8号染色体四体型恶性血液病患者的细胞遗传学和荧光原位杂交研究

尽管 8号染色体三体型 (三体 8)是最常见的常染色体数目异常 ,8号染色体四体型 (四体 8)却非常少见 ,且多伴其他染色体异常 ,单纯四体 8迄今文献仅报道 2 9例[1 ,2 ] 。初步研究表明四体 8异常可见于多种恶性血液病 ,且有某些共同的临床和预后特点 ,构成一种新的临床 细胞遗传学实体。间期荧光原位杂交 (Ｉ ＦＩＳＨ)研究发现四体 8患者几乎均同时存在三体 8克隆。我们近年来先后共发现 5例四体 8患者 ,对他们进行了ＦＩＳＨ研究 ,现报道如下。一、资料与方法1 .对象 :5例四体 8患者的资料 ,见表 1。2 .方法 :(1 )染色体检查 :染色体标本…     

糖尿病性神经病人静脉穿刺疼痛的心理护理

<正> 糖尿病性神经病是糖尿病患者周围和植物神经系统的主要并发症。由此而导致一部份住院糖尿病患者对疼痛刺激的超敏反应,从而对疼痛产生恐惧心理,甚至拒绝治疗。我们运用心理疗法对40例长期患有糖尿病并有周围神经病需要长期静脉输液的住院病人进行心身的综合性护理。结果,明显减轻了病人对针刺疼痛的反应,使病人在最佳心境下主动接受治疗。     

Bcl-2反义寡核苷酸与Rituximab联合对Raji细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究bcl-2硫代反义寡核苷酸(bcl-2ASODN)联合Rituximab[CD20单克隆抗体(mAb)]对B细胞淋巴瘤Raji细胞株体内外增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:bcl-2ASODN和Rituximab分别和联合作用B细胞淋巴瘤Raji细胞后,通过MTT法检测细胞生长情况;流式细胞术(FCM)检测bcl-2蛋白表达和细胞凋亡;RT-PCR检测bcl-2mRNA表达水平;用Raji细胞建立裸鼠B细胞淋巴瘤模型观察bcl-2ASODN与Rituximab联合在体内的抗肿瘤效果。结果:5~30μmol/L bcl-2和1~16mg/L Rituximab单独应用均能抑制Raji细胞生长、诱导细胞凋亡、使bcl-2蛋白和bcl-2mRNA表达降低,但两者联合应用较单独应用抑制作用更为明显(P<0.01)。体内实验表明,bcl-2ASODN与Rituximab联合应用较单独可有效抑制BALB/c裸鼠B细胞淋巴瘤的生长(P<0.01)。结论:bcl-2ASODN联合Rituximab较分别单独应用可明显抑制B细胞淋巴瘤Raji细胞生长,促进细胞凋亡;其机制可能是通过联合下调bcl-2蛋白及bcl-2mRNA表达而起作用。     

用空心胶丸服中药丸

<正> 在临床上,常遇到一些病人,服用中药丸时出现呕吐,许多老年病人常为口服药丸为难,为减少此症状,我们采用空心胶丸装中药丸口服,服前把每个中药丸分成6～8小份,分别装入空心胶丸里,每次服用6～8胶丸。每日2次,这样药丸易被吞下,患者易于接受。     

间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征20q-染色体异常

为了探讨间期荧光原位杂交(FISH)技术在检测骨髓增生异常综合征(MDS)20号染色体长臂部分缺失异常中的价值，应用绿色荧光素SpectrumGreen直接标记的酵母人工染色体(YAC)克隆912C3(跨越20号染色体长臂q12断裂点)作为探针，对52例MDS患和5名正常对照的骨髓细胞进行单色间期FISH检测，每例分析200—300个细胞，以1个绿色荧光杂交信号＞7．16％作为阳性标准，并与常规细胞遗传学(conventional cytogenetics，CC)检测结果相比较。结果显示，52例MDS患中FISH检测7例(13．5％)为阳性，CC检测其中4例为阳性，3例为阴性。结论：YAlC912C3为探针的间期FISH技术是检测MDS患20q-染色体异常的有效方法，是CC检测的一个重要补充。     

针对K-ras基因点突变的反义寡核苷酸对人胰腺癌Patu 8988细胞的抑制作用

目的 检测人胰腺癌Patu8988细胞K-ras基因点突变形式，并观察针对该点突变的硫代反义寡核苷酸在体内外对Patu8988细胞增殖和凋亡的影响。方法顺序特异引物聚合酶链反应（PCR-SSP）法和基因测序检测Patu8988细胞K-ras点突变形式，根据点突变形式设计并合成硫代反义寡核苷酸（K-ras mutation ASODN）作用Patu 8988，通过噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长情况；流式细胞术（FCM）检测K-ras蛋白表达和细胞凋亡；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测K-ras mRNA表达水平；以Patu8988细胞建立裸鼠胰腺癌模型观察K-ras mutation ASODN在体内的抗肿瘤效果。结果 PCR-SSP法和基因测序检测表明Patu 8988细胞存在K-ras基因第12密码子点突变，其突变方式为GGT→GTT.体外实验表明K-rasmutation ASODN组较正义寡核苷酸（SODN）组、随机寡核苷酸（RODN）组和空白对照组可明显抑制Patu8988细胞生长（P〈0．01），并呈时间．剂量效应关系；转染48h后，K—ras mutation ASODN组的K-ras蛋白和mRNA表达程度较SODN组、RODN组和对照组均明显降低（P〈0．01），而细胞凋亡明显增多（P〈0．05）。体内实验表明K-ras mutation ASODN较SODN组、RODN组和对照组能有效抑制BALB／C裸鼠人胰腺癌的生长（P〈0．01）。结论 针对K-ras基因第12密码子点突变的反义寡核苷酸可明显抑制人胰腺癌Patu 8988细胞生长，促进细胞凋亡，其机制可能是通过下调K-ras蛋白和K—ras mRNA表达而起作用。     

抗IL-2单抗诱导SLE患者外周血活化T淋巴细胞凋亡的研究

采用流式细胞仪定量研究了抗白介素２单抗（ＩＬ ２ＭｃＡｂ）诱导７０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血活化Ｔ淋巴细胞凋亡的百分率,并与正常人对照组相比较。结果表明：ＩＬ ２ＭｃＡｂ能诱导ＳＬＥ患者及正常人外周血活化Ｔ淋巴细胞凋亡,且ＳＬＥ患者明显高于正常人（Ｐ＜００１）,活动期高于非活动期（Ｐ＜００１）;ＩＬ ２ＭｃＡｂ对ＳＬＥ患者外周血活化Ｔ淋巴细胞凋亡的调控呈剂量效应和时间效应。提示：从抗ＩＬ ２ＭｃＡｂ能诱导ＳＬＥ患者外周血活化Ｔ淋巴细胞凋亡,可间接地证明ＩＬ ２在ＳＬＥ疾病过程通过抑制外周血活化Ｔ淋巴细胞凋亡的作用而参与ＳＬＥ免疫病理损伤。     

RNAi沉默Survivin基因抑制人鼻咽癌细胞生长

目的观察RNA干扰沉默Survivin基因对人鼻咽癌CNE2细胞在体内外生长的抑制作用。方法将Survivin特异性shRNA表达载体pGenesil-1-survivin经Lipofectamine。”2000介导转染人鼻咽癌CNE2细胞,经G418筛选获得稳定转染的CNE2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞转染效率;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot分别检测Survivin基因mRNA和蛋白表达水平;噻唑蓝（MTF）法检测细胞增殖能力的变化。以稳定转染细胞建立裸鼠荷瘤模型,观测瘤体积的变化,绘制移植瘤生长曲线。结果流式细胞仪检测pGenesil-1-survivin细胞转染百分率为（87．13±2．21）％;RT．PCR和Westernblot结果显示,pGenesil-1-survivin组对人鼻咽癌CNE2细胞SurvivinmRNA和蛋白的抑制率分别为64．55％和51．24％,均较随机序列构建载体的阴性对照（pGenesil-1-NC）组和空白对照组明显下调（均P〈0．05）;MTT结果显示,pGenesil-1-survivin组细胞增殖能力明显较pGenesil-1-NC组和空白对照组降低（均P〈0．05）;体内实验表明,pGenesil-1-survivin组较pGenesil-1-NC组和空白对照组能有效抑制BALB／C裸鼠人鼻咽癌的生长（均P〈0．05）。结论沉默Survivin基因可以有效抑制人鼻咽癌CNE2细胞在体内外的增殖,Survivin基因有望成为鼻咽癌基因治疗的有效靶点。     

血清多种肿瘤标志物联合检测对肺癌的诊断价值

目的探讨7种血清肿瘤标志物单项和联合检测对肺癌诊断的临床价值。方法检测234例肺癌患者、84例肺良性病变患者和28名健康人血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、细胞角蛋白19片段（CYFRA211）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、恶性肿瘤生长因子（TSGF）、鳞癌相关抗原（SCC）、组织多肽特异性抗原（TPS）。结果 （1）肺癌患者的7种血清肿瘤标志物水平均明显高于肺良性病变组（均P〈0.05）和健康对照组（均P〈0.01）。（2）肺癌组7种血清肿瘤标志物阳性率均明显高于肺良性病变组（均P〈0.05）。（3）肿瘤标志物测定水平与病理类型有关,血清NSE水平升高以小细胞肺癌为主,CYFRA211以鳞癌为主,而CAl25则以腺癌为主。（4）不同组合的联合检测较单项检测均能提高敏感度和准确度,但特异度略有降低。在联合检测效能的评价中,7种肿瘤标志物组合为最佳检测指标。结论肿瘤标志物联合检测可提高肺癌诊断的敏感性和准确性。     

间期荧光原位杂交验证骨髓增生异常综合征随机克隆性染色体异常的研究

克隆性染色体异常的检出对于骨髓增生异常综合征(ＭＤＳ)的诊断、鉴别诊断和预后判断等具有十分重要的价值[1] 。如果常规细胞遗传学 (ＣＣ)检测只发现 1个细胞有某种染色体改变 ,通常认为它们属于随机的异常。Ｃｈｅｎ等[2 ]应用间期荧光原位杂交 (ＦＩＳＨ)技术有助于确定这些“随机”异常是否为克隆性 ,近来我们对 19例应用间期ＦＩＳＨ检测证实其中 12例的“随机”染色体异常为克隆性。一、资料和方法1 对象 :19例为 1997年 5月～ 2 0 0 1年 2月在我院经骨髓细胞染色体Ｒ带核型分析发现 1个细胞有染色体异常的ＭＤＳ ,ＭＤＳ的诊断与分…