热损伤角质形成细胞培养上清对真皮成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1表达的影响

目的探讨角质形成细胞(keratinocytes,KC)热损伤后对真皮成纤维细胞(fibroblasts,Fb)Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)表达的影响。方法分离培养人正常Fb及KC,分别建立KC、Fb热损伤模型;收集正常及热损伤12 h后细胞培养上清,并配制成浓度为50%的细胞条件培养液。根据培养液不同将第3～5代Fb分为3组,分别采用含50%热损伤KC培养上清(A组)、含50%正常KC培养上清(B组)的条件培养液及单纯DMEM(C组)培养,24 h后收集3组细胞;另于培养0、1、2、6、12、24、48 h分别收集A组细胞。采用含50%热损伤Fb培养上清的条件培养液培养Fb,于0、1、2、6、12、24、48 h收集细胞。采用实时荧光定量PCR检测各时间点KC热损伤条件培养上清对FbⅠ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA表达影响,以及Fb热损伤条件培养上清对Fb MMP-1mRNA表达影响。结果 KC热损伤条件培养上清培养24 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均显著高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。培养2、6、12、24、48 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均高于0 h(P<0.05),1 h与0 h差异无统计学意义(P>0.05);随培养时间延长相对表达量逐渐增高,2 h后各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Fb热损伤条件培养上清培养1、2、6、12、24、48 h,MMP-1 mRNA相对表达量与0 h比较,差异均有统计学意义(P<0.05);培养2 h后相对表达量逐渐降低,各时间点间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论热损伤后KC培养上清对FbⅠ、Ⅲ型胶原及MMP-1的表达具有调控作用。     

神经激肽1受体非肽类拮抗剂L-703,606对严重烫伤大鼠早期组织水肿的影响

目的观察神经激肽(NK)1受体非肽类拮抗剂L-703,606对严重烫伤大鼠早期组织水肿及血管通透性的影响。方法将152只SD大鼠随机分为正常对照组(8只),不作烫伤;烫伤对照组(48只),作20%TBSA深Ⅱ度烫伤;L-703,606组(48只)及β-七叶皂苷钠组(48只),分别从大鼠尾静脉注射250nmol/kg的L-703,606和1.8mg/kgβ-七叶皂苷钠,之后30min作20%TBSA深Ⅱ度烫伤。各致伤组大鼠创面伤后不予处理,并于烫伤后1、4、8、24、48、72h处死,取创周及肠组织标本待测,每组每时相点8只大鼠,并取正常对照组标本待测。用改良伊文思蓝渗出法及称取组织干湿重法测定各组大鼠创周和空肠组织血管通透性、组织含水量。结果伤后1h各致伤组大鼠创周及空肠组织血管通透性均较正常对照组增高(P<0.01),伤后4h开始逐渐下降。L-703,606组及β-七叶皂苷钠组创周组织血管通透性均低于烫伤对照组(P<0.01);伤后48、72h,L-703,606组高于β-七叶皂苷钠组(P<0.01).β-七叶皂苷钠组、L-703,606组空肠组织血管通透性伤后24h内低于烫伤对照组(P<0.01),β-七叶皂苷钠组伤后早期低于L-703,606组(P<0.01),伤后72h两组比较差异无统计学意义(P>0.05).组织含水量变化:伤后1h,各致伤组创周组织均呈现缺水状态,以后含水量逐渐升高,于伤后8~24h达峰值。伤后早期各致伤组空肠组织均出现一定的缺水状态,L-703,606组轻于烫伤对照组和β-七叶皂苷钠组(P<0.05或0.01),8h后表现出一定的水肿状态,伤后48h为甚,以L-703,606组水肿最轻,随后逐渐恢复。结论NK1受体非肽类拮抗剂L-703,606能降低严重烫伤大鼠早期创周和空肠组织血管的通透性,减轻组织水肿。     

滥用抗菌药物的危害及对策

自1940年青霉素应用于临床以来，目前已发现或发明的抗菌药物约5000～10000种，其中用于临床的约100种。半个世纪以来，抗菌药物在疾病的治疗中发挥了重要作用。但不管抗菌药物如何功效卓著，总有细菌产生耐药性及不良反应，而且由于长期、广泛的使用，临床上所存在的抗菌药物滥用和浪费现象也日益严重，抗菌药物所遭遇到的耐药问题已严重威胁到人类健康，甚至国家安全和全球稳定。因此，合理使用抗菌药将直接关系到临床治疗效果和用药安全。     

横断毛囊体外再生的形态学研究

目的：研究毛囊横断后再生的条件，探索毛囊干细胞的初步定位．方法：将人头皮分离成游离的毛囊，共进行了8批横断毛囊培养，每批培养毛囊约30根，每批分3组，从不同位置(紧贴毛球、毛囊下1／3处、毛囊下1／2处)横断毛囊后进行培养，观测毛囊的生长情况及形态学改变．结果：紧贴毛球上方或在毛囊下1／3横断，上段毛囊大部分可以再生出新毛球样结构，毛囊可继续生长，上段毛囊平均生长长度分别为0．78mm和0．67mm，可生长比例分别为75％和70％；在毛囊下1／2横断，上段毛囊可生长比例仅为12．5％，明显低于前两组(P＜0．01)．结论：在一定位置横断毛囊，上段的毛囊细胞可以发生增殖分化，毛囊可以继续生长，并再生出新的毛球样结构，表明上段毛囊是其干细胞所在地．     

三种类型手夹板在预防和治疗烧伤后手畸形中的应用

目的：研究三种类型手夹板对烧伤后手畸形的预防和治疗作用。方法：在烧伤后的不同时间，为20例烧伤手分别制作并使用保护位夹板、动态夹板和掌指屈曲手套，观察早期及使用3个月后手功能改善的情况。采用Carroll上肢功能评定标准对上肢及手的整体功能进行定量评定。结果：治疗3个月后烧伤手的诸关节活动度均增大，20例烧伤患者均未出现爪形手等典型的手畸形，上肢及手的功能评定显示功能等级明显增高。结论：手烧伤后不同时间使用不同的手夹板，对预防和治疗烧伤后由瘢痕挛缩引起的手关节强直及关节畸形有良好的效果，可改善手功能。     

强化胰岛素对严重烧伤大鼠心肌细胞TNF-α表达的抑制作用

目的探讨强化胰岛素对严重烧伤大鼠心肌细胞TNF-α表达的抑制作用及其可能机制。方法健康雄性SD大鼠18只,右颈静脉及左心室插管,随机均分为3组:假伤组,大鼠给以假烫;烧伤组,制作30%TBSAⅢ度烫伤后,常规给以液体复苏;强化组,烫伤后给以强化胰岛素治疗,液体总量同烫伤组。测定伤后0、1、2、3、4、5、6h的血糖及左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LV-EDP)。伤后6h处死动物,留取左心室组织,分别用ELISA和定量PCR法测定TNF-α蛋白及其mRNA水平,Westernblot观察p-IκBα和IκBα变化。同时用烧伤血清培养新生鼠心肌细胞,观察胰岛素及其活化抑制剂LY294002对p-IκBα水平的影响。结果与假伤组比较,烧伤组动物伤后出现应激性高血糖反应,LVSP降低,LVEDP升高,左心室组织TNF-α蛋白及mRNA水平升高,p-IκBα蛋白表达增高,IκBα蛋白表达降低(P<0.05或0.01)。烧伤大鼠经强化胰岛素治疗后,血糖维持在4.5～5.2mmol/L之间,左心室功能得到明显改善,左心室组织TNF-α蛋白及mRNA水平显著降低,κBα的磷酸化和降解明显减轻(P<0.05或0.01)。LY294002能够消除胰岛素对烧伤血清培养心肌细胞κBα磷酸化的抑制作用。结论强化胰岛素可能通过减少IκBα的磷酸化降解而降低NF-κB活化,进而抑制心肌细胞TNF-α的转录与表达,发挥改善心肌功能的作用。     

一种大鼠烫伤后皮肤移植模型的建立

目的建立一个模拟临床深Ⅱ度烧伤后3种不同厚度皮肤移植的动物模型。方法在每只大鼠背部制作两处相当于体表面积(TBSA)1%的深Ⅱ度烫伤,每一处切痂后随机行刃厚、中厚、全厚三种厚度自体皮肤中的一种移植,每组皮片5个标本, 移植后采用3种方法固定皮片,组织学观察、测量三种厚度皮片的厚度,观察皮片的成活率、自身皮源是否充足、固定方法的有效性及移植皮片可取材的次数。结果刃厚、中厚、全厚皮片厚度分别为(0.60±0.04),(0.95±0.06),(1.25±0.06)mm,组间有显著差别(P<0.05),组织学观察与人的相对应的三种皮片间差别类似,成活率分别为0.98±0.02,0.97±0.02,0.97±0.01,组间无显著差别(P>0.05);自体皮肤移植所需皮源充足,皮片移植固定方法有效,可以满足多于5次以上的取材。结论这一模型能够模拟临床深Ⅱ度烧伤后外科手术治疗过程,操作简便、结果稳定。     

β-七叶皂苷钠对烫伤后休克期大鼠的抗渗作用

目的:探讨β-七叶皂苷钠对烫伤后休克期大鼠血管通透性和组织水肿情况的影响,并观察了β-七叶皂苷钠对创周组织微血管结构的影响.方法:将SD大鼠分为正常对照(NC)组,烫伤对照(SC)组和β-七叶皂苷钠(AC)组.用电烫仪对SC组和AC组大鼠制作深Ⅱ°烫伤模型(20%TBSA).烫伤前30 min,采用尾静脉注射的方法对AC组大鼠给予β-七叶皂苷钠(1.8 mg·kg-1),NC组和AC组大鼠分别注射等量0.9%氯化钠注射液.应用改良伊文思蓝渗出法测定了烫伤后早期72h内创周和空肠血管通透性,并测定了组织含水量变化,采用硝酸镧示踪电镜技术观察了创周组织微血管结构的变化.结果:与SC组相比,β-七叶皂苷钠可以明显抑制烫伤后早期血管通透性增高,减轻组织水肿发生,并能减轻创周组织微血管结构的的病理性改变.结论:烫伤后早期应用β-七叶皂苷钠可以明显减轻烫伤后休克期组织内外渗加剧,因此对烧伤后早期休克及并发症的预防和治疗有重要意义.     

干细胞对创面愈合作用的研究进展

各种创伤造成的皮肤缺损直接影响患者的生活质量，甚至危及生命，尽快闭合创面、恢复功能、最终达到外表美观是治疗的目的。皮肤创面愈合是一个生物合成、细胞迁移分化过程的完美结合，包括炎性反应、细胞增殖、血管再生及重塑几个阶段。近20年，随着细胞学及分子生物技术的突飞猛进，人们对创面修复及组织重建的研究也有了很大的进展。     

晚孕期脐带绕颈缠绕类型与胎儿脐动脉、大脑中动脉血流参数的相关性

目的:探究晚孕期脐带绕颈缠绕类型与胎儿脐动脉(UA)、大脑中动脉(MCA)血流参数[阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期峰值流速舒张期流速比值(S/D)]的相关性.方法:选择已确诊为脐带绕颈的晚孕期产前检查孕妇66例,依据脐带绕颈缠绕类型分为三组,L型纳入L组(n=6),C型纳入C组(n=47),α型纳入α组(n...