肝细胞生长因子促进神经干细胞向神经元细胞方向的分化

目的观察肝细胞生长因子(HGF)对神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。方法取孕14~17d的胚胎大鼠,分离其脑组织,以无血清培养基培养,得到神经干细胞后,加入HGF诱导其定向分化,以免疫细胞化学和流式细胞术的方法来鉴定分化得到的神经元细胞及其比例。结果加入HGF和胎牛血清(FBS)的实验组镜下神经元细胞较仅加入胎牛血清的对照组多,流式细胞术计数分化成神经元细胞的比例为55·76%,而对照组阳性率为32·69%;镜下直接计数实验组NSE阳性神经元的比例为(53·34±2·81)%,而对照组仅(30·78±3·13)%(P<0·05)。结论HGF具有促进神经干细胞向神经元细胞方向分化的作用。     

脐带源间充质干细胞体外分离培养后形态学与表面抗原的鉴定

目的：观察脐带中含有的间充质干细胞体外分离、纯化及培养条件，并对其进行生物学特性、分化能力和表面抗原的鉴定。 方法：实验于2004-10／2005-07在江苏省人民医院中心实验室完成。①无菌条件下取正常足月剖腹产的脐带近胎儿段，剔除动静脉，取出其中的间质组织，胶原酶消化法原代培养细胞进行培养和纯化获得贴壁细胞。②用流式细胞仪检测间充质干细胞表面抗原的表达情况。③对间充质干细胞多向分化的能力进行初步鉴定。 结果：①来源于脐带的单个核细胞经体外培养贴壁后出现间充质样的细胞，间充质细胞为成纤维样的细胞形态。②第1，3，5，7代细胞生长曲线基本相同。其生长共同特性：传代培养潜伏期约为24-36h；传代培养对数增殖期约为4-6d；对数增殖期结束后至接种后八九天，生长进入平台期。③表达间充质干细胞相关的抗原CD105，CD44，但不表达造血细胞抗原CD34，CD45，这与源于骨髓的间充质干细胞一致。④加入诱导剂5h后表现出典型的神经元样细胞形态，伴少量细胞开始死亡。24h后死亡细胞明显增多；诱导后的神经元样细胞NSE表达明显增强。 结论：入脐带来源的间充质干细胞能在体外培养、扩增，并且具有和骨髓源间充质干细胞类似的生物形态和抗原表型。     

大型听神经瘤术中肌电图、脑干听觉诱发电位对面神经功能保留的监护作用

目的研究面肌肌电图（ＥＭＧ）、脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）监护技术在大型听神经瘤手术中对面神经保留的作用。方法经枕下入路行显微手术全切除肿瘤,术中同时监测面ＥＭＧ、ＢＡＥＰ。结果肿瘤全切率１００％,面神经解剖保留率９４％,功能保留良好率８１％。术末刺激强度≤０．４ ｍＡ者提示预后良好。结论大型听神经瘤显微手术中,通过面ＥＭＧ、ＢＡＥＰ监护可显著提高面神经的功能保留率并能提供客观指标提示预后。     

电脑控制功能性电刺激辅助截瘫患者行走系统

一套新电脑控制功能性电刺激辅助截瘫患者锻炼和行走的系统，已被应用于截瘫患者的肌力、肌耐力，站立和行走锻炼。主要设备包括紫金Ⅱ号计算机、多通道功能性刺激仪、股四头肌抗阻力锻炼椅、阻力可调式固定脚踏车及软件系统等。该系统辅助站立行走采用双侧股四头肌、骶棘肌、臀大肌及下肢曲屈肌群组合参与功能，有效地延缓了肌疲劳的发生，增加了站立时间和行走距离，并且使起立动作过程轻松平稳，接近自然起立过程，使功能性电刺激辅助行走具有平衡协调动作。经临床应用建立了一套功能性电刺激辅助截瘫患者行走的康复锻炼方法和锻炼过程．电脑的应用使整个系统具有初步智能自控能力。１例３１岁男Ｔ１０外伤性完全性截瘫已达８年的患者、应用本系统锻炼后肌力、肌容积、肌耐力及全身情况均获得了明显改善，现已能在本系统的辅助下持续站立达 １５ｍｉｎ，可平稳地扶杠行走３０多步。     

硫酸镁对脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的：探讨不同时间、不同剂量硫酸镁对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经功能的保护作用。方法：50只雄性SD大鼠被随机分为再灌注前高硫酸镁组、再灌注前低硫酸镁组、再灌注后高硫酸镁组、再灌注后低硫酸镁组和对照组共五组。采用改良的Longa′s法制作脑缺血再灌注模型,术后4h予以再通。术后6h采用胡氏脑组织微量分析法,测定梗死脑组织的Na^ 、K^ 、水含量,术后24h先进行神经病学评分,再断头取脑染色后进行梗死灶体积的测定。结果：硫酸镁治疗组与对照组相比,梗死灶体积缩小,脑水肿减轻,神经功能恢复好。治疗效果高硫酸镁组优于低硫酸镁组,再灌注前组又优于再灌注后组,其中再灌注前高硫酸镁组效果最为显著。结论：硫酸镁对脑缺血后再灌注损伤有明显地神经保护作用,且治疗效果与治疗时间早晚和剂量大小密切相关。     

单鼻腔经蝶内镜辅助垂体瘤手术与经口鼻蝶窦垂体瘤手术的比较研究

目的比较总结单鼻腔经蝶内镜辅助垂体瘤手术和经口鼻蝶窦垂体瘤手术的临床疗效及特点。方法前瞻设计,将近2年75例垂体瘤病例以2:3随机分为单鼻腔经蝶内镜辅助手术(Ⅰ组29例)和经口鼻蝶窦手术(Ⅱ组46例)2组,进行比较研究。结果术前2组病例临床资料无明显差异(P>0.05);肿瘤切除率:Ⅰ组27/29;Ⅱ组39/46;出血情况:术中平均输血量Ⅰ组50 mL,Ⅱ组200 mL(P<0.01)。术后48 h内鼻部敷料平均更换次数Ⅰ组0 次,Ⅱ组3次。其他:①术中误伤鞍隔脑脊液漏Ⅰ组1例,Ⅱ组5例;②术后尿崩Ⅰ组3例,Ⅱ组14例;③术后内分泌功能恢复者Ⅰ组11例(11/19),Ⅱ组10例(10/32);④术后鼻外形改变Ⅱ组31例,鼻中隔穿孔Ⅱ组3例,蝶窦囊肿Ⅱ组2例,而Ⅰ组均未见此类病例;⑤术后平均住院Ⅰ组5 d,Ⅱ组8.7 d。2组病例均无手术死亡和感染病例。结论单鼻腔直接经蝶垂体瘤手术就手术入路比较而言具有损伤小、出血少、并发症少及恢复快的优点。内镜辅助垂体瘤手术可提高全切除率和治愈率,并可减少鞍内组织损伤、减少并发症。     

脑动脉瘤栓塞治疗并发症的防治

目的 探讨脑动脉瘤栓塞治疗中并发症的发生原因及其防治.方法 应用电解铂金圈(EDPC)栓塞治疗脑动脉瘤108例(112个),对术中并发症发生的原因、预防和治疗措施等进行回顾性分析.结果 108例中11例发生并发症(10.2%).其中,动脉瘤破裂出血3例,2例经继续栓塞止血.铂金圈疝人载瘤动脉3例(均为后交通宽颈动脉瘤,导致同侧颈内动脉闭塞,1例因侧枝循环良好而无临床症状,1例左侧偏瘫,另l例右侧偏瘫伴失语).铂金圈解旋、留置体内1例,长期抗凝无任何临床症状.栓塞事件3例,经处理术后未遗留神经功能障碍.故并发症导致永久性神经功能障碍者2例(2%),一过性神经功能障碍4例(4%).无死亡病例.结论 术中发生并发症与操作、动脉瘤结构和血管条件等有关,术前研究动脉瘤和载瘤动脉的形态结构、正确处理术中意外和提高栓塞技术是减少并发症的关键.     

逆转录病毒介导Fcy::Fur融合基因联合5-FC治疗裸鼠体内胶质瘤实验研究

目的:构建含融合自杀基因Fcy::Fur重组逆转录病毒,用自杀基因治疗系统Fcy::Fur/5-氟胞嘧啶(5-FC)对裸鼠胶质瘤进行体内抑瘤作用的实验研究.方法:扩增Fcy::Fur基因并构建Fcy::Fur基因重组逆转录病毒载体:载体转染包装细胞获得高滴度病毒并转染鼠胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆;构建稞鼠荷胶质瘤动物模型,腹腔注射5-FC,观察裸鼠肿瘤重量变化及电镜、流式细胞仪(FCM)检测肿瘤的凋亡.结果:PCR法扩增出全长Fcy::Pur基因,经测序证实序列正确;构建了PLXSN-Fcy::Fur逆转录病毒载体,裁体转染包装细胞PT67,获得滴度为3.5×106 CFU/ml的逆转录病毒:转染C6获转基因阳性克隆C6-Fcy::Fur,检测C6-Fcy::Fur有Fcy::Fur基因的mRNA表达;裸鼠前肢背部接种转基因细胞,成瘤后腹腔注射5-FC,转基因肿瘤的生长较对照组明显抑制.FCM法检测到凋亡峰,电镜观察到转基因肿瘤细胞有凋亡小体.结论:AdE1CMVCD与5-FC联合在体内对胶质瘤有明显的抑制作用,为临床胶质瘤基因治疗提供了可靠的理论及应用依据.     

多 b 值弥散加权成像术前预测垂体瘤质地的研究

目的探讨多b值磁共振弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)及表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)术前预测垂体腺瘤质地的应用价值。方法选取57例术后病理证实为垂体腺瘤的患者纳入研究。所有患者均在术前进行3. 0 T MRI多b值DWI扫描(b=0,b=1 000 s/mm~2,b=2 000 s/mm~2),以及内分泌激素检查。选取两种b值(b=1 000、2 000 s/mm~2)重建ADC图,并获取肿瘤实质区域的ADC值。根据术中肿瘤质地将患者分为质软组及质韧组;比较两种b值下,质软组与质韧组ADC均值的差异性;并分析肿瘤质地与患者性别、年龄、激素分型及肿瘤胶原含量的相关性。结果 b1000中,质软组与质韧组ADC均值的差异无统计学意义(P 0. 05); b2000中,两组间ADC均值的差异有统计学意义(P 0. 05)。在b1000和b2000中,肿瘤质地与患者年龄、性别及激素分型均无明显相关性;而质软组的肿瘤胶原含量均明显低于质韧组(均P 0. 05)。结论垂体腺瘤的质地与ADC值及肿瘤胶原含量有密切关系,与患者的性别、年龄及激素分型无关。DWI和ADC可在术前预测肿瘤质地,为手术入路的选择提供影像学依据。     

人疱疹病毒6型感染与神经胶质瘤关系的初步研究

目的:研究人疱疹病毒6型(human herpesvirus-6,HHV-6)感染与神经胶质瘤的关系?方法:巢式PCR法检测40例神经胶质瘤样本和13例正常脑组织样本中HHV-6?人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)?HHV-7 DNA序列?免疫组化染色法检测神经胶质瘤样本和正常脑组织样本中HHV-6?HCMV?HHV-7抗原的表达?结果:巢式PCR法检测结果显示,神经胶质瘤组织HHV-6 DNA阳性率为42.5%,正常脑组织HHV-6 DNA阳性率为7.7%(P = 0.020),神经胶质瘤组织HCMV?HHV-7 DNA阳性率分别为20.0%和5.0%,正常脑组织未检测到HCMV和HHV-7 DNA(P值分别为0.087和0.566)?进一步用免疫组化染色法检测HHV-6早期抗原p41的表达,神经胶质瘤组织阳性率为27.5%,正常脑组织未见阳性表达(P = 0.030)?同时检测HHV-6晚期抗原gp116/64/54的表达,神经胶质瘤组织阳性率为32.5%,正常脑组织未见阳性表达(P = 0.014)?用HCMV pp65抗体进行免疫组化染色后发现其在神经胶质瘤中阳性率为12.5%,正常脑组织未见阳性表达(P = 0.229)?HHV-7 pp85抗原在神经胶质瘤样本和正常脑组织样本中均未检出阳性表达?结论:根据PCR和免疫组化的检测结果,HHV-6感染在神经胶质瘤和正常脑组织中具有显著性差异,HHV-6感染在神经胶质瘤的病因和发展过程中起了一定作用?