鉴定载脂蛋白M基因敲除小鼠的实时荧光定量PCR法的建立

目的建立新型的载脂蛋白M(apolipoprotein M,apo M)基因敲除小鼠的鉴定方法。方法根据荧光PCR原理,分别设计野生型和敲除型apo M基因的引物和探针,并通过6-羧基荧光素(FAM)和3H-吲哚菁染料(CY5)双荧光通道的扩增曲线判断小鼠的基因型。结果野生型小鼠仅在FAM通道有扩增曲线,敲除型小鼠仅在CY5通道有扩增曲线,杂合型小鼠则在FAM及CY5通道均有扩增曲线。结论建立的实时荧光定量PCR法经济、快速、简单、准确、易判断,适用于小鼠apo M基因型的鉴定。     

超急性期自发性脊髓硬膜外血肿的磁共振诊断及误诊分析

目的分析超急性期自发性脊髓硬膜外血肿(SSEH)的临床特点及磁共振(MRI)表现,降低误诊率。方法回顾性分析经手术病理证实7例超急性期SSEH的临床及MRI资料,讨论误诊原因,鉴别诊断。结果首发症状均出现典型脊背部突发胀痛,继之出现进行性下肢麻木,活动功能障碍。2例既往有高血压病,7例均无明确外伤和凝血机制障碍病史,1例手术中发现蔓状扩张动静脉血管。7例SSEH,发生于颈椎1例、胸椎2例、颈胸交界部2例、胸腰段2例,均位于硬膜外腔的侧后方或正后方,血肿呈梭形。在T1加权序列(T1WI)矢状面6例表现为等信号,1例表现为略高信号;在T2加权序列(T2WI)矢状面和轴面,7例表现为高信号或混杂高信号;血肿与脊髓间可见线条状低信号间隔。增强扫描2例血肿可见边缘斑点或环形强化。本组4例误诊的原因:平扫时血肿信号不具特征性;活动性出血所致血肿增强征象不典型。结论超急性期SSEH具有不典型MRI表现,容易误诊,但结合起病时间及血肿MRI信号进行分析,有利于对血肿的诊断和鉴别诊断。     

浅谈医院财务管理工作体会

21世纪是科技发达、经济繁荣、竞争激烈、改革深广的知识经济时代。社会的各方面、各领域将有巨大的变革,与社会经济有着千丝万缕联系的会计领域,特别是医院财务管理更不例外。社会巨变无疑会对医院财务管理的研究和实践提出新的更高的要求。笔者结合工作实践,浅谈对医院财务管理的工作体会。     

实时荧光定量PCR检测人apoM方法的构建

目的 建立检测人载脂蛋白M(apoM)的实时荧光定量PCR技术.方法 采用Primer Express Versions 2.0设计引物及TaqMan探针,检测apoM基因.将扩增的apoM基因片段纯化后与pMD19-T载体连接,克隆构建含apoM基因片段的重组质粒,作为定量检测apoM基因表达的标准品.结果 PCR扩增产物经测序分析证实为apoM特异性片段.本法灵敏度为40 copies/μl,线性范围为4.00×10~1～4.00×10~8copies/μl,相关系数为1.000,扩增效率E为90.5%,批间变异系数为6.38%～17.9%.结论 成功建立了检测人apoM的实时荧光定量PCR方法,且该方法特异性好,灵敏度高.     

冠心病患者脂蛋白相关磷脂酶A2基因多态性研究

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H和A379V多态性位点与冠心病遗传易感性的关系。方法采用单荧光标记探针技术检测261例冠心病患者、263例正常对照者脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H和A379V基因型。结果（1）92H等位基因携带者患冠心病的风险是92R等位基因携带者的1．75倍（P〈0．01）;（2）冠心病组中单倍型379A92H的频率分布显着高于对照组（P〈0．01）;（3）Logistic回归分析提示,R92H位点等位基因92H是冠心病的独立危险因素。结论脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与汉族人冠心病遗传易感性独立相关。     

多层螺旋CT重建技术在脊柱外伤诊断中的应用

目的探讨多层螺旋CT（MSCT）重建技术在脊柱外伤诊断中的应用价值。方法对60例脊柱外伤患者进行多层螺旋CT扫描,将原始数据在SGI工作站进行多平面重建（MPR）及容积处理（VR）等后处理。结果多平面重建和容积处理重建技术对骨折的部位、范围和类型以及椎管内血肿、骨碎片情况等均得到满意显示。结论多平面重建和容积处理重建技术可提高脊柱外伤诊断的准确性,有利于临床手术方案的制定。     

特发性血小板减少性紫癜患者CD8+T淋巴细胞免疫功能的研究

特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种自身免疫性疾病.近年来研究发现CD8+T淋巴可通过细胞毒作用对ITP患者的血小板造成破坏[1].本研究检测患者外周血单个核细胞中CD8+T淋巴细胞的数量、凋亡百分率及CD8+T淋巴细胞CX3CR1 mRNA的表达水平,进一步探讨CD8+T细胞免疫异常在ITP发病机制中的作用.     

双重实时荧光定量 PCR 检测人维生素 D 受体的方法学构建

目的 建立单管检测人维生素 D 受体（VDR）及甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）基因的双重实时荧光定量聚合酶链反应 （dual real-time PCR） 的方法。方法 以 GAPDH 基因为内参, 采用 Primer Premier 5.0 软件设计特异性引物及 TaqMan 探针, 进行 PCR 扩增检测 VDR 基因。将 VDR 及 GAPDH 扩增产物片段纯化后克隆构建成重组质粒, 作为定量检测基因表达的标准品, 并用于分析该方法的灵敏度和重复性。结果 PCR 扩增产物经测序分析证实为 VDR 及 GAPDH 特异性片段; 该方法检测 VDR 与 GAPDH 灵敏度达 40 拷贝/μL; 线性范围为 4.00×101～4.00×105 拷贝/μL; 决定系数 R2分别为 0.998、 0.999; 扩增效率 E 分别为 96.10%、 85.15%; 批内变异系数（CV）分别为 0.09%~ 1.21%、 0.35%~0.88%; 批间 CV 分别为 0.17%~0.51%、 0.51%~2.46%。结论 成功建立了单管检测人 VDR 及 GAPDH 的双重实时荧光定量 PCR 方法, 且该方法特异性好、 灵敏度高、 可快速高通量检测 VDR 的相对表达量, 有效缩短时间, 减小实验误差。     

Real-time PCR法研究基质金属蛋白酶10在非小细胞肺癌中的表达

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMP)介导的细胞外基质(extracellular matrix, ECM)及基膜的降解, 是肺癌细胞侵袭和转移的必要步骤.MMP-10是MMP家族中的重要成员之一,本文作者旨在使用Real-time PCR法研究MMP-10 mRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及其癌旁正常组织中的表达及其与性别、年龄、分期、分级、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型之间的关系.     

促肾上腺皮质激素短期治疗对肾移植受者血脂及肾功能的影响

目的 观察促肾上腺皮质激素（ACTH）对肾移植受者血脂代谢及肾功能的影响。方法对随机选取的6例肾移植受者给于连续4d的ACTH肌注治疗（1mg／d）。检测并比较治疗前后血脂及肾功能变化。结果所有患者经ACTH治疗后均有明显的血脂变化．其中总甘油三酯（TG）、载脂蛋白B（apoB）、载脂蛋白A1（apoA1）分别减少了11％～17％不等，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）增加了22％。肾功能有所改善，血肌酐下降11％。结论ACTH的短期治疗能够影响肾移植受者的脂质代谢，并且有助于移植肾功能的改善。