局部注射肾上腺素对大鼠跨区皮瓣的延迟作用

背景:在修复大面积组织缺损或复杂畸形时,确保皮瓣移植成功的传统方法是进行旷日持久的延迟术,患者需承受高昂的医疗费用和2次以上的手术痛苫.目的:探索超大组织皮瓣延迟新方法以提高皮瓣延迟效率.设计、时间及地点:细胞形态学观察,于2007-09/2008-03存南华大学实验室完成.材料:健康雄性Wistar大鼠120只.取大鼠下背部皮瓣,5 cm×1 cm大小,跨越中线区2.5 cm,双侧主干血管在中线区有着恒定的吻合支.方法:将120只大鼠随机分为手术组、肾上腺素组和生理盐水组,40只,组,每组皮瓣又分成未延迟组,延迟3,7,14 h皮瓣组.手术组:取皮瓣后,彻底止血后原位缝合.肾上腺素组:以左侧髂支为蒂,在皮瓣右侧骼史附近注射1:400 000肾上腺素盐水O.1 mL至皮下,原位缝合.生理盐水组:操作同肾上腺素组,在相同部位注射生理盐水0.1 mL.主要观察指标:观察各组大鼠的皮瓣乳酸含量、皮瓣成活情况及皮瓣毛细血管的密度.结果:延迟7,14 d时,手术组皮瓣成活率最高,肾上腺素组次之,生理盐水组最低.手术组皮瓣自延迟3 d开始,皮瓣中线区血管密度开始增加,随着延迟时间的延长,乳酸浓度依次下降,皮瓣成活率依次升高.肾上腺素组乳酸含量在注射7,14 d后没有逐渐下降反而处于一个比较稳定的值.手术组和肾上腺素组的皮瓣成活率、毛细血管密度、乳酸含量与生理盐水组比较,均增高(P<0.05).结论:局部反复注射肾上腺素与手术方法起到相同的皮瓣延迟效果.     

上肢严重烧伤73例治疗分析

上肢严重烧伤病人７３例，原因为电烧伤，热压伤和爆炸伤。３５例经皮瓣修复获满意效果。３８例采用坏死组织脱落、肉芽创面植皮等保守方法治疗，截肢率高，上肢外形及功能差。提示早期清除坏死组织，采用皮瓣复盖创面系治疗上肢严重烧伤的良法。     

Nrf2因子在烫伤脓毒症大鼠免疫脏器中的表达

研究表明,核转录因子Nrf2是脓毒症中调节氧化应激的关键因子[1],对许多细胞因子和炎症介质基因均有特异性调控作用.本研究以烫伤合并金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌感染大鼠模拟烫伤脓毒症模型,观察Nrf2在烫伤脓毒症大鼠各免疫脏器组织中的表达并分析其可能机制.     

HSF1与HMGB1和IL-10作用分子机制的体外研究及意义

目的:本研究以RAW264.7细胞系为研究对象,烧伤血清刺激建立烧伤细胞模型,在体外研究HSF1的抗炎症机制.方法:Western blot法检测烧伤血清刺激前后RAW264.7细胞中HSF1与NF-κB表达,凝胶阻滞法(EMSA)检测HSF1与炎症因子HMGB1和抗炎症因子IL-10基因启动子区相互作用,同时检测NF-κB是否参与上述的相互作用.结果:正常培养条件下的RAW264.7细胞几乎不表达HSF1,少量表达NF-κB,加入烧伤血清刺激后大量表达HSF1和NF-κB.HSF1与HMGB1和IL-10基因的启动子区HSE有相互作用.NF-κB不参与HSF1与HMGB1和IL-10基因启动子区HSE的结合.结论:HSF1与HMGB1和IL-10的启动子区HSE结合,抑制HMGB1的表达,促进IL-10的表达.在炎症反应中HMGB1和IL-10的表达不直接受NF-κB的调节.     

梅花针针刺对烧伤增生性瘢痕的影响

目的 探讨梅花针针刺治疗对烧伤增生性瘢痕的影响。方法 选择湘雅三医院烧伤外科双侧肢体有对称性瘢痕增生的大面积深度烧伤康复期患者20例,进行同体对照研究,一侧肢体行梅花针针刺治疗,对侧肢体常规抗瘢痕治疗。以初步评价梅花针针刺治疗效果。并且于治疗前、治疗后3个月及6个月各取瘢痕组织标本,检测各组瘢痕组织中血管内皮细胞生长因子的表达,同时检测CD34的表达来进行微血管计数,探讨梅花针针刺治疗瘢痕的可能机理。结果 梅花针针刺治疗组瘢痕增生表现均较对照组轻,尤以瘙痒、疼痛症状改善最为明显,量化总评分与对照组相比有显著性差异（p<0.05）。免疫组织化学检测发现血管内皮细胞生长因子的表达在治疗组﹑对照组均较治疗前明显降低（p<0.05）。与同期对照组相比较发现,血管内皮细胞生长因子在治疗3月组表皮及真皮信号表达强度均低于对照组,具有显著性差异（p<0.05）,治疗6月组真皮表达信号强度低于对照6月组,有显著性差异（p<0.05）。各组微血管计数发现,治疗组血管计数均少于同期对照组,且有显著性差异（p<0.05）。结论 梅花针针刺治疗对烧伤增生性瘢痕的防治作用优于常规抗瘢痕治疗。梅花针针刺治疗后增生性瘢痕内血管内皮细胞生长因子的表达、微血管数目均降低,可能是其抑制瘢痕增生的主要作用机理。     

小鼠肿瘤坏死因子α启动子荧光素酶表达载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子荧光素酶表达载体.方法 利用PCR技术扩增小鼠TNF-α启动子序列,将其插入荧光素酶表达载体pGL3-basic中.将经过鉴定的重组载体pGL3-TNFα-promoter转染巨噬细胞264.7,应用萤光素酶检测系统检测其活性.结果 测序结果 表明,扩增的启动子序列正确.荧光素酶活性检测表明,pGL3-TNFα-promoter具启动荧光素酶基因表达的活性.结论 成功构建小鼠TNF-α启动子荧光素酶表达载体pGL3-TNFα-promoter,为进一步研究TNF-α奠定了物质基础.     

人血管内皮生长因子基因转染原代成人皮肤成纤维细胞研究

目的　将人血管内皮生长因子 (hVEGF)基因导入原代离体成人皮肤成纤维细胞 ,验证转基因细胞分泌hVEGF情况 ,探讨成人自体细胞基因修饰后移植的可行性。方法　采用酶消化法获取成纤维细胞 ,以杜氏改良培养基 (DMEM )传代培养。以脂质体转染法将pcDNA3 .1( ) /hVEGF12 1导入成纤维细胞 ,培养 48h后取细胞作逆转录 多聚酶链式反应 (RT PCR) ,上清行酶联免疫吸附反应 (ELISA)检测、MTT测定和Mile’s实验。结果　转基因细胞经RT PCR扩增出一条约 44 4bp条带 ,ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度约 (12 .3 2± 0 .3 9) μg/L ,MTT显示上清明显促内皮细胞增殖 ,Mile’s实验显示上清明显增加毛细血管通透性。结论　质粒 pcDNA3 .1( ) /hVEGF12 1成功转染成人皮肤成纤维细胞 ,转基因细胞能表达分泌有生物活性的VEGF12 1蛋白。     

降阶梯治疗对烧伤创面菌群的影响

目的：调查严重烧伤患者早期采用降阶梯治疗后创面细菌学及其药敏情况的变化，为抗生素合理应用提供理论依据。方法：对2000年-2003年我科收治的48例大面积危重烧伤病人采用降阶梯治疗方案，并在抗生素治疗前、治疗后第三天、第七天采集创面分泌物行动态细菌学和药物敏感调查。结果：送检144份样本共检出细菌94份（65．3％），治疗前48份创面分泌物送检细菌学培养加药物敏感性测定，其中46份为阳性（95．8％），以表皮葡萄球菌、金葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌多见，对大多数抗生素敏感。第三天48份标本有17份阳性（35．4％），以阴沟肠杆菌、变形杆菌、假单孢菌类多见，对部分抗生素耐药。第七天48份标本31份阳性（64．5％），以不动杆菌、假单孢菌、肠杆菌、真菌多见，对大多数抗生素耐药。大面积烧伤患者早期采用降阶梯治疗后，创面菌群发生显著变化，在一周左右耐药菌株的检出率显著增高，结论：严重烧伤降阶梯治疗一周左右，应该及时停用或更换抗生素。     

汽车内火药爆炸烧伤的特点及其救治

目的:探讨公交车内火药爆炸致伤特点、救治方法及施治中的组织工作。方法:以2001年元月-2004年12月所救治的3大批46例汽车内火药爆炸烧伤为样本,分析受伤人员其成分构成、烧伤部位、烧伤深度、复合伤、并发症等特点及其急救治疗、创面处理和施治中的组织方法。结果:伤员以中小学生为主(69.57%):烧伤面积较大且较深(平均面积/Ⅲ度面积48.31±12.42%TBSA/25.30 6.83%TBSA):伤员几乎均含颜面部和双手烧伤;合并伤及复合伤多(65.22%):治愈45例(治愈率98%);创面愈合时间:浅Ⅱ度6-12天,深Ⅱ度16-26天,Ⅲ度24-36天,未发生明显功能障碍和过度瘢痕形成;其中5例较深部位经异体皮复合自体表皮干细胞移植,经免疫组化法对角蛋白19型细胞的检测和临床愈合过程观察,其结果令人满意。结论:①MEBT/MEBO作为成批伤员救治中创面处理的首选方法具有无可替代的作用:②以异体皮复合自体表皮干细胞移植于较深创面能加速创面的原位再生,进一步提高愈合质量:③公交车内火药爆炸烧伤其伤员多为社会特殊群体组成,且人员集中,伤势严重,社会影响大,医务人员工作量大。因此,做到严密组织和科学分工才能保障对突发事件中的大批伤员实施快捷高效的救治。