放线共生放线杆菌白细胞毒素水平检测

目的　检测放线共生放线杆菌 (Actinobacillusactinomycetemcomitans,Aa)临床分离菌株白细胞毒素水平 ,区分高毒株与低毒株。方法　应用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)检测白细胞毒素操纵子启动子区域基因序列的差异。检测临床菌株 6 8株 ,其中b型 17株 ,c型 42株 ,a型9株。阳性对照高毒株为JP2 ,低毒株为ATCC43717等 5株Aa国际参考菌株 ,阴性对照为 12株异种菌国际参考菌株。结果　 6 8株临床分离菌株扩增片段均为 10 2 2bp ,JP2扩增片段为 492bp ,ATCC43717等 5株扩增片段均为 10 2 2bp ,12株异种菌参考菌株无扩增片段出现。结论　 6 8株临床分离菌株全部为低毒株     

半定量PCR检测致龋性变形链球菌的技术及应用

目的 创建一种临床半定量检测致龋性变形链球菌的分子生物学方法。方法 采用靶基因与参照基因同步扩增法，根据变形链球菌葡聚糖酶(dexA)基因序列，作者设计一对特异性引物，以pET23b质粒DNA为参照基因。对196名儿童的唾液样品进行半定量PCR检测并进行常规培养法的对比研究。结果 196份唾液样品半定量PCR检测致龋性变形链球菌大于等于10^5CFU／ml(每毫升菌落形成单位)唾液的检出率为91．3％。与常规培养计量法的对比符合率为94．9％。结论 变形链球菌PCR半定量检测是一种早期发现龋病活性的新方法，具有快速可靠，特异性强，符合率高等特点，故具有广泛的临床应用前景。     

凝血因子Ⅷ内含子ⅩbaⅠ多态位点检测及其在血友病A产前诊断中的应用

目的建立凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因内含子22的Ⅹba Ⅰ多态位点高特异的基因连锁分析法，并应用于血友病A（HA）家系中孕妇携带者检测及产前基因诊断。方法用长距离PCR特异性扩增206个无血缘关系个体中FⅧ基因内含子226．2kb片段并进行Ⅹba Ⅰ酶切，计算Ⅹba Ⅰ多态性位点的基凶频率和多态信息量；用内含子22例位检测及FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ，BclⅠ，HindⅢ和（CA）n二核苷酸重复序列多态性位点和FⅧ基因外DXS52多态性位点对20个HA家系进行间接基因诊断。结果ⅩbaⅠ多态性位点的基因频率和多态信息量分别是0．5475和0．4955；20个HA家系中，7个为内含子22倒位，13个非倒位家系中有6个家系Ⅹba Ⅰ均提供多态信息，其中2个家系只能用Ⅹba Ⅰ作出分子诊断，诊断率达46．15％；两个或两个以上连锁分析方法均提供多态信息的有8个家系。结论改进的FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ多态位点是一个特异性高，信息量大的分子诊断标志。联合用22内含子倒位及Ⅹba Ⅰ等5种间接检测方法大大地提高了HA基因诊断率。是防止患儿出生，阻断致病基因传递的有效措施。     

中国大学生焦虑相关人格特质与5-羟色胺转运体基因多态性的相关性分析

目的调查5-羟色胺转运体基因上游调控区多态性位点(5-HTTLPR)与第二内含子多态性位点(5-HTTStin2)在中国汉族人群中的基因频率，比较这2个多态位点在种族间的差异，并且首次在中国大学生人群中对这2个多态位点与焦虑相关人格特质进行相关性研究。方法利用聚合酶链反应(PCR)等方法对222名随机健康汉族中国人中的这2个多态性位点进行了群体遗传学研究。并在148名大学生中对这2个位点与焦虑相关人格特质进行了相关分析。结果对于5-HTTLPR多态信息含量为0．352；5-HTTStin2多态信息含量为0．153。等位片段频率在中国汉族人与美国黑人及白人、西欧人、土耳其人有着显著差异，而与日本人相似。在148名大学生中进行的这2个位点与焦虑相关分析未能得出阳性结论。结论5-HTTLPR及5-HTTStin2这2个多态位点在不同种族和人群中的分布有差异；相关分析结果不支持在中国汉族人群中这2个多态位点与焦虑相关人格特质有关。     

十四味建中汤对再生障碍性贫血小鼠脾细胞基因表达的影响

目的：从分子水平探讨补肾健脾中药十四味建中汤治疗再生障碍性贫血(再障)的作用机制。方法：建立再障小鼠模型，通过抑制差减杂交，分离十四味建中汤治疗组小鼠和模型对照组小鼠之间脾细胞的差异表达基因。结果：分离出10个经十四味建中汤治疗后表达上调的差异表达基因，3个经十四味建中汤治疗后表达下调的差异表达基因。十四味建中汤促进免疫球蛋白a链恒区、a珠蛋白、β^maj珠蛋白、层粘连蛋白受体、谷胱甘肽过氧化物酶、核糖体蛋白S6等基因表达，抑制鸟氨酸脱羧酶抗酶等基因表达。结论：十四味建中汤治疗再障小鼠有效，可促进再障小鼠造血和免疫器官脾脏等功能的恢复。中医补肾健脾疗法的机制可能与上述基因表达变化有关。     

多重链接探针扩增技术在染色体非整倍体畸变诊断中的应用

目的 探讨多重连接探针扩增(multiplexligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在13、18、21、X、Y染色体非整倍体畸变诊断中的应用价值.方法 收集本院经染色体核型分析确诊包括有上述5种染色体数目异常及正常的样本共44份,其中外周血30份、胎儿脐带血10份、羊水4份,提取标本DNA,采用MLPA技术对样本染色体数目进行分析,并与染色体核型分析结果进行比对.结果 42例样本检测结果与染色体核型分析结果一致,1例染色体核型分析未能作出判断的标记染色体片段被识别为Y染色体片段,1例21-三体嵌合体未能做出明确判断,临床检出率97.7%(43/44).结论 MLPA技术通过单管反应同时检测40多个不同靶基因序列的拷贝数,具有高通量、特异、便捷及成本较低等特点,可应用于常见染色体非整倍体畸变的临床诊断和产前诊断.     

新疆蒙古族人群血管紧张素转换酶基因多态性与冠心病的相关性研究

目的：探讨新疆蒙古族人群血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）的相关性。方法：新疆奎屯地区41例蒙古族冠心病患者和82名健康人入选,应用PCR联合限制性内切酶法检测所有对象ACE基因多态性。结果：ACE基因多态性在被检测的冠心病和健康人群中的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。蒙古族健康人群的ACE基因多态性DD、II、ID基因型频率分别为24%、49%、27%,D和I等位基因频率分别为62%和39%。冠心病患者ACE基因多态性DD、II、ID基因型频率分别为36%、44%、20%,D和I等位基因频率分别为54%和46%。两组比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）,且男女间比较差异也无统计学意义（P均〉0.05）。结论：ACE基因多态性可能与新疆奎屯地区蒙古族人群冠心病的发生无相关性。     

新疆不同民族冠心病患者eNOS基因894G/T多态性研究

目的：探讨新疆不同民族冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）人群内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因多态性及相关性。方法：应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）技术对新疆地区272例不同民族冠心病患者（汉族42例、维吾尔族71例、哈萨克族73例、蒙古族86例）进行eNOS基因894G/T多态性分析。结果：eNOS基因多态性在被检新疆不同民族人群中的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。新疆汉族、维吾尔族、哈萨克族、蒙古族冠心病患者的eNOS基因894G/T多态性GG、GT、TT基因型频率分布分别为76%、14%、10%;75%、4%、21%;59%、21%、20%;81%、7%、12%,G和T等位基因分布频率分别为83%、17%;77%、23%;69%、31%;85%、15%。汉族、蒙古族与维吾尔族、哈萨克族的TT基因型频率比较差异有统计学意义（P﹤0.05）,其余基因型频率、G和T等位基因频率比较差异均无统计学意义（P﹥0.05）。结论：eNOS基因894G/T位点的突变可能与新疆维吾尔族与哈萨克族冠心病有关,但目前还不能完全排除新疆汉族、蒙古族冠心病的发生与eNOS基因894G/T突变的相关性。     

肥厚型心肌病患者血管紧张素转换酶基因型分布

为探讨血管紧张素Ｉ转换酶(ＡＣＥ)基因插入/缺失(Ｉ/Ｄ)多态性与国人肥本研究受北京市医学重点学科扶植项目资助作者单位:100020北京,首都医科大学附属北京红十字朝阳医院厚型心肌病(ＨＣＭ)和高血压合并左心室肥厚(ＨＨ)的相关情况进行此研究。一、资料与方法1.ＨＣＭ组:共40例,男22例、女18例,年龄14～70(53.4±19.8)岁。诊断符合临床和超声心动图诊断标准。平均室间隔厚度2.0ｃｍ(1.4～2.5ｃｍ)。左室流出道压差为(43.2±24.7)ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ=0.133ｋＰａ)。除外其它疾病所致心肌肥厚,其中梗阻型28例,非梗阻型12例。已排除Ｂ肌球蛋…     

新疆维吾尔族冠心病患者eNOS基因G894T多态性分析

目的:探讨新疆维吾尔族人群内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因多态性与冠心病的相关性.方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),检测新疆维吾尔族75例正常个体和71例冠心病患者eNOS基因G894T多态性.结果:新疆维吾尔族正常个体及冠心病患者的eNOs基因G894T多态性GG、GT、TT基因型频率分布分别为0.73、0.16、0.11和0.75、0.04、0.21,C和T等位基因分布频率分别为0.81、0.19和0.77、0.23,冠心病患者GT基因型频率下降,TT基因型频率升高,差异有统计学意义.结论:eNOS基因G894T多态性分析,可能与新疆维吾尔族冠心病有关.