结缔组织生长因子反义寡核苷酸对人增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子表达及胶原合成的作用

目的：观察结缔组织生长因子反义寡核苷酸对转化生长因子β1诱导的人增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子mRNA、蛋白的表达和胶原合成的影响。 方法：实验于2005—03／12在哈尔滨医科大学免疫教研室完成。选取哈尔滨医科大学附属第二医院整形美容中心手术标本，包括正常皮肤和增生性瘢痕。将手术中切下的正常皮肤、增生性瘢痕组织在无菌条件下去除表皮后采用组织块贴壁法培养于含体积分数为0．1的胎牛血清的RPM11640培养液中，置37℃，体积分数为0．05的CO2条件下原代培养。经2．5g/L胰蛋白酶消化传代，传代至3～5代时进行实验。实验分4组：①正常皮肤成纤维细胞组。②增生性瘢痕成纤维细胞组。③增生性瘢痕成纤维细胞＋5，0mg／L转化生长因子β1组（简称转化生长因子β1组）。④增生性瘢痕成纤维细胞＋5．0mg／L转化生长因子β1＋结缔组织生长因子反义寡核苷酸组（简称反义寡核苷酸组）。用5．0mg／L转化生长因子β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞后，以脂质体介导方法将结缔组织生长因子反义寡核苷酸转染增生性瘢痕成纤维细胞中，用反转录一聚合酶链反应方法和Western Blot方法检测细胞中结缔组织生长因子mRNA和蛋白质的表达；采用^3H-脯氨酸掺入法检测细胞的胶原合成量。 结果：①反转录-聚合酶链反应结果：结缔组织生长因子mRNA在正常皮肤成纤维细胞中无表达，在增生性瘢痕成纤维细胞中表达增强，转化生长因子β1刺激后表达量0．64&;#177;0．32明显高于增生性瘢痕成纤维细胞0．31&;#177;0．14，差异显著（P〈0．01）；反义寡核苷酸组可以大部分抑制结缔组织生长因子mRNA的表达，表达量0．12&;#177;0．62明显低于增生性瘢痕成纤维细胞组和转化生长因子β1组，差异显著（P〈0．01）。②Western印迹结果：蛋白水平趋势与mRNA水平相一致。结缔组织生长因子蛋白在正常皮肤成纤维细胞中无表达，在增生性瘢痕成纤维细胞中表达增强84．63&;#177;11．49，转化生长因子β1刺激后表达量102．89&;#177;14．35明显高于增生性瘢痕成纤维细胞组，差异显著（P〈0．01）；反义寡核苷酸组可以大部分抑制转化生长因子β1的作用，结缔组织生长因子蛋白表达量41．75&;#177;10．56低于增生性瘢痕成纤维细胞组和转化生长因子β1组（P〈0．01）。③结缔组织生长因子反义寡核苷酸对增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的作用：增生性瘢痕成纤维细胞组、转化生长因子β1组、反义寡核苷酸组的^3H-脯氨酸掺入率分别为5381&;#177;185．8273&;#177;357．2475&;#177;859，转化生长因子β1可以显著增加成纤维细胞胶原的合成（P〈0．01）；而结缔组织生长因子反义寡核苷酸对转化生长因子β1刺激后的成纤维细胞胶原合成有明显抑制作用，差异显著（P〈0．01）。 结论：结缔组织生长因子反义寡核苷酸能够抑制转化生长因子β1引起的结缔组织生长因子mRNA、蛋白质表达的增高和胶原合成的增多，表明阻断结缔组织生长因子可能是延缓瘢痕纤维化的有效手段。     

纳米脂肪移植矫治上睑凹陷疗效探讨

目的:探讨自体纳米脂肪移植治疗上睑凹陷的临床效果.方法:选取大腿外侧作为脂肪供区,采用Coleman脂肪抽吸技术,将获得的结构脂肪组织按Tonnard机械乳化方法制成纳米脂肪,再使用钝头注脂针将纳米脂肪分层注射至上睑凹陷部位.结果:本组21例患者,术后随访3个月,除1例重度凹陷改善不明显外,其余患者上睑凹陷外观改善效果...     

自体鼻中隔软骨与膨体聚四氟乙烯假体联合隆鼻术

目的：探讨鼻中隔软骨与膨体聚四氟乙烯（expanded polytetrafluoroethylene,ePTFE）联合隆鼻治疗鼻尖过低、鼻孔显露的手术方法,以减少单纯假体隆鼻术的并发症。方法：采用鼻正中蝶形切口加双侧鼻翼缘切口取鼻中隔软骨,行鼻中隔软骨联合ePTFE加强型补片隆鼻术并治疗鼻尖低平。结果：术后随访1～6年,评价360例就医者手术效果,优157例,占43.6%;良196例,占54.4%;一般7例,占2%;无效果差的病例。结论：应用鼻中隔软骨联合ePTFE在隆鼻术中治疗鼻尖过低、鼻孔显露,可以明显减少单纯假体隆鼻术的并发症,效果理想。     

硬膜外罗哌卡因麻醉在多部位大面积脂肪抽吸术中的应用

目的探讨硬膜外罗哌卡因麻醉在上、下腹部，左右腰部，臀部等大面积多部位脂肪抽吸术中的应用及特点。方法将100例施行大面积多部位脂肪抽吸术者随机分成两组，即应用罗哌卡因组和对照组，每组50例。应用罗哌卡因组给予1％利多卡因和0．5％罗哌卡因注射液进行麻醉；对照组只给予相同剂量的1％利多卡因注射液进行麻醉。观察两组的术区疼痛情况和运动神经阻滞情况。结果两组手术过程中术区均没有疼痛感觉。应用罗哌卡因组受术者运动自如，能主动改变体位；对照组受术者腹部以下不能运动，不能主动改变体位。结论在多部位大面积脂肪抽吸术中应用0．5％罗哌卡因麻醉，可以满足受术者术区无疼痛的要求，同时术中保留运动功能，术中能主动改变体位，减少医师体力消耗，也有利于受术者术后恢复。     

医患共同决策在整形美容外科临床实践中的重要性及其应用现状

由于人民生活水平的提升和权利意识的觉醒,人们对医疗服务质量的要求越来越高,这在整形美容外科尤为明显。传统的家长式和知情同意式决策模式已不适合整形美容外科。医患共同决策(Shared decision making,SDM)是指在诊疗过程中医患双方经过充分沟通、讨论,并让患者参与医疗决策,最终共同决定的医疗模式。本文将介绍SDM的定义、历史发展、应用现状,以及SDM在整形美容领域的重要性及意义,并结合共同决策3-talk模型和SHARE模型探索SDM在整形美容外科的实施策略,为促进SDM在整形美容外科的发展提供新思路。     

P53蛋白对人瘢痕疙瘩成纤维细胞端粒酶活性的影响

目的:探讨P53蛋白(P53 protein)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblast／KFB)端粒酶活性的影响;明确在人瘢痕疙瘩成纤维细胞中P53蛋白与端粒酶活性之间的相互关系。方法:采用腺病毒介导法将野生型P53基因(Ad-P53)转染至人瘢痕疙瘩成纤维细胞中;将来源于瘢痕疙瘩组织的成纤维细胞随机分成二组。实验组转染野生型P53基因至成纤维细胞中。非转染组的成纤维细胞未进行野生型P53基因转染。用间接免疫荧光法检测成纤维细胞中P53蛋白的表达;TRAP-ELISA法检测成纤维细胞中端粒酶活性。结果:转染组细胞中P53蛋白表达明显高于非转染组细胞;而端粒酶活性明显低于非转染组细胞(P<0．01)。结论:P53蛋白能够抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞端粒酶活性。     

耳垂增生性瘢痕的综合治疗

自2005年5月至2009年1月,笔者采用手术切除、同位素照射、5-FU+去炎松A混合液注射对耳垂增生性瘢痕患者行综合治疗,取得了较好的疗效.现报道如下: 1 临床资料 本组患者共108例.女性98例,男性10例;年龄16～54岁.单侧耳垂瘢痕者23例,双侧者85例.瘢痕体积:0.5 cm×0.3 cm×0.3 cm～3.5 cm ×3.0 cm×2.0cm.     

595nm Vbeam激光对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：观察595nmVbeam激光照射对增生性瘢痕动物模型伤口愈合中成纤维细胞增殖的抑制作用。 方法：实验于2004-10／2005—06在哈尔滨医科大学附属第二医院激光美容中心完成。成年大耳白兔20只，建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型，上皮化后切取一组瘢痕8处，然后将瘢痕随机分为激光治疗组和对照组，激光治疗组在创面上皮化后按一定参数进行激光照射，开始时每周照射1次，1个月后改为每两周照射1次，共两个月。对照组不进行治疗。在上皮化后1，2，4，6，8周分别切除两组增生性瘢痕各8处，每次取材前用游标卡尺测量瘢痕厚度，对切取组织进行苏木精一伊红和Masson染色，并对上皮化后4周组织进行电镜观察，对上皮化和上皮化后4周组织进行增殖细胞核抗原蛋白测定，对比研究在瘢痕形成过程中595nmVbeam激光照射对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞的影响，观察成纤维细胞超微结构的改变，检测增殖细胞核抗原蛋白表达变化。 结果：实验大耳白兔20只全部进入结果分析。兔耳增生性瘢痕经595nmVbeam激光照射后，按不同时间段取材与对照组比较，①瘢痕厚度明显变薄：创面上皮化后即出现增生块高出于皮面，且不断增厚，在上皮化后4周时最高，以后逐渐下降。激光照射（即上皮化后）2，4，6周后激光治疗组瘢痕增生厚度显著小于对照组[激光治疗组：（1．95&;#177;0．08），（2．16&;#177;0．09），（1．53&;#177;0．08）mm；对照组：（2．04&;#177;0．09），（2．37&;#177;0．11），（1．68&;#177;0．09）mm，P〈0．05]。②苏木精-伊红染色显示不同时间取材的兔耳增生性瘢痕组织对照组真皮层明显增厚，为周围正常真皮厚度的三四倍。而激光治疗组真皮层较对照组变薄。Masson染色显示瘢痕胶原纤维呈蓝色，对照组可见蓝染较深的胶原纤维，外形粗大，排列杂乱无章。而经激光照射的瘢痕虽然也可见蓝染的胶原纤维，但与对照组比较蓝染变浅且纤细，胶原排列也趋于一致。③高倍镜下成纤维细胞计数在上皮化后随时间逐渐增多，在上皮化后4周时达到高峰，以后又下降，但在上皮化后1，2，4，6，8周激光治疗组成纤维细胞数量与对照组比较未见明显减少（P〉0．05）。④透射电镜观察显示经595nmVbeam激光照射4周后成纤维细胞核变小、畸变，胞质中细胞器减少，细胞功能不活跃，线粒体空泡变性，细胞周围的胶原呈溶解状态。⑤增殖细胞核抗原蛋白表达激光治疗组较对照组明显减弱（增殖细胞核抗原阳性细胞反应率上皮化后为18．33％，上皮化后4周，激光治疗组为41．93％，对照组为64．26％，P〈0．05）。 结论：595nmVbeam激光照射可抑制兔耳增生性瘢痕成纤维细胞的增殖过程，应用595nmVbeam激光预防和治疗瘢痕可行。     

选择不同的局部皮瓣修复鼻翼缺损

自2008年9月至2009年7月,我们根据鼻翼缺损面积及缺损程度,设计相应的局部皮瓣对19例鼻翼缺损患者进行修复,术后均获得满意效果.现报道如下.1 临床资料 本组患者共19例,男性12例,女性7例;年龄17～45岁.鼻翼部黑色素痣切除2例,鼻翼部外伤所致缺损14例,鼻翼部血管瘤切除2例,鼻翼部瘢痕切除1例.缺损面积最小约1.0 cm×1.5 cm,最大约3.0 cm×3.0 cm.     

自体耳软骨移植在伴有鼻中隔软骨缺损的鞍鼻畸形修复中的初步应用

由于肿瘤、感染、自身免疫性疾病、外伤等原因造成的鼻中隔缺损,会出现鼻尖塌陷、鼻小柱短小塌陷、鼻尖上翘等表现,严重者呈鞍鼻畸形[1-2].自2005年10月至2009年11月,笔者采用自体耳软骨重建鼻中隔,联合硅胶假体置入矫正鞍鼻畸形,效果良好.现报道如下.