应发生 .结论 :ActivSkin是一种具有生物活性、较理想的修复深度烧伤创面的新型皮肤代用品 .     

重组融合饰胶蛋白拮抗转化生长因子β1刺激 增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用

目的观察重组谷胱甘肽S-转移酶与饰胶蛋白的融合蛋白(GST-Decorin)对转化生长因子β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞的作用,探索瘢痕治疗的新方法。方法采用RT-PCR技术克隆饰胶蛋白(Decorin)cDNA并连接到pGEX-4T-1载体上,大肠杆菌内表达GST-Decorin;体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,加入1∶6.25,1∶12.50,1∶25.00,1∶50.00,1∶100.00稀释度的GST-Decorin,经四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖速度;进一步将2mg/L的TGF-β     

双侧腮腺嗜酸性腺瘤1例

患者 ,男 ,6 0岁 ,于 1999年 7月 2 3日入院。患者于住院前 2个多月发现双侧耳下方各长一肿物 ,曾服用各种消炎药物但不见肿物缩小 ,无其它不适感。查体 :患者一般情况好 ,肥胖体质 ,心肺正常 ,血、尿、便、肝功能均在正常范围内。颌面部情况 :双侧耳下方分别可触及约 4 cm× 3cm大小的卵圆形肿物 ,边界较清 ,肿物表面不光滑 ,移动性差。颌下、颈部淋巴结无肿大 ,口内导管口无红肿 ,开口无受限。初步诊断 :双侧腮腺肿物。治疗经过 :于 1999年 7月 2 6日午在局麻下行双侧腮腺肿物摘除术 ,切除组织送检。病理报告 :灰红色不整组织块 ,表面呈结…     

广泛皮肤扩张术修复面颈胸部烧伤后瘢痕

目的：探讨广泛皮肤扩张术修复面颈,胸部烧伤后瘢痕的治疗效果。方法：采用一次多个扩张器置入面颈,胸部正常皮肤下,经广泛扩张皮肤后修复瘢痕,切除瘢痕散在,畸形比较严重的创面共计13例,置入的扩张器数量及大小依瘢痕畸形程度不同为5－8个,扩张容积30－450ml不等。手术遵循整形外科设计原则,尽可能使修复后的切口处于顺皮纹或隐蔽处,以面部器官正确复位,颌颈角正常,上胸部避免植皮为治愈标准,结果：13例面颈,胸部散在瘢痕切除均一次性完成,皮瓣全部成活,其质地,色泽理想,面部器官,颈胸部外观与功能较好,结论：采用广泛皮肤扩张术修复面颈胸部烧伤后瘢痕,是一种较好的方法。     

大鼠烫伤后肾上腺内含降钙素基因相关肽神经的改变

目的探讨皮肤烫伤早期大鼠肾上腺内降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）变化规律,为阐明烫伤后肾上腺内分泌功能改变的机理提供资料。方法采用１５％深Ⅱ度大鼠烫伤模型,以免疫组化方法分别检测烫伤后不同时相点肾上腺皮质、髓质ＣＧＲＰ免疫反应阳性神经和细胞分布密度的改变。结果①在肾上腺被膜,皮质,髓质均有含ＣＧＲＰ神经分布,其中髓质更为密集。在髓质可见含ＣＧＲＰ神经与ＣＧＲＰ免疫反应阳性细胞密切接触;②烫伤早期大鼠肾上腺皮质和髓质含ＣＧＲＰ神经的分布密度均下降,但髓质内ＣＧＲＰ免疫反应阳性细胞的分布密度上升。结论降钙素基因相关肽可能是烫伤大鼠肾上腺功能改变的影响因素之一。     

PDGF-AB对成纤维细胞表达α-SM actin的影响

目的:研究PDGF-AB对成纤维细胞表达α-SM actin的影响,探讨PDGF-AB促进伤口愈合的作用机制. 方法:取体外培养的人正常皮肤成纤维细胞,用免疫组化(SABC)观察PDGF-AB对成纤维细胞表达α-SM actin的影响. 结果:PDGF-AB能诱导成纤维细胞表达α-SM actin,且呈剂量依赖性关系. 结论:PDGF-AB可能通过刺激成纤维细胞表达α-SM actin,促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,增加伤口收缩,促进伤口愈合.     

人脂肪间充质干细胞外泌体对小鼠RAW264.7细胞的炎症反应和小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响

目的:探讨人脂肪间充质干细胞（ADSC）外泌体对小鼠RAW264.7细胞介导的炎症反应和小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:采用实验研究方法。取2020年6—9月于空军军医大学第一附属医院行腹部手术的3例女性患者（10~25岁）废弃脂肪组织,采用Ⅰ型胶原酶消化法提取ADSC,采用流式细胞术进行鉴定。使用差速超高速离心...