人脂肪干细胞分泌因子对HaCaT细胞的生物学作用

目的：分离培养脂肪干细胞（ADSCs）以探讨其分泌因子对HaCaT细胞的生物学作用.方法：从人腹部脂肪组织中分离并培养ADSCs3d后,ELISA法测定ADSCs分泌血管内皮生长因子（VEGF）,肝细胞生长因子（HGF）含量;收集ADSCs培养液（ADSC-CM）作用于HaCaT细胞株.采用MTT法测定HaCaT细胞的增殖;AnexinV/PI双染色法测定HaCaT细胞的凋亡情况;体外细胞划痕法测定其迁移能力.结果：培养获得ADSCs细胞3d后,培养液中VEGF、HGF含量分别为（287±47）,（577±85）ng/L.MTT实验30%ADSC-CM组、50%ADSC-CM组的A490nm值分别高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）.实验组HaCaT细胞凋亡率明显低于对照组（P〈0.05）.与对照组相比较,实验组HaCaT细胞迁移距离36,48h时间点显著增大（P〈0.05或P〈0.01）.结论：ADSCs能分泌细胞因子且对HaCaT细胞具有促增殖、迁移和抑制凋亡作用.     

复合镇痛在超脉冲点阵二氧化碳激光治疗小儿烧伤后增生性瘢痕中的应用效果的前瞻性随机对照研究

目的探讨复合镇痛在超脉冲点阵二氧化碳激光(UFCL)治疗小儿烧伤后增生性瘢痕中的应用效果。方法采用前瞻性随机对照研究方法。2018年4月—2020年3月, 将空军军医大学第一附属医院收治的169例烧伤后增生性瘢痕患儿按照随机数字表法分为单纯全身麻醉组[39例, 男19例、女20例, 年龄35(21, 48)个月]、全身麻醉+利多卡因组[41例, 男23例、女18例, 年龄42(22, 68)个月]、全身麻醉+布洛芬栓组[41例, 男25例、女16例, 年龄38(26, 52)个月]以及应用全身麻醉+利多卡因+布洛芬栓的三联用药组[48例, 男25例、女23例, 年龄42(25, 60)个月], 各组患儿在行UFCL治疗瘢痕时分别采用对应的镇痛方案, 并针对患儿治疗过程进行全程综合护理。分别于首次麻醉清醒后0(即刻)、1、2、4 h, 采用儿童疼痛行为量表FLACC对患儿瘢痕进行疼痛程度评估。首次麻醉清醒后4 h疼痛评估结束后, 采用自制的镇痛满意度调查表对患儿或其家属对镇痛效果的满意度进行评估并计算满意率。首次术后2 h内, 观察并记录患儿不良反应, 如恶心呕吐、头痛头晕、嗜睡等发生情...     

脂质体介导质粒转染角朊细胞的影响因素

探讨利用脂质体介导真核表达质粒转染体外培养的人角朊细胞的最佳转染条件。体外分离培养正常人角朊细胞 ,培养至 6 0 %、70 %、80 %、90 %及 10 0 %融合时 ,应用不同浓度的LipofectAMINE包被真核表达质粒pCMV·SPORT β gal,分别转染 6、8、10、12及 2 4h。细胞经转染后再培养 48h ,行 β 半乳糖苷酶原位染色 ,镜下观察并计算阳性转染率。被转染的阳性细胞 ,可见质粒 β 半乳糖苷酶基因的良好表达 ;当细胞融合率为 80 %、90 % ,以12 5 μL/ 10 0 μL的LipofectAMINE包被 1 5 μg/ 10 0 μL的pCMV·SPORT β gal,转染时间为 8h的转染率最高 ,可分别达到 (31 35± 1 35 ) %、(32 32± 2 4) %。该实验说明LipofectAMINE可有效地介导真核表达质粒转染培养的人角朊细胞 ;转染率与细胞生长状态、脂质体包被质粒的浓度比例、及转染时间直接相关。     

系统康复治疗手烧伤的效果及成本评价

目的 了解手烧伤后系统康复治疗的效果,并从经济学角度评价康复治疗的成本.方法 将62例烧伤患者98只患手分为康复组(32例,48只患手)和对照组(30例,50只患手),康复组在烧伤后早期进行系统康复冶疗,对照组给予指导性教育.于治疗前及治疗5个月后采用Carroll 上肢功能评定标准,对2组患者上肢及手的整体功能包括从粗大到精细的抓、握、捏、夹,前臂旋前、旋后,取物、放物及写字等进行定量评定,比较系统康复治疗前后功能恢复情况.统计2组患者5个月内的相关医疗费用,进行成本效果分析. 结果 康复组:37只手的对指、对掌、握、捏功能恢复良好,患者能够独立完成进食、穿衣、如厕、整理个人卫生等日常活动;7只手的对指、对掌、握、捏功能恢复过半,掌指关节恢复较好,而指间关节相对较差,患者可完成手的抓握等粗大动作.精细动作相对较差.灵活、协调性动作较差;4只手困残余肉芽创面,未严格按处方要求坚持治疗,手各关节活动度差,功能受限.对照组:23只手进行了修复手术,14只手功能恢复较好,多数精细动作相对较差.灵活、协调性动作较差,13只手出现严重的爪形手.康复组患者总成本平均值与甲均功能增量值的比值为181±11,明显低于对照组(298±30,P<0.01). 结论 系统康复治疗对手烧伤后畸形有良好的预防和治疗作用,可促进手功能的恢复,改善手部外观.从经济学角度分析,手烧伤后早期进行规范的系统康复治疗是经济、有效的.     

不同皮瓣修复虎口电烧伤的功能与美学效果比较

目的：比较三种皮瓣修复虎口电烧伤的功能与美学效果。方法：本组共有13例15处虎口电烧伤，在臂丛神经阻滞麻醉下急诊清创，依据伤口情况，分别采取3种皮瓣修复。①设计以第一掌背动脉为蒂的示指背皮瓣，宽约5cm，远端达近侧指间关节；可携蒂部分中指背皮肤，形成的皮瓣远端为双叶。②骨间背则动脉为蒂的前臂背侧逆行岛状皮瓣，通过腕部皮下隧道转移。③以旋髂浅或腹壁浅血管为蒂的同侧下腹部薄皮瓣带蒂转移，术后2周断蒂。全部病例随访6个月～3年，评价修复虎口功能与外形。结果：8例11处虎口电烧伤创面以第一掌背动脉皮瓣修复。4例4处虎口损伤以同侧前臂骨间背侧动脉逆行岛状皮瓣修复。1例以下腹部皮瓣带蒂转移修复。15例皮瓣转移后循环良好，创面Ⅰ期修复。1例前臂背侧岛状逆行皮瓣边缘因静脉回流障碍，皮瓣边缘0．5cm坏死。第一掌背动脉皮瓣和同侧前臂逆行皮瓣血运可靠，质地较薄，虎口修复后外形及功能良好。腹部皮瓣可提供较大面积修复组织，供区隐蔽，但修复后虎口外形和功能欠佳。结论：以同侧第一掌背动脉皮瓣或前臂骨间背侧动脉岛状皮瓣修复虎口电烧伤是比较理想的方法。     

43例慢性创面的外科治疗

慢性创面泛指创面愈合过程受到各种因素的干扰,愈合过程延长并超过6～8周.引起慢性创面的原因多种多样,临床常见有褥疮、糖尿病皮肤溃疡、静脉性溃疡、烧伤或外伤后残余创面、放射性溃疡、癌性溃疡等.较大较深的慢性创面往往无法通过换药等保守疗法获得愈合,需要外科手术治疗.     

兔骨髓间充质干细胞体外分离培养及多向诱导分化

背景:间充质干细胞不仅自身免疫原性弱,还可以调节细胞免疫功能,减轻移植物排斥反应,在组织工程中具有良好的应用前景.但骨髓中间充质干细胞含量稀少,约占单个核细胞的十万分之一到百万分之一.目的:建立一种分离、培养扩增兔骨髓间充质干细胞的方法,观察体外培养骨髓间充质干细胞的生长特性,及其潜在的诱导分化能力.方法:采用灌流法获取兔胫骨骨髓,密度梯度离心法联合贴壁培养法体外纯化扩增,相差显微镜观察其形态学特点,MTT法测定绘制传代骨髓间充质干细胞生长曲线,经成骨诱导液(L-DMEN/F12,体积分数为10%胎牛血清,0.1 μmol/L地塞米松,200 μmol/L抗坏血酸,10 mmol/L β-甘油磷酸钠)、成脂诱导液(L-DMEN/F12,体积分数为10%胎牛血清,1 μmol/L地塞米松,200 μmol/L吲哚美辛,0.5 mmol/L IBMX,10 mg/L胰岛素)、成软骨诱导液(L-DMEN/F12,体积分数为10%胎牛血清,10 μg/L转化生长因子β1,0.1 μmol/L地塞米松,50 μmol/L抗坏血酸,6.25 mg/L胰岛素)体外诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞、脂肪细胞及软骨细胞分化,并分别经碱性磷酸酶染色、油红O染色和甲苯胺蓝染色法鉴定.结果与结论:通过密度梯度离心法联合贴壁培养法可在体外大量扩增、纯化骨髓间充质干细胞,所获细胞具有高度自我更新能力和多向分化潜能,原代及传代骨髓间充质干细胞为梭形.经成骨细胞诱导,细胞碱性磷酸酶染色阳性;经成脂肪细胞诱导,细胞内出现红色脂滴,经成软骨细胞诱导,甲苯胺蓝染色阳性.     

复合皮真皮-表皮连接区结构再生与功能重建

目的：为了解复合皮（ＣＳ）真皮－表皮连接（ＤＥＪ）区结构再生及其对ＣＳ功能重建的作用机制。方法：用经胰蛋白酶处理的异体乳猪真皮与自体表皮重组ＣＳ,并以自体表皮为对照（Ｃ组）,对移植术后２～１２４周的活检标本作光镜和透射电镜观察。结果：①ＣＳ组表皮和真皮生长快、成熟早,乳头层组织疏松有序,毛细血管增生迅速,２０～２４周时,乳头和皮钉及以致密板为中心的半桥粒、锚丝、锚纤维等ＤＥＪ区结构形成,以靠近毛细     

瘢痕瘤组织中肿瘤抑制基因Rb、p53 PCR-SSCP分析

目的：探讨瘢痕瘤的发生及其侵袭性生长失控的分子生物学基础。方法：以正常皮肤为对照,对增生性瘢痕和瘢痕瘤组织的ＤＮＡ样本分别作Ｒｂ ｅｘｏｎ（１４ ,２７）和ｐ５３ ｅｘｏｎ （５ ～８） ＰＣＲＳＳＣＰ分析。结果：２６－１ ％（６／２３）的瘢痕瘤于Ｒｂ ｅｘｏｎ ２７ 处有异常电泳带,ｐ５３ ｅｘｏｎ （５ ～８）及其它标本均未见异常。结论：瘢痕瘤的发生或其侵袭性生长失控可能与Ｒｂ 肿瘤抑制基因突变或缺失有关。     

人脂肪间充质干细胞来源外泌体对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞损伤的影响及其机制

目的:探讨人脂肪间充质干细胞（ADSC）来源外泌体对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞（PMVEC）损伤的影响及其机制。方法:采用实验研究方法。取空军军医大学第一附属医院收治的3例行腹部手术切除患者（均为女性,年龄10~25岁）遗弃的新鲜脂肪组织进行原代人ADSC的分离培养,于第5天采用倒置相差显微镜观察细胞形态。取第3代ADS...