双侧脐旁皮瓣修复电烧伤后腹壁洞穿性缺损一例

患儿，男性，6岁，腹部被10kV高压电击伤，伤后48h入院。查体：脐上1cm处大约有3％ Ⅳ度创向，大部门创面腹壁全层皮肤呈焦痂（图1）.腹部B超报告腹部有少量积气。     

组织工程皮肤加速烧烫伤皮肤创面愈合的多中心临床研究

目的 对组织工程皮肤ActivSkin在不同类型烧伤创面临床应用的有效性及安全性作一评估.方法 根据试验要求,选取2003～2004年度4家临床单位的部分烧烫伤患者进行组织工程皮肤临床应用,试验共收集有效病例219名,其中试验组为110名患者,创面应用组织工程皮肤ActivSkin;对照组为109名,创面采用常规保守治疗.患者治疗期间每周进行创面观察,试验随访期为6个月.临床期间观察治疗期患者的创面变化、创面愈合时间和愈合后的创面愈合质量;同时对全身及重要脏器进行检测.统计学分析实验组和对照组平均愈合时间有无显著性差异.结果 与常规保守治疗相比,应用ActivSkin后可明显加速愈合速度,最终达到完全愈合,统计学分析有显著性差异.愈后创面质量明显改善,常规治疗常见的如瘢痕形成、色素沉着等并发症也明显降低.随访观察无任何复发及不良反应,整个临床试验期间也未发现任何免疫排斥反应.结论 这些数据表明组织工程皮肤不仅可直接替代缺损的皮肤组织,而且可持续分泌生长因子及其他促进创面愈合的物质,改善皮肤愈合质量.试验证实组织工程皮肤ActivSkin是一种安全可靠、患者易耐受的组织工程产品;可应用于不同类型的烧烫伤皮肤缺损创面.     

P物质上调正常人真皮成纤维细胞TGF-β1的mRNA表达

目的 探讨神经肽P物质（SubstanceP,SP）与瘢痕形成间的调控关系。方法 体外分离培养正常人真皮成纤维细胞，分别加入SP及其受体特异性拮抗剂L－703，606乙酸盐，MTT法测定细胞生长增殖量；采用细胞爬片法培养细胞，加入SP对细胞作用后，应用TGF－β1mRNA特异性探针行细胞原位杂交，计算细胞的TGF－β1mRNA阳性表达率，并经图像分析测定阳怀细胞TGF－β1mRNA的表达强度，分析SP与真皮纤维细胞TGF－β1mRNA表达间的关系。结果 SP可促进体外培养的正常人真皮成纤维细胞的生长，其作用与SP浓度呈现依赖关系，当浓度达到25ng/ml时，刺激细胞生长的速度达最大值，可使细胞较对照组提前4d融合；正常人真皮纤维细胞受25ng/ml时时，刺激细胞生长的速率达最大值，可命名细胞较对照组提前4d后即可见细胞表达TGF－β1mRNA的阳性率及强度均显著增加；SP对正常人真皮纤维细胞的上述效应，均可被其受体拮抗剂L－703，606乙酸盐所抑制。结论 SP可促进正常人真皮纤维细胞的生长增殖，同时上调细胞的TGF－β1mRNA表达；提示SP可能为皮肤损伤后痕形成过程中启动成纤维细胞表型转化的重要调节因子。     

大鼠皮肤降钙素基因相关肽正常分布及烫伤后改变规律

目的探讨皮肤创面降钙素基因相关肽(CGRP)的来源。方法运用免疫组化技术检测烫伤后早期大鼠皮肤烫伤创面,创周及远处未损伤皮肤内含 CGRP 的神经分布密度改变。结果烫伤后15 min 在以上所有部位的含 CGRP 神经纤维分布密度明显下降。烫伤后6至12 h 达到最低值,而后逐渐恢复,相比之下,在创周恢复过程出现较早;此外,在创面和创周的真皮层 CGRP免疫反应阳性的巨噬细胞样大细胞从局部血管中游出,烫伤后12 h 该细胞与含 CGRP 神经关系密切,烫伤后24 h 该细胞染色增强,破碎并释放大量 CGRP 免疫反应阳性的颗粒状物质,而后这些细胞在局部消失。结论在皮肤创面针对烧伤损害 CGRP 可能不仅从皮肤神经末端释放,也能由局部炎性细胞合成释放。     

大鼠皮肤降钙素基因相关肽正常分布及烫伤后改变规律

目的探讨皮肤创面降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的来源。方法运用免疫组化技术检测烫伤后早期大鼠皮肤烫伤创面,创周及远处未损伤皮肤内含ＣＧＲＰ的神经分布密度改变。结果烫伤后１５ｍｉｎ在以上所有部位的含ＣＧＲＰ神经纤维分布密度明显下降,烫伤后６至１２ｈ达到最低值,而后逐渐恢复,相比之下,在创周恢复过程出现较早;此外,在创面和创周的真皮层ＣＧＲＰ免疫反应阳性的巨噬细胞样大细胞从局部血管中游出,烫伤后１２ｈ该细胞与含ＣＧＲＰ神经关系密切,烫伤后２４ｈ该细胞染色增强,破碎并释放大量ＣＧＲＰ免疫反应阳性的颗粒状物质,而后这些细胞在局部消失。结论在皮肤创面针对烧伤损害ＣＧＲＰ可能不仅从皮肤神经末端释放,也能由局部炎性细胞合成释放。     

瘢痕瘤组织中肿瘤抑制基因Rb、p53 PCR-SSCP分析

目的：探讨瘢痕瘤的发生及其侵袭性生长失控的分子生物学基础。方法：以正常皮肤为对照,对增生性瘢痕和瘢痕瘤组织的ＤＮＡ样本分别作Ｒｂ ｅｘｏｎ（１４ ,２７）和ｐ５３ ｅｘｏｎ （５ ～８） ＰＣＲＳＳＣＰ分析。结果：２６－１ ％（６／２３）的瘢痕瘤于Ｒｂ ｅｘｏｎ ２７ 处有异常电泳带,ｐ５３ ｅｘｏｎ （５ ～８）及其它标本均未见异常。结论：瘢痕瘤的发生或其侵袭性生长失控可能与Ｒｂ 肿瘤抑制基因突变或缺失有关。     

胰岛素强化治疗对烫伤大鼠心肌保护作用的研究

目的 了解胰岛素强化治疗对重度烫伤大鼠心肌的保护作用，并探讨其作用机制。方法 将18只SD大鼠分为3组，每组6只。强化组及烫伤组大鼠背部脱毛造成30％TBSA的Ⅲ度烫伤。强化组伤后即输注胰岛素等渗盐水（含胰岛素0．12U／m1）及100g／L葡萄糖，使大鼠血糖水平控制在4．0～6．6 mmol／L之间，补液总量为2ml·kg^-1。·％TBSA^-1·8h^-1；烫伤组伤后仅给予等渗盐水，总量同前。假伤组模拟烫伤，伤后补充生理量的液体。于伤前及伤后1、2、3、4、5、6 h 抽取大鼠静脉血测定其血糖值。各组大鼠伤后均经右颈动脉插管人左心室并连接生理记录仪，观察左心室收缩压（LVSP）及左心室舒张末期压（LVEDP）。伤后6h，处死各组大鼠，留取左心室组织标本用于心肌细胞肌钙蛋白T的检测。结果 烫伤组大鼠伤后1～6h的血糖值为（7．6±1．7）～（8．4±4．7）mmol／L，均高于强化组[（4．5±0．9）～（5．2±1．3）mmol／L，P〈0．01]。伤后1h，烫伤组LVSP[（60±11）mmHg（1mmHg=0．133kPa）]降低、LVEDP[（21．3±11．3）mmHg]升高，与强化组[（72±8）、（11．7±5．2）mmHg]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。烫伤后各组大鼠肌钙蛋白T在心肌细胞内大量缺失，而强化组缺失程度明显低于烫伤组（P〈0．05）。结论 胰岛素强化治疗对重度烫伤大鼠左心室功能具有明显的保护作用，此作用可能与抑制心肌细胞蛋白的缺失有关。     

用转化医学理念指导烧伤创面修复中的干细胞研究

基于干细胞的高度复制、增殖和多向分化潜能,相关研究已成为生命科学和医学界关注热点,同时部分干细胞研究也从产生概念到走进实验室并逐渐转化成现实.以转化医学的理念,从战略上掌握创面修复中有关干细胞机制和应用技术的研究具有重要意义.因此,在未来有关创面修复领域的干细胞研究中,以下几个方面值得我们重视.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂拮抗人皮肤成纤维细胞转化生长因子β1机制研究

目的 了解过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂拈抗TGF-β1促皮肤瘢痕化的效应机制.方法 体外培养正常成人皮肤Fb,根据培养基中所加刺激物不同分为空白对照组(无血清DMEM培养基),TGF-β1组(DMEM培养基加入含终浓度10 ng/mL TGF-β1作用48 h),曲格列酮组(DMEM培养基加入含终浓度10μmol/L曲格列酮作用2 h,再加入10 ng/mL TGF-β1作用48h),15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)组(DMEM培养基加入含终浓度10 μmol/L 15d-PGJ2作用2 h,再加入10 ng/mL TGF-β1作用48 h).应用蛋白质印迹法检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达,实时荧光RT-PCR检测CTGF、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及血小板源性生长因子(PDGF)的mRNA水平变化.对数据进行单因素方差分析.结果 TGF-β1组的CTGF蛋白和mRNA表达水平均高于空白对照组,曲格列酮组和15d-PGJ2组的CTGF蛋白及mRNA表达水平低于TGF-β1组.空白对照组、TGF-β1组、曲格列酮组、15d-PGJ 2组MMP-1 mRNA表达水平分别为1.281±0.195、0.193±0.051、0.417±0.043、0.485±0.027,其中TGF-β1组低于空白对照组(F=12.811,P＜0.01),曲格列酮组、15d-PGJ2组高于TGF-β1组(F=12.811,P值均小于0.01).空白对照组、TGF-β1组、曲格列酮组、15d-PGJ2组PDGF mRNA表达水平分别为0.349±0.057、1.044±0.237、0.677±0.055、0.511±0.017,其中TGF-β1组高于空白对照组(F=16.848,P＜0.01),曲格列酮组、15d-PGJ2组低于TGF-β1组(F=16.848,P值均小于0.01).结论 激活后的PPARγ对TGF-β1下游反应因子CTGF的抑制作用,可能是其拮抗TGF-β1促皮肤瘢痕化的主要机制,而对细胞因子MMP-1、PDGF的影响可能也是其机制之一.     

胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞核因子κB核移位的抑制作用

目的 了解胰岛素对烧伤血清诱导的血管内皮细胞NF-κB核移位的抑制作用及其相关机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).按照随机数字表法将细胞分为5组:空白对照组,不加任何刺激因素常规培养;正常血清对照组和烧伤血清刺激组,分别用含体积分数20%健康人血清、体积分数20%烧伤患者血清的培养液培养;烧伤血清+胰岛素处理组,在烧伤血清刺激组培养液成分的基础上添加胰岛素(终浓度1×10-7mol/L)进行培养;抑制剂预处理组,预先加入蛋白激酶B(PKB或Akt)特异性抑制剂LY294002(50μmol/L)孵育细胞,30 min后改用培养液(成分同烧伤血清+胰岛素处理组)培养.6 h后,采用扫描电镜观察各组HUVEC损伤情况;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测细胞胞质磷酸化κB-α抑制蛋白(p-IκB-α)和磷酸化Akt(p-Akt)水平,以及胞核NF-κB-p65的蛋白表达变化.结果 (1)扫描电镜观察:与空白对照组HUVEC比较,烧伤血清刺激组、抑制剂预处理组细胞收缩明显,细胞间呈锯齿状连接或连接消失,胞核结构不规整.正常血清对照组及烧伤血清+胰岛素处理组细胞结构有轻微改变,但细胞延展性及胞核结构明显好于烧伤血清刺激组.(2)细胞凋亡率:空白对照组为(15.7±2.2)%.烧伤血清刺激组为(28.5±2.3)%,烧伤血清+胰岛素处理组为(22.3±1.8)%,抑制剂预处理组为(29.7±2.4)%,均明显高于空白对照组(F=14.288,P<0.05或P<0.01);正常血清对照组细胞凋亡率为(17.0±2.5)%,与空白对照组比较差异无统计学意义(F=14.288,P>0.05).与烧伤血清刺激组相比,烧伤血清+胰岛素处理组细胞凋亡率明显降低(F=14.288,P<0.05).(3)蛋白表达水平:与空白对照组相比,烧伤血清刺激组和抑制剂预处理组细胞胞质p-IκB-α与胞核NF-κB-p65的蛋白表达水平明显升高,p-Akt表达水平明显下降;正常血清对照组和烧伤血清+胰岛素处理组3种蛋白水平均与空白对照组接近.结论 胰岛素通过调节磷脂酰肌醇3激酶/Akt信号通路抑制IκB-α磷酸化,继而限制NF-κB核移位,最终发挥改善内皮细胞功能的作用.