重组人胰岛素样生长因子-1分离纯化工艺的建立

目的：建立重组人胰岛素生长因子－1（rhIGF-1)大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺，以便获得高纯度的重组蛋白。方法：已构建好的表达载体转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导进行表达，将离心收集到的菌体用超声破壁，破壁菌液离心分离，收集上清液，进行阴离子交换层析，疏水层析和分子筛纯化，得到最终纯品，蛋白纯度用SDS－PAGE鉴定，ELISA法检测rhIGF-1含量，检测纯化后重组蛋白的生物学活性。结果：用大肠杆菌BL21表达rhIGF-1以可溶性形式存在胞浆中，经3步rhIGF-1分离纯化工艺，其工艺流程可获得具有生物学活性的高纯度rhIGF-1，为产业化及临床应用奠定基础。     

骨骼肌收缩对骨毛细血管通透性影响的实验研究

目的采用骨室种植体体内检测技术探讨骨周围骨骼肌收缩对骨毛细血管通透性的影响。方法30只雌性健康新西兰大白兔(6～10月,3～3.5kg)随机分为两组,每组15只,所有动物均于右侧胫骨植入骨室种植体。实验组于术后第2周开始行经皮神经肌肉电刺激,刺激腓肠肌收缩,频率4Hz,1h/d,每周6日;对照组无刺激。术后3周起,每周通过骨室种植体行体内显微观察至第10周,光镜下通过荧光染料FITC和RITC观察血管生长情况,运用Metamorph图像分析软件进行分析。结果实验组由经皮神经肌肉电刺激引起腓肠肌收缩,随着腓肠肌收缩时间延长,实验组毛细血管通透性显著大于对照组。结论应用骨室种植体体内检测技术能够较好在体检测骨内毛细血管通透性,骨骼肌收缩能提高骨毛细血管通透性。     

雪旺细胞与周围神经组织工程

应用组织工程学原理和技术方法研制组织工程化人工神经、修复临床周围神经缺损,是一种创新的研究。人工神经要求以具有良好生物相容性的可降解高分子聚合物为载体与有活性的细胞、细胞因子结合而成,具有特定三维结构和生物活性,可替代自体神经移植体修复神经缺损。其中雪旺细胞(Schwann cell,SC)是周围神经组织工程研究的重要种子细胞,本文就有关SC的研究作一综述。 SC的作用 SC是周围神经系统特有的胶质细胞,亦称神经膜细胞(neurilemmal cell,neurolemmocyte)或鞘细胞(sheath cell),由Theodor Schwann于1839年首先描述。SC在周围神经的发生、发育、形态、功能维持方面起着重要作用,支持和保护轴突,维持轴突的良好微环境;形成髓鞘,对有髓纤维起着绝缘作用,加速神经轴突的传导;对神经轴突有营养代谢作用。在周围神经损伤、再生与修复中,SC也起着关键作用。概括说来,主要包括以下几方面: 1.周围神经损伤后,远段神经瓦勒变性,SC分裂增殖、形成Bungner氏带,并和巨噬细胞共同吞噬变性的轴突与髓鞘碎屑,SC及SC基底膜(basal lamina,BL)管一起共同为再生轴突提供一个生长通道;     

因特网(Internet)上的创伤和矫形外科

进入九十年代,因特网(Internet)有了飞速发展,其最大优势在于交流。创伤骨科医生迫切需要获得快速、高效的信息,但因特网对于初学者来说会觉得无从下手,有所了解后面对过量信息又会感到束手无策。众多的创伤和矫形外科站点中大部分信息量较小,且多重复。不过专门的创伤和矫形外科因特网站点链接已经建立,其中OWL(Orthopedic Web Links,骨科网络导航,http://bone.yeah.net/)是目前世界上最好的站点链接。OWL由加拿大的一位外科医师于1995年发起,1998年建立了第一个创伤和矫形外科门户站点,现在已拥有超过3000个链接,由全世界大批矫形外科医师共同维护。OWL的目标是将创伤和矫形外科领域的信息资源进行一步到位的处理,其主要内容包括以下几个方面:     

陈旧性Lisfranc损伤的成因与治疗

目的 分析陈旧性Lisfranc损伤的形成原因,探讨其手术治疗方法及效果. 方法2004年8月至2008年6月共收治20例陈旧性Lisfranc损伤患者,男16例,女4例;年龄21～49岁.术前均行CT三维重建,按照Myerson分型:Ⅰ型3例,Ⅱ型13例,Ⅲ型4例.17例患者行切开复位内固定,采用克氏针或螺钉固定,3例行关节融合术.术后按照Maryland足功能评分标准进行疗效评定. 结果 18例患者术后获6个月～4年(平均27个月)随访,2例失访.18例患者术后无内固定断裂、再骨折脱位等并发症发生.按照Maryland足功能评分标准评定疗效:66～96分,平均85分;其中优3例,良12例,可3例,优良率为83.3%.疗效欠佳的主要表现为中足疼痛、活动度减少. 结论影像学表现不典型、治疗不及时、方法选择有误等均可能造成陈旧性Lisfranc损伤.解剖复位、牢固内固定、重建足弓、恢复维持足部内外侧纵弓及横弓解剖形态是治疗的关键.     

感觉和运动神经来源的雪旺细胞p75受体表达的研究

目的 研究感觉神经和运动神经来源的雪旺细胞（Ｓｃ）表达低亲和力受体（ｐ７５）的情况。方法 结合酶消化、阿糖孢苷处理和Ｓ－１００免疫荧光鉴定，从５ｄ龄ＳＤ乳鼠背根神经和股神经得到感觉和运动神经来源的Ｓｃ。２种细胞分别进行普通培养基和添加高浓度白细胞介素（ＩＬ）－１培养基的培养，检测不同时间Ｓｃ表面神经生长因子ｐ７５的表达情况。结果 感觉和运行Ｓｃ普通培养基组ｐ７５受体表达方式明显不同，前者在第５ｄ迅     

抗神经生长因子抗体对SD大鼠股骨发育的作用

目的:研究周围神经系统发育和调节功能对骨发育的影响。方法:将抗神经生长因子抗体经腹腔注射到新生SD大鼠体内,抑制周围神经系统的发育和调节功能,2d注射1次,持续两周,处理前后称量体重,处死大鼠后取全长股骨和坐骨神经。坐骨神经行Loyez髓鞘染色观察,股骨进行发育情况大体测量,并行生物力学检测。结果:药物处理对大鼠生理状态和运动能力无明显影响,处理前后处理组与对照组体重比较差异无显著性意义(P>0.05);处理组股骨冠状面中段皮质直径较对照组大(P<0.05),中径/长度比值也是处理组较大(P<0.05);生物力学检测处理组和对照组最大压应力和脆性比较均差异无显著性意义(P>0.05);坐骨神经轴突密度比较,两组差异无显著性意义。结论:采用抗神经生工因子(NGF)抗体抑制周围神经系统发育和调节功能,处理组大鼠下肢长骨的外径发育较快,但所承受最大压应力并无明显提高,说明骨皮质相对较薄,此外应力曲线斜率接近说明矿物/有机物比 例接近,提示该变化可能是发育过程中破骨细胞的功能相对活跃,导致成骨细胞代偿性成骨增多。     

周围神经损伤修复模式应用基础的研究进展

临床上周围神经损伤和缺损的治疗效果目前仍不很理想。本分4个方面就临床和试验室对周围神经修复模式研究的进展作一综述。     

Letournel分型复杂髋臼骨折的手术治疗

目的探讨Letournel分型复杂髋臼骨折的诊断和治疗。方法75例Letournel分型复杂髋臼骨折，术前经骨盆CT三维重建明确诊断分型后，分别采用前、后人路，前后联合入路及笔者改良的髂股入路显露并复位，AO重建钢板内固定。结果随访6个月～8年，平均3年10个月，按关节功能D’Aubigne和Postel6分法及X线片表现Epstein标准评价，优34例，良28例，可8例，差5例，优良率为82．57％。结论术前完善的影像学资料、骨盆模型标本的体外模拟、使用合理的手术入路、术中尽可能的解剖复位及AO重建钢板内固定是获得良好结果的基础。     

急性筋膜室综合征的诊断

急性筋膜室综合征是创伤骨科的急症，其发病的病理生理机制和治疗原则已有明确的认识和公认的结论。影响其预后的主要因素是早期诊断和外科处理的时机。本文对急性筋膜室综合征的临床物理诊断和仪器诊断方法进行了回顾和分析，指出临床评估的一些误区，提出正确的监测原则。