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重组腺相关病毒介导的MDA-7基因对人肝癌细胞的选择性凋亡诱导效应 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨PEG启动子调控腺相关病人毒介导的黑色素瘤分化相关基因MDA-7对肝癌细胞的选择性凋亡诱导效应.方法 以重组腺相关病人毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统感染人肝癌细胞株HepG2细胞和正常人肝细胞株LO2细胞,Westerm Blot检测转染细胞内MDA-7蛋白,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞周期、Annexin-Ⅴ、线粒体跨膜电位(△Ψm),RT-PCR检测bcl-2基因mRNA.结果 重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA7可特异性转染HepG2细胞,MDA7蛋白在HepG2细胞中高效表达,并呈时间依赖性;重组腺相关病毒rAAV-PEC-MDA-7可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,细胞周期分析处于G0/G1期细胞百分比明显增多,处于G2/M期的细胞减少,并且可见到较明显的凋亡峰的形成,从24 h开始Annexin-Ⅴ阳性细胞比例增多,△Ψm降低,抗凋亡基因bcl-2 mRNA表达降低.而重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7对LO2细胞无类似效应.结论 构建出的重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统可选择性抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡,其诱导凋亡机制受到bcl-2家族经线粒体途径的调节. 相似文献
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目的 探讨含PEG启动子的腺相关病毒介导的黑色素瘤分化相关基因MDA-7(rAAV-PEG-MDA-7)在裸鼠体内的抗肝癌作用及机制.方法 构建肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,尾静脉注射编码重组可溶性MDA-7蛋白的重组腺相关病毒载体rAAV-PEG-MDA-7,观察对肝癌生长的抑制作用.采用RT-PCR、免疫组化、Western blot及ELISA方法分析MDA-7的体内表达情况;Tunnel法和免疫组化检测MDA-7对肿瘤细胞的诱导凋亡和微血管生成抑制效应.结果 荷瘤裸鼠尾静脉注射rAAV-PEG-MDA-7后,裸鼠肝细胞中有MDA-7表达,其他组织中无MDA-7表达;血清中MDA-7蛋白持续表达,注射2 w后蛋白表达达高峰(200 ng/ml);裸鼠皮下瘤生长受抑制,抑瘤率为62%;Tunnel及免疫组化分析显示,rAAV-PEG-MDA-7可诱导肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤微血管形成.结论 含PEG启动子的重组腺相关病毒表达系统rAAV-PEG-MDA-7具有良好的肿瘤靶向性和肝向性,MDA-7在裸鼠肝脏中高效表达,可抑制肝癌生长,其抗肿瘤机制可能为通过诱导肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成的协同作用. 相似文献
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目的 探讨肝再牛进程触发大鼠结肠痛肝转移残肝内隐性转移灶进展的发生机制.方法 采用肝包膜下种植建立结肠癌肝转移大鼠模型,随机分为假手术组、37%肝切除组和70%肝切除组;采用腹膜后注射建市结肠癌腹膜后转移模型,随机分为假手术组和70%肝切除组.手术后3周处死动物,测定肝内转移瘤量、再生肝重及腹膜后瘤结节重.在含有肝切除后24 h和14 d的门静脉血清培养基中进行结肠癌细胞Lovo体外培养,5.溴脱氧尿核苷(5-BrdU)DNA掺入法检测细胞增殖反应.结果 手术切除明显促进70%肝切除组肝内残留癌牛长(P<0.05),对37%肝切除组肝内残留癌和结肠癌腹膜后转移瘤牛长无促进作用(P>0.05);肝切后24 h门静脉血清组5-BrdU DNA掺人率从第72小时开始增加,至第120小时呈持续增加趋势(P<0.05);肝切后14 d门静脉血清对结肠癌细胞生长无明显刺激作用(P>0.05).结论 结肠癌肝转移切除术后可诱发肝内微小残留灶的进展,并不通过血液循环全身性释放,对肝外转移瘤并不发挥作用.肝切除范围与诱发肿瘤生长有关,只有肝切除达到一定程度时,才足以刺激肿瘤生长. 相似文献
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小肠间质瘤的临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨小肠间质瘤(small intestine stromal tumors,SISTs)的临床表现、影像学特点和治疗措施。方法:收集2002年8月至2007年8月本院普外科治疗的14例SISTs的患者的临床资料进行回顾性分析。结果:14例患者中男6例,女8例,平均年龄(56.8±11.4)岁。SISTs常见的临床表现为:腹痛、腹部包块、肠梗阻、胃肠道出血及体重下降;血清肿瘤学指标均正常。术前9例行消化道气钡双对比造影检查,4例检出病变,均未提示间质瘤可能。14例行CT检查,全部检出肿瘤,定性诊断准确8例;14例患者均行手术治疗,无围手术期死亡。术后病理结果为SISTs,其中良性间质瘤2例,潜在恶性3例,恶性9例。结论:SISTs无特异性临床症状,消化道气钡双对比造影诊断率低,CT扫描具有一定的特征,两种检查互相配合,结合临床具有较高的定位定性诊断价值。早期诊断对改善SISTs的预后十分重要,积极手术切除和甲磺酸伊马替尼辅助治疗可以获得良好效果 相似文献
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目的探讨红花、丹参、苦参碱腹腔注射对家犬实验性胆管狭窄的干预作用。方法家犬32只建立胆管狭窄模型。随机分为4组,每组8只,其中3组为药物处理组,分别腹腔注射红花、丹参、苦参碱,对照组仅给予生理盐水。检测4组胆管组织基质金属蛋白酶-1,2及转化生长因子-β1表达情况及肌成纤维细胞增殖抑制率。结果各药物处理组转化生长因子-β1表达均较对照组降低(P〈0.05);各药物处理组间基质金属蛋白酶-1,2表达差异无统计学意义(P〉0.05);各药物处理组肌成纤维细胞增殖抑制率均高于对照组(P〈0.05)。结论中药红花、丹参、苦参碱对胆道瘢痕组织肌成纤维细胞增殖及转化生长因子-β1的表达有抑制作用,有抗胆道瘢痕治疗作用。 相似文献