有机稀土化合物对SOS反应的抑制作用

本文应用ＳＯＳ显色法研究了三种有机稀土化合物及其相应螯合剂的抗诱变作用。抗坏血酸稀土、拧橡酸稀土及二胺四乙酸稀土浓度分别在０．５￣１．５ｍｇ／ｍｌ、１￣２０ｍｇ／ｍｌ及５￣４０ｍｇ／ｍｌ时，对已知致癌物亚硝基胍和３，４－苯并芘诱导的ＳＯＳ反应具有抑制作用，且有较好的剂量效应关系。而单纯的螯合剂抗坏血酸 效果很好，柠檬酸显示微弱的抗诱变性，乙二胺四乙酸二钠则无抗诱变作用。     

纤维蛋白原β链启动子区域基因多态性与中国汉族人群肺血栓栓塞症相关性的病例对照研究

目的探讨纤维蛋白原基因β链启动子区域-455G/A、-148C/T多态性与中国汉族人群肺血栓栓塞症（PTE）发生的相关性.方法采用病例对照研究,病例组为经放射性核素肺通气/灌注显像和（或）螺旋CT肺动脉造影（CTPA）检查并结合临床资料确诊的PTE患者101例;对照组为与PTE患者来自相同地区汉族人群,性别、年龄相匹配的健康对照101人.应用碘化钾-氯仿-异丙醇法提取基因组.应用聚合酶链反应（PCR）、HaeⅢ限制性内切酶、HindⅢ限制性内切酶分别检测纤维蛋白原β-455G/A、-148C/T多态性位点.结果（1）健康对照人群纤维蛋白原-455位点等位基因G和A的频率分别为0.931、0.069,-148位点等位基因C和T的频率分别为0.777、0.223,基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律.（2）-455G基因AA、GA、GG基因型在PTE病例组分布为3（3.0%）、33（32.7%）、65（64.4%）,在对照组分布为1（1%）、12（11.9%）、88（87.1%）,x2=14.258,差异有统计学意义;-148C基因TT、CT、CC的分布在病例组和对照组差异无统计学意义.（3）-455 A等位基因在病例组与对照组分别为0.193、0.169,两组比较x2=13.573,差异有统计学意义;-148 T等位基因在病例组与对照组差异无统计学意义.（4）进行单变量logistic回归探讨β-455G/A基因多态性与PTE的关系,相对于GG基因型而言,GA杂合型与GA＋AA均能显著增加PTE发生的危险性,OR值（95%CI）分别为3.723（1.786～7.759）、3.749（1.842～7.630）,P〈0.05.在β-148C/T基因多态性中,相对于CC基因型而言,CT＋TT、TT、CT基因型都没有显著增加个体PTE发生的危险.结论纤维蛋白原β链启动子区域-455G/A基因多态性可能与PTE有关,GA杂合型与GA＋AA型与PTE发生显著相关,A等位基因可能是与PTE发病有关的遗传因素,β-148C/T基因多态性可能与PTE无关.     

SYBR-GreenⅠ实时荧光聚合酶链反应结合融解曲线分析技术在α-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断中的应用

目的探讨SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR（SYBR-PCR）结合融解曲线分析（D.C）技术进行α-珠蛋白生成障碍性贫血（α-地贫）基因诊断的价值。方法对22个家系中的37份样品采用4管SYBR-PCR结合D.C进行--^SEA、-α^3.7,-α^4.2及非缺失型（αα）4个等位基因型的检测,进而作出基因诊断。同时运用单管多重PCR（mPCR）结合凝胶电泳技术进行基因检测加以对照确认。结果22个家系中6个家系检出有--^SEA或-α^3.7携带者,其中东南亚型缺失携带者（--^SEA/αα）7例,右侧缺失携带者（-α^3.7/αα）3例,东南亚型缺失与右侧缺失双重杂合子（--SEA/-α3.7）1例。2例为胎儿产前诊断。其中1例为Bart′s水肿胎儿（--^SEA/--^SEA）,另1例为东南亚型缺失携带者（--^SEA/αα）。用mPCR凝胶电泳技术得出的基因诊断结果与上述结果一致。结论SYBR-PCR结合D.C技术在α-地贫的基因诊断、携带者检出及产前诊断方面具有实用价值。     

逆转录—巢式PCR法分析胃癌活检组织CD44拼接变异体

目的 改进CD44基因异常表达检测方法，探讨该方法对胃癌早期诊断、转移监测的意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)结合巢式PCR(Nested PCR)技术，检测了89例胃镜活检标本，其中70例胃癌、19例癌前病变(11例非典型性增生、8例肠上皮化生)及其相应的病变旁正常组织活检标本CD44v(CD44拼接变异体)以及CD44v8—10(CD44外显子8—10拼接变异体)的表达。并对巢式PCR产物测序验证其可靠性。结果 建立了逆转录巢式PCR检测胃镜活检标本CD44异常拼接变异体方法。对巢式PCR产物测序证实符合相应的CD44核苷酸序列，结果可靠且更为简便。全部标本均有CD44s(CD44标准型)的表达。胃癌组织CD44v表达阳性率88．6％(62／70)，其中CD44v8—10阳性率72．9％(51／70)。癌前病变组织CD44v表达阳性率为81．8％(非典型性增生9／11)和37．5％(肠上皮化生3／8)，CD44v8—10阳性率在非典型性增生为72．7％(8／11)。病变旁正常组织CD44v阳性率16．9％(15／89)，其中CD44v8-10阳性率13．5％(12／89)。胃癌和非典型性增生组显高于正常组。本研究对35例在我院行手术治疗的CD44v阳性患进行了追踪，有2例胃癌患第1次胃镜检查为非典型性增生，CD44v强阳性表达。分别在第二、三个月后再次行胃镜检查确诊为胃癌。结论 RT—巢式PCR方法灵敏度高、特异性好，应用此法检测CD44v及CD44v8—10在胃癌及非典型性增生活检组织中呈现高表达，可作为胃癌诊断和判断预后的标志之一。     

聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌

本研究旨在应用聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌。针对血清C型变形链球菌的spaP基因序列合成特异性引物,用聚合酶链反应(PCR)扩增spaP基因片段的方法检测变形链球菌各菌株和口腔多种常居菌。结果只有变形链球菌血清C型产生了扩增产物,呈现单一的192bpDNA条带。这种方法使过去不能检出的微量靶序列(3个cfu)得以检出,具有高度的特异性和敏感性。用本方法检测50例口腔菌斑标本,有44例呈阳性结果。提示该检测技术是一种快速、准确检测变形链球菌的新方法。     

凝血因子V基因Leiden突变检测方法在新疆汉族健康人群中应用

目的建立FV Leiden突变的检测方法,研究分析新疆汉族健康人群中FV Leiden突变的发生率。方法应用聚合酶链反应(PCR)—限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),对新疆地区82例健康个体进行FV Leiden基因突变研究分析。结果新疆汉族健康个体均未检出FV Leiden基因突变类型包括纯合子和杂合子。结论 FV Leiden突变可能不是新疆地区汉族健康人群静脉血栓(VT)发病的主要危险因素。