一株携带四种β-内酰胺酶基因鲍曼不动杆菌的检测

目前鲍曼不动杆菌(Ab)对β-内酰胺类抗生素的耐药情况日益严重,各种Ab菌的β-内酰胺酶基因检出率也逐年上升.本研究检测南通大学附属第三医院烧伤科Ab菌的β-内酰胺酶基因时,发现1株Ab菌同时携带4种β-内酰胺酶基因.该菌株于2007年9月16日分离自我院烧伤科1例患者的痰液标本.     

鲍曼不动杆菌烧伤分离株推定转座酶基因(tnpU)研究

目的 研究鲍曼不动杆菌烧伤分离株携带推定转座酶基因(tnpU)的情况.方法 用PCR方法对20株鲍曼不动杆菌烧伤患者分离株的tnpU进行检测,并对1株PCR产物进行基因测序及BLASTn比对.结果 20株鲍曼不动杆菌烧伤患者分离株均检出tnpU基因,所测的1株tnpU序列与己在美国NCBI注册的6条tnpU序列相同.结论 本组烧伤病房患者多重耐药鲍曼不动杆菌分离株tnpU阳性率高达100%,tnpU对进一步研究氨基糖苷类药物耐药机制有重要意义.     

OXA-23碳青酶烯酶在鲍氏不动杆菌烧伤分离株中流行

目的 了解烧伤科鲍氏不动杆菌分离株碳青酶烯酶的分布情况.方法 测定20株分离自烧伤科鲍氏不动杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用PCR方法进行OXA-23群、OXA-24群、OXA-51群、OXA-58群、IMP、VIM及SIM等7种碳青酶烯酶基因检测,并对部分阳性产物进行基因测序.结果 烧伤科20株鲍氏不动杆菌分离株对β-内酰胺类抗菌药物耐药率除左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴坦外均>85%,PCR检测OXA-23群基因19株(95%)呈阳性,其他碳青酶烯酶基因均为阴性;部分阳性产物经测序比对与OXA-23群基因CAB69042.1相同.结论 烧伤科鲍氏不动杆菌分离株对β-内酰胺类抗菌药物多药耐药非常严重,OXA-23碳青酶烯酶在鲍氏不动杆菌烧伤分离株中流行.     

临床分离的醋酸钙鲍曼复合不动杆菌耐药性分析

目的:研究无锡市第四人民医院和无锡市第三人民医院临床分离的醋酸钙鲍曼复合不动杆菌的耐药情况及其临床分布特点.方法:收集并分离临床来源的35株醋酸钙鲍曼复合不动杆菌,观察并记录临床分布,并用琼脂二倍稀释法测定抗菌药物对醋酸钙鲍曼复合不动杆菌的MIC值.结果:临床分离的35株醋酸钙鲍曼复合不动杆菌ICU感染居多,占42.86%,老年男性居多,主要来源于痰,占88.57%.醋酸钙鲍曼复合不动杆菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、呋喃妥因的耐药率均为100%;对氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢米诺、头孢匹胺、氨曲南和庆大霉素的耐药率＞90%;对替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑的耐药率≥80%;对哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星、妥布霉素、加替沙星的耐药率＞50%;对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率相对较低,分别为23.53%、11.43%、11.43%.结论:醋酸钙鲍曼复合不动杆菌对美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦较敏感,临床医生应根据药敏结果和患者自身情况合理用药.     

巨细胞病毒IgM抗体时间分辨荧光免疫分析法的建立

人巨细胞病毒(HCMV)属疱疹病毒科,其感染极为普遍,在免疫抑制患者及孕妇中常可导致严重后果.孕妇由于内分泌及免疫状态的改变,易发生HCMV感染,病毒通过胎盘可引起胎儿的先天性感染.除引起流产、早产、死产外,可出现全身感染综合征,故对胎儿损害较重.     

烧伤患者肺炎克雷伯菌分离株氨基糖苷类耐药基因研究

肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科克雷伯菌属,是临床常见分离菌,除能引起典型的原发性肺炎外,还能导致各种肺外感染,是医院感染最常见致病菌之一[1-2].在南通大学附属第三医院(以下简称我院)烧伤病房,肺炎克雷伯菌分离率在革兰阴性杆菌中排第3位,加之多药耐药性日益严重,多次发生医院感染造成流行.氨基糖苷类药物是治疗革兰阴性杆菌感染的常用抗生素之一,烧伤患者肺炎克雷伯菌分离株对此类药物耐药的情况非常严重.     

异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的检测方法和耐药性分析

目的研究比较异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)的几种筛查方法,制定出适合的hVISA的筛查方法。方法收集2018年1月—2019年12月江南大学附属医院临床标本中分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株(MRSA),采用宏量E-test法(MET法)、BHIV3V、BHIV6V及MHA5T法筛查hVISA,最后用菌群曲线分析法(PAP-AUC)确认,比对4种筛查方法的敏感性及特异性。结果538株金黄色葡萄球菌经头孢西丁纸片法筛查出MRSA 266例,MRSA阳性率为49.4%;266株MRSA中经PAP-AUC确认hVISA菌株为17株,检出率为6.4%;MET法筛选出hVISA 21例,其中确认hVISA菌株为14例,敏感性为82.3%,特异性为97.1%。BHIV6V法筛查出hVISA 2株,确认均为hVISA,敏感性为11.8%,特异性100%。BHIV3V法筛查出hVISA 44株,确认为hVISA菌株为11株,敏感性为64.7%,特异性86.7%。MHA5T法筛查出hVISA 56株,确认hVISA为9株,敏感性为52.9%,特异性81.1%。MRSA除对利奈唑胺及万古霉素敏感外,对多种抗菌药物表现为多重耐药。结论本院MRSA检出率为49.4%,高于全国耐药监测网统计数据。hVISA的检出率为6.08%,MET法在敏感性及特异性方面优于其他3种方法,此方法较适合在本院开展hVISA的筛查。检出的MRSA及hVISA除对利奈唑胺及万古霉素敏感外,表现为多种抗菌药物的耐药性,尤其是hVISA具有更高的耐药性,临床治疗时应按照药敏结果选取治疗药物,切勿随意进行经验性用药。     

应用于重度烧伤患者的中央静脉导管病原菌分布及耐药性分析

目的 了解某院烧伤重症监护室导管相关性感染的发生情况.方法 对来源于重度烧伤患者的437例中央静脉导管标本进行病原菌分离培养,保留来源于同一患者中央静脉导管的不同种菌株及药敏谱不相同的同种菌株.Vitek 2compact微生物鉴定分析仪鉴定菌种,KB法测定对药物的敏感性.结果 共有118个导管分离到129株细菌(29.52％,129/437),其中革兰阳性细菌占31.78％ (41/129),革兰阴性细菌占61.24％ (79/129),真菌占6.98％ (9/129).革兰阳性和阴性细菌对大部分抗生素耐药率高.有22名患者使用的中央静脉导管中分离到了2株以上的非重复菌株,其中7名患者在不同时间分离到的同种细菌耐药谱存在差异.结论 革兰阳性和阴性细菌对各类抗生素耐药严重,病原菌分布与该院分离自烧伤重症监护室患者的病原菌分布大致保持一致,提示中央静脉导管可能在烧伤重症监护室患者的医院感染中发挥了作用.不同时间分离到耐药谱不同的同种细菌可能与细菌变异及耐药基因的水平转移有关.烧伤重症监护室医师需注意严格监控和规范使用中央静脉导管.     

去唾液酸糖蛋白受体单链抗体与绿色荧光蛋白的融合表达及其靶向性观察

目的：表达和纯化去唾液酸糖蛋白受体单链抗体C1与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的融合蛋白．体外观察其肝癌细胞的特异性结合能力。方法：通过扩增构建成含C1与绿色荧光蛋白（GFP）融合基因的原核表达质粒GFPCI／pET-26b：测序验证后转化大肠杆菌BL21后以IPTG诱导表达，荧光显微镜下观察融合基因中GFP的表达情况：用Ni^2＋螯合柱亲和纯化融合蛋白GFPCI，SDS-PAGE检测融合基因的表达和纯化的融合蛋白GFPCI；纯化的融合蛋白GFPCI与HepG2细胞经体外孵育后在荧光显微镜下观察单链抗体Cl对肝癌细胞的靶向作用。结果：IPTG诱导表达后在荧光昆微镜下可以观察到大肠杆菌发出特异性的绿色荧光；SDS-PAGE显示表达的融合蛋白GFPCI，与预期的大小相一致，以包涵体的形式存在；通过变性条件下Ni^2＋亲和柱纯化获得较GFPCI重组融合蛋白，免疫荧光检测表明纯化的GFPCI可与HepG2细胞膜特异结合。结论：利用GFP作为标记分子．观察到去唾液酸糖蛋白受体单链抗体C1与HepG2细胞膜较强的结合能力．为应用Cl对肝癌进行靶向生物治疗奠定基础；构建成功的GFP／pET-26b原核表达系统为其他靶分子的研究提供了一个有力的工具。     

重症监护室物体表面清洁消毒方案的改进及消毒效果观察

为探讨改良环境清洁消毒方案在重症监护室的消毒效果,在传统的环境物体表面清洁消毒方案的基础上,通过延长每次清洁消毒时间、增加每天清洁消毒次数来改良环境清洁消毒方案,采用改良方案与传统方案分别对各20名患者周围环境中12种物体表面进行清洁消毒,计算两种方案清洁消毒前后6个时间点各种物体表面的菌落数,并进行比较.在实施两种清洁消毒方案1～6 d后分别统计患者医院感染的发生率.经Repeated Measures和Multivariate过程进行重复测量方差分析和多元方差分析,两种清洁消毒方案的时间、时间×清洁消毒方案的P值均＜0.05,提示时间因素以及时间因素和分组的交互作用有统计学意义.用改良方案清洁消毒4.5 h和8.5 h后,83.3％物体表面的菌落数明显低于传统方案组(P＜0.05),用改良方案清洁消毒12.5～16.5 h后,所有物体表面的菌落数两组间均明显低于传统方案组(P＜0.05).在改良方案清洁消毒后3～6 d时,患者医院感染率明显低于传统方案组(P＜0.05).说明改良方案清洁消毒效果更为显著,并可能更有助于控制重症监护室医院感染的发生.