阿托伐他汀对糖尿病大鼠内皮祖细胞及视网膜病变影响的研究

目的 探讨他汀类药物对糖尿病大鼠循环内皮祖细胞(EPCs)及视网膜病变的影响及作用机制.方法 成年Wistar大鼠150只,随机分为2组.正常对照组(阴性组),糖尿病组(阳性组).注射链尿佐菌素(STZ),造糖尿病大鼠模型.将糖尿病大鼠再随机分为3组:低剂量组(他汀10 mg/Kg·d),高剂量组(他汀20 mg/Kg·d),单纯糖尿病组.灌胃给药,对照组及单纯糖尿病组给予等量生理盐水.大鼠分别于3个月,6个月时按比例随机处死.取动脉血检测EPCs数量、取眼球固定后观察视网膜血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况.结果 糖尿病大鼠造模成功率81%.3个月及6个月时,低剂量组存活率均较高剂量组及单纯糖尿病组有所增加(P<0.05).他汀类药物促进EPCs数量上升,低剂量组与对照组、糖尿病组、高剂量组比较,3个月及6个月时各组间均有统计学意义(P>0.05),高剂量组与对照组及糖尿病组比较无统计学差异(P<0.05).不同剂量的他汀类药物对视网膜VEGF蛋白表达情况:糖尿病组VEGF免疫阳性表达最强,高剂量组VEGF免疫阳性表达比糖尿病组减弱,低剂量治疗组VEGF免疫阳性表达最低.结论 他汀类药物能够促进EPCs数量增加.小剂量他汀类药物可抑制糖尿病大鼠视网膜VEGF表达,减缓视网膜病变进展;并降低糖尿病大鼠的死亡率.     

不同剂量阿托伐他汀对心肌梗死兔内皮祖细胞水平的影响

目的 观察不同剂量阿托伐他汀对心肌梗死兔循环内皮祖细胞水平的影响.方法 新西兰大白兔结扎左冠状动脉前降支制成急性心肌梗死模型后,随机分成生理盐水对照组和阿托伐他汀治疗组[5 mg/ (kg·d) 或20 mg/ (kg·d) ],通过灌胃给药8周后,采用密度梯度离心法从外周血分离单个核细胞,接种于添加了内皮细胞生长培养基-2促微血管添加剂 (EGM-2 MV single quots) 的内皮细胞基础培养基-2 (EBM-2) 中,进行循环内皮祖细胞培养,1周后,贴壁细胞用激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记的异凝集素 (FITC-UEA) 和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白 (Dil-acLDL) 双染色阳性细胞为正在分化的循环内皮祖细胞,在倒置荧光显微镜下记数.结果 常规剂量的阿托伐他汀明显增加外周血循环内皮祖细胞的数量,为 (321.44±30.27) ,比对照组 (211.17±18.65) 和大剂量组的 (240.29±44.37) 明显增多 (P<0.05) .大剂量组比对照组略有增加,但差异无显著性 (P>0.05) .结论 常规剂量阿托伐他汀能增加心肌梗死后兔外周血循环内皮组细胞的数量,而且这种作用不依赖于他汀类药物的降脂作用.但是加大剂量并不能进一步增加内皮祖细胞的数量.     

小鼠粒单白血病动物模型建立方法的研究

目的通过对静脉和球后2种途径接种白血病细胞建立模型的方法进行比较,探讨建立急性粒单核细胞性(粒单)白血病动物模型的有效方法。方法BALB/c小鼠分别经尾静脉和球后接种1×106WEHI-3细胞,观测其生存天数,光镜监测BALB/c小鼠外周血白细胞计数、未成熟粒单核细胞百分率及骨髓原始粒单核细胞百分率,电镜观测其骨髓白血病细胞形态。结果由静脉途径接种的小鼠生存时间要比由球后途径接种的小鼠明显延长,达到38.40±2.21d;其外周血白细胞计数和未成熟粒单核细胞百分率在第14天明显升高,分别为(19.24±1.73)×109/L和(6.24±0.85)%,并有上升的趋势;其骨髓原始粒单核细胞百分率亦升高明显,达到(41.3±4.90)%.由球后途径接种的小鼠其生存时间为16±2d,外周血白细胞计数、未成熟粒单核细胞百分率及骨髓原始粒单核细胞百分率一直处于正常范围内。结论WEHI-3细胞经静脉途径植入BALB/c小鼠体内,可形成典型的白血病模型,经球后途径接种则不能形成该模型。     

艾叶精油对离体蠕形螨的杀灭作用与机制探讨

目的通过观察艾叶精油对离体蠕形螨的杀灭作用,探讨其杀虫机制。方法采用透明胶带粘贴过夜法获取人体蠕形螨,利用Motic图像采集软件系统在显微镜下观察不同浓度的艾叶精油对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨的杀螨率和虫体变化情况。结果艾叶精油对两种人体蠕形螨均有很好的杀灭作用,虫体形态及活动度均发生了兴奋-痉挛-松弛-死亡的典型变化。浓度为100%的艾叶精油1h可杀灭全部蠕形螨。随着药物浓度的降低,杀螨率也逐渐降低。12.5%艾叶精油是杀灭人体蠕形螨的最适有效浓度。对比观察发现艾叶精油对皮脂蠕形螨的杀螨率明显高于毛囊蠕形螨。结论艾叶精油可作为一种天然高效的杀螨药物,其杀螨机制推测主要作用于螨虫的神经肌肉系统,引起虫体剧烈的痉挛收缩后松弛死亡。     

经尿道输尿管镜碎石术并发症的预测因子

近年来腔道泌尿外科的发展为结石的治疗提供了广阔的前景.经尿道输尿管镜碎石术因创伤小,疗效确切而广为应用.尽管经尿道输尿管镜碎石属于微创手术,但仍存在约3.6％的并发症发生率.目前,国内外大多数人将输尿管镜碎石术的并发症归结为人为因素,并且认为输尿管镜碎石术的并发症通过经验的积累和医疗器械的改善是能尽量避免的.本文试图以术前术中的高危因素为出发点,探讨经尿道输尿管镜碎石术相关并发症的高危因素,用以预测其并发症发生的可能性.     

DNA-PK、c-myc、cyclinE在食管黏膜上皮增生、异型增生和鳞状细胞癌中的表达

近年来,随着分子生物学的发展,人们应用多种方法深入研究食管癌,认为其发生发展是一个多阶段、多因素的复杂过程,从病理形态学上表现为食管鳞状上皮单纯增生→异型增生→原位癌→浸润癌。目前癌基因、抑癌基因的应用研究较多,本文旨在研究食管癌形成过程中DNA-依赖蛋白激酶(DNA-PK)、原癌基因蛋白(c-myc)和周期素E(cyclinE)多因素表达的生物学意义,揭示食管癌发生的分子本质,为进一步临床研究提供较为客观的依据。     

C反应蛋白与冠心病的关系

越来越多的证据表明，局部或全身炎症在动脉粥样硬化病变及其并发症的发生、发展中起着重要的作用。C反应蛋白作为一种机体炎性反应的敏感标志物与冠心病(CHD)的关系值得我们高度关注。本实验通过测定不同患的C—RP浓度以探讨C—RP与CHD病变程度的关系及临床意义。     

对比腔镜手术与开放手术治疗先天性膈疝的临床疗效分析

目的：比较腔镜手术和开放手术在治疗新生儿先天性膈疝方面的临床疗效差异。方法：将患儿分成腔镜手术组和开放手术组，结合各项情况分析患者状态、并发症发病率、存活率以及复发率。结果：腔镜手术组患者手术时间更长、施行膈疝修补难度更大，其中九成患者创伤相对较小，且术后恢复期缩短。开放手术组术后需要更长的住院时间，伤口愈合较慢，47例患者中43例伤口疼痛感明显，其中6例延长住院时间。结论：经腔镜手术治疗先天性膈疝术野显露清楚、操作方便，损伤小、切口美观，近期疗效满意，远期效果需进一步随访。     

膀胱癌来源外泌体携带程序性死亡配体1和共刺激分子B7-H4的表达及初步鉴定

目的 提取并鉴定膀胱癌BIU-87和T24细胞来源的外泌体,检测膀胱癌细胞来源外泌体中程序性死亡配体1(PD-L1)和共刺激分子B7-H4的表达,验证膀胱肿瘤通过外泌体在微环境中传递PD-L1和B7-H4.方法 体外培养膀胱尿路上皮癌BIU-87和T24细胞,超速离心法提取细胞上清液中外泌体,透射电子显微镜(TEM)观察外泌体大小及形态,BCA蛋白定量法测定外泌体蛋白浓度,蛋白质印迹法(WB)鉴定两种膀胱癌细胞的外泌体标志蛋白CD63和CD9,检测膀胱癌细胞来源外泌体PD-L1 (exo-PD-L1)和外泌体B7-H4(exo-B7-H4)的表达.最后,将膀胱癌细胞外泌体分别与膀胱正常上皮SV-HUC-1细胞共培养48h后,RT-PCR和WB分别检测SV-HUC-1细胞中PD-L1和B7-H4的mRNA和蛋白的表达情况.结果 BIU-87和T24细胞上清外泌体总蛋白浓度分别为1.88 μg/μL和1.84μg/μL,总质量分别为169 μg和166 μg.TEM观察外泌体直径为30～150nm的膜性囊泡,呈典型的"杯盘"形态.两种膀胱癌细胞上清液均检测出外泌体标志蛋白CD63及CD9.且两种膀胱癌细胞来源的外泌体中均携带PD-L1和B7-H4.当膀胱癌BIU-87和T24细胞来源的外泌体分别与SV-HUC-1细胞共培养后,后者PD-L1和B7-H4的mRNA表达阴性,两者蛋白表达阳性.结论 成功提取并鉴定了膀胱癌BIU-87和T24细胞来源的外泌体均携带PD-L1和B7-H4,且膀胱癌细胞释放的外泌体能在肿瘤微环境中传递PD-L1和B7-H4,可开展后续膀胱癌来源exo-PD-L1和exo-B7-H4的生物学功能研究.