抗坏血酸钛体外致突变性研究

关于钛在动、植物体内的生物活性文献早有报道。近年来,我国对钛在农、牧、养殖业中的应用研究已取得了明显效益。为推广应用,必须对钛化合物使用的安全性作出评价.为此,作者采用多终点体外毒理学试验方法,研究了抗坏血酸钛的致突变性。     

人类可以决定自己的身高──和身材矮小者谈对策

人类可以决定自己的身高──和身材矮小者谈对策本文内容提示成年人身高：男１５６厘米、女１４４厘米以下称为矮小；男１６２厘米、女１６０厘米以下，称为中下等身高。２２岁以下，为身材矮小和中下等身高而苦恼的青少年们，想增高不再是梦想。沈阳医学院儿保专家郭宪福...     

定量聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌

目的 创建一种临床定量检测致龋性变形链球菌的分子生物学方法。方法 采用靶基因与参照基因同步扩增法，根据变形链球菌葡聚糖酶（dexA)基因序列，设计一对特异性引物，以pET23b质粒DNA为参照基因。对196名儿童的唾液样品进行定量PCR检测并进行常规培养法的对比研究。结果 196份唾液样品定量PCR检测致龋性变形链球菌≥10^8CFU/L，唾液的检出率为91.3%。与常规培养计量法的对比符合率为94.9%。结论 变形链球菌PCR定量检测是一种早期发现龋病活性的新方法，具有快速可靠、特异性强、符合率高等特点，有广泛的临床应用前景。     

基因芯片用于SARS早期诊断和病毒载量时相监测研究

目的：采用基因芯片技术对严重急性呼吸综合征(SARS)患者进行病毒载量时相监测，为SARS早期诊断提供参考指标。方法：4例确诊非重症SARS患者，在病程的3～30d中，间隔2-6d共7次连续采样。检测标本种类为血液和呼吸道分泌物(痰或鼻、咽拭子)。血标本26份，呼吸道分泌物标本24份．共计50份。对SARS—CoV复制酶(replicase)1A、刺蛋白(spike glycoprotein)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein)的编码序列区域进行检测和杂交。基因芯片有严格的反应内控体系和防止污染手段。结果：4例SARS患者在病程第4天第1次采样时，2例患儿呼吸道标本阳性，在病程9～18d第2、3次采样时，4例患者的所有标本检测均为强阳性或中等程度阳性。在病程18～23d、第4、5次采样时，所有标本均表现为阳性程度减弱或转为阴性。到病程的22—30d第6、7次采样检测时．4例患者的呼吸道分泌物和血标本已全部无病毒核酸检出。结论：基因芯片技术为SARS早期诊断和病毒载量时相监测提供了有参考意义的实验数据．     

孕妇外周血中游离DNA分级分离方法的应用研究

目的探讨DNA片段差异性分级分离法对孕妇血浆中胎儿游离DNA富集的效果。方法取孕中期孕妇静脉血5 ml，分别提取血浆中游离DNA和白细胞DNA，用琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段，回收〈400、400—1 000、1 000—3 000 bp部分凝胶中的DNA，扩增16个短串联重复序列（STR）遗传标志位点，同时扩增和检测孕妇白细胞基因组DNA和胎儿羊水细胞基因组DNA作对照，然后，用ABI 310基因分析仪检测。结果共检测3例孕妇外周血标本48个STR位点，其中有意义位点（即胎儿父源性等位基因可与孕妇等位基因区分的STR位点）31个。从血浆总DNA、〈400、400—1 000和1 000—3 000 bp DNA组中成功检测到胎儿等位基因的位点数占有意义位点数的百分比分别为6．45％、29．03％、38．71％和9．68％，各组检出成功率的差异有统计学意义（r=13．432，P=0．004），而〈400和400—1 000 bp DNA组成功率较高。结论孕妇血浆DNA中短片段组分（〈1 000bp）胎儿DNA含量相对较高，有望应用于无创性胎儿产前诊断。     

快速鉴定苯丙酮尿症模型小鼠基因型的新方法应用

目的:建立融解曲线法和变性高效液相色谱(DHPLC)法准确、快速地鉴定苯丙酮尿症(PKU)模型小鼠的基因型。方法:融解曲线法采用聚合酶链反应(PCR)扩增包含模型小鼠pah基因点突变位点序列的132bp片段,将该产物予Alw26I酶切后,加入微量SYBR Green I,在实时PCR仪上行融解曲线分析,同时,酶切产物行12%聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。DHPLC法是直接将132bp片段扩增产物采用在部分变性条件下(60.9℃)行DHPLC分析,根据不同图谱作出基因型诊断。结果:融解曲线分析表明,野生型小鼠的DNA片段在84℃和81℃出现2个融解峰,突变纯合型小鼠DNA片段在76.5～77.5℃和81℃出现2个融解峰,杂合型小鼠DNA片段则在84℃、81℃和76.5～77.5℃均出现融解峰,3种峰型明显可被区分。DHPLC优化了最佳分离效果的柱温,在优化的最佳条件下,DHPLC图谱显示杂合型小鼠DNA具有显著特色的峰型,即除同源双链峰外,出现一个异源双链峰。上述2种新方法共检测了PKU模型小鼠突变纯合型20只、杂合型22只,野生型11只,2种方法检测结果一致,并且与经典的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法结果一致(动物毛色等表型也完全一致)。结论:融解曲线法和DHPLC法均能准确、快速地鉴定模型小鼠的基因型,具有自动化、高通量等优点。     

凝血因子Ⅷ基因内四个短串联重复序列多态性及其在血友病A基因诊断中的应用

目的 调查中国人群凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子1、24、13和22中4个短串联重复序列(short tandern repeat,STR)的多态性,建立单管四重荧光PCR方法以用于血友病A的基因诊断.方法 采用单管四重荧光PCR扩增220名无血缘关系女性FⅧ基因内含子1、24、13和22内的STR片段,用ABI310型基因分析仪进行毛细管电泳分析片段长度,DNA测序检测二核苷酸重复数.用上述方法对96个血友病A家系进行基因诊断.结果 STR1、STR 24、STR13和STR22分别检出7、9、10和7种基因型;多态信息量(polymorphism information contents,PIC)分别为0.3789、0.4055、0.5239和0.4713;杂合度分别为34.55%(76/220)、38.18%(84/220)、49.55%(109/220)和43.64%(96/220).对96个血友病A家系进行基因诊断,STR1、STR24、STR13和STR22的单独可诊断率分别为38.54%(37/96)、38.54%(37/96)、54.17%(52/96)和42.71%(41/96),联合4个位点的可诊断率达79.17%(76/96).结论 采用单管四重荧光PCR同时检测4个STR位点,具有高效、简单快速的特点,是基因连锁分析进行血友病A基因诊断的有效方法.     

有机稀土化合物抗诱变性研究

稀土化合物用于农业及畜牧养殖业不仅可提高产量,还可提高品质,减少病害。为研究稀土化合物的综合效果,开发稀土应用的新领域,本文对稀土有机化合物的抗诱变性进行了初步探讨。结果表明,在噬菌体诱导试验中,乙二胺四醋酸稀土(RE—EDTA)1～50mg/皿和柠檬酸稀土(RE—Cit)50mg/皿对4NQO(10mg/皿)的诱变活性有明显抑     

北京地区五家医院获得性铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制研究

目的 研究北京地区5家教学医院临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)对碳青霉烯类抗菌药物耐药的分子机制.方法 收集2004年6月-2005年12月北京地区5家教学医院临床分离的非重复性213株IRPA,采用琼脂稀释法测定美罗培南、亚胺培南等抗菌药物对这些菌株的MIC值;采用纸片法初筛产金属酶菌株;对金属酶IMP-、VIM-基因以及孔道蛋白OprD2基因进行PCR及序列分析.结果 5家教学医院分离的213株IRPA中84株存在孔道蛋白OprD2缺失,其中有6株还同时产IMP-1型金属酶.另有13株IRPA单独产IMP-1型金属酶,2株单独产VIM-2型金属酶.结论 孔道蛋白OprD2缺失、产金属酶是北京地区铜绿假单胞菌(PA)对碳青霉烯类抗菌药物耐药的部分机制.     

解脲支原体和巨细胞病毒感染与胎膜早破的关系

目的研究解脲支原体(UU)和巨细胞病毒(HCMV)感染对胎膜早破的影响。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术对82例胎膜早破孕妇(观察组)和104例正常孕妇(对照组)的宫颈分泌物进行UU和HCMV检测。结果胎膜早破组宫颈分泌物UU和HCMV阳性检出率分别为43.9％和39.0％,均明显高于对照组(P＜0.05,P＜0.01)。胎膜早破组UU和HCMV复合感染率为17.1％,也较对照组明显升高(P＜0.05)。结论孕妇UU和HCMV感染与胎膜早破密切相关。