重症监护室物体表面清洁消毒方案的改进及消毒效果观察

为探讨改良环境清洁消毒方案在重症监护室的消毒效果,在传统的环境物体表面清洁消毒方案的基础上,通过延长每次清洁消毒时间、增加每天清洁消毒次数来改良环境清洁消毒方案,采用改良方案与传统方案分别对各20名患者周围环境中12种物体表面进行清洁消毒,计算两种方案清洁消毒前后6个时间点各种物体表面的菌落数,并进行比较.在实施两种清洁消毒方案1～6 d后分别统计患者医院感染的发生率.经Repeated Measures和Multivariate过程进行重复测量方差分析和多元方差分析,两种清洁消毒方案的时间、时间×清洁消毒方案的P值均＜0.05,提示时间因素以及时间因素和分组的交互作用有统计学意义.用改良方案清洁消毒4.5 h和8.5 h后,83.3％物体表面的菌落数明显低于传统方案组(P＜0.05),用改良方案清洁消毒12.5～16.5 h后,所有物体表面的菌落数两组间均明显低于传统方案组(P＜0.05).在改良方案清洁消毒后3～6 d时,患者医院感染率明显低于传统方案组(P＜0.05).说明改良方案清洁消毒效果更为显著,并可能更有助于控制重症监护室医院感染的发生.     

刚地弓形虫主要抗原B细胞表位的筛选及鉴定

目的筛选刚地弓形虫主要抗原B细胞表位并在原核表达载体中表达,对纯化的表位重组蛋白进行免疫反应性鉴定。方法用计算机软件BioSun、DNAstar综合分析6个弓形虫主要抗原的亲水性、可及性、柔韧性、二级结构、极性参数等,每一抗原分子预测2个最佳表位,设计合成24条共12对寡核苷酸,两端分别引入NocI、XhoI酶切位点,退火形成的双链定向克隆至原核表达载体pET-32c中,EcoRI单酶切鉴定重组质粒Epitope/pET-32c。将含有Epitope/pET-32c的BL21单菌落接种至LB肉汤培养基中培养,导入表达。表达产物用Ni2 螯合柱亲和纯化,免疫印迹试验(Westernblot)分析重组表位蛋白与弓形虫抗原免疫血清的免疫反应性。结果成功构建了12个原核表达质粒Epitope/pET-32c,并经测序证实,在E.coliBL21有11个表位基因能有效表达重组融合蛋白;纯化的表位蛋白大小均在20.0kDa左右;Westernblot结果显示表位蛋白SAG2-A、SAG3-B能被弓形虫抗原免疫血清识别,且反应较强,SAG2-B为弱阳性,其余的则不能被识别。结论成功筛选到3个弓形虫B细胞表位基因,为进一步构建弓形虫复合表位抗原诊断弓形虫病奠定了基础。     

烧伤病房铜绿假单胞菌耐药基因聚类分析

目的 通过对烧伤病房铜绿假单胞菌耐药基因进行聚类分析,了解烧伤病房铜绿假单胞菌的亲缘性.方法 对20株从烧伤患者分离到的铜绿假单胞菌的β-内酰胺类、氨基糖苷类和磺胺等常见耐药基因进行检测,并以这些基因作为分子标记,作耐药基因聚类分析.结果 20株中,blaTEM、blaCARB、aac(6')-Ⅰb、aac(6')-Ⅱ和sull等耐药基因检出率高,亲缘性分析显示有3株克隆在烧伤病房流行,并发现同一患者被同种细菌不同株同时感染.结论 以耐药基因作为分子标记作聚类分析对于烧伤病房临床分离株亲缘性及传播分析有着重要的意义.     

尿脱落细胞中生存素基因表达与膀胱肿瘤的关系

目的:通过检测尿脱落细胞中的生存素(survivin)表达水平,为膀胱癌的临床早期诊断、术后复发监测提供方便、快捷的方法。方法:收集尿脱落细胞、膀胱癌组织和正常膀胱内皮组织,提取其总RNA,采用逆转录-巢式聚合酶链反应(RT-PCR)检测生存素基因mRNA表达水平,同时采用免疫组化进行病理分级。结果:56例膀胱肿瘤患者,尿脱落细胞中生存素mRNA阳性率为96．4％,20例其他泌尿系疾病阳性率为5．0％,10名健康志愿者阴性。膀胱癌组织中生存素基因表达量在1、2、3级闻差异均有极显著意义(P<0．01)。结论:RT-PCR法检测生存素mRNA可以作为早期诊断、术后复发监测的指标。     

绿色荧光蛋白标记蜂毒肽的表达及其抗肝癌效应的初步评价

蜂毒是一种成分复杂的混合物，主要含有蛋白质多肽类、酶类、生物胺类和其他物质。在蜂毒的各个组分中，研究较多的是蜂毒溶血肽。蜂毒溶血肽又称蜂毒肽，最近研究表明蜂毒肽（Mel）具有较好的抗肝癌效应。Mel短肽一般直接从蜜蜂毒腺中分离或通过化学方法合成。本研究通过体外合成的Mel基因与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因进行融合，在大肠杆菌中实现高水平表达，得到纯度和产率满意的Mel-EGFP融合蛋白，并显示明显的抗肝癌效应，现将研究结果报道如下。     

血清TSGF与AFP联检对肝癌诊断的实验探讨

恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)是一种和恶性肿瘤增殖有关的血清学肿瘤标记物,它具有检测瘤谱广、灵敏度高等优点,但不同肿瘤的TSGF含量与阳性率差别较大.AFP曾被认为是最好的原发性肝癌标志,但阳性率也仅有60%-70%,且我国肝癌有30%-40%属AFP阴性.我们检测了良恶性肝病患者血清TSGF及AFP的含量,以探讨两者联合检测诊断原发性肝癌的价值.     

烧伤患者鲍曼不动杆菌静脉导管分离株耐药机制研究

为建立输液和给药通道烧伤患者经常放置静脉导管,这为细菌入侵机体提供了便利.而鲍曼不动杆菌(Acineto-bacter baumannii,Ab),尤其是多重耐药Ab日益成为医院内感染的重要病原体.我们在研究烧伤患者Ab菌的耐药机制时,发现了一株分离自静脉导管携带9种不同类型耐药基因的Ab菌.