神经病理性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ及Cα表达的变化

目的 评价慢性神经收缩损伤（CCI）和脊神经结扎（SNL）模型大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ及Cα表达的变化，以探讨其在神经病理性疼痛中枢敏化中的作用。方法 24只SD大鼠随机分为假手术组、CCI组和SNL组，CCI组于左肢制备CCI模型，SNL组于左肢制备SNL模型。分别于术前2d、术后2、4、7d行机械痛阈和辐射热痛阈测定。术后7d测痛后大鼠灌注固定，采用免疫组化法检测脊髓背角蛋白激酶Cγ、Cα和Fos蛋白的表达。结果 与假手术组相比，CCI组和SNL组术后4、7d机械痛阈和辐射热痛阈降低，术后7d脊髓背角蛋白激酶Cγ、Cα和Fos蛋白表达增加（P〈0．05）。与CCI组相比，SNL组机械痛阈、辐射热痛阈在各时间点差异无统计学意义，蛋白激酶Cα和Fos蛋白表达差异亦无统计学意义（P〉0．05），而蛋白激酶Cγ表达升高（P〈0．05）。结论 神经病理性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶Cγ及Cα表达的增加，可能是产生中枢敏化的机制之一。     

舒芬太尼与芬太尼复合异丙酚静脉麻醉的比较

目的：比较舒芬太尼与芬太尼复合异丙酚静脉麻醉时的作用。方法；选择４０例ＡＳＡⅠ－Ⅱ级腹部手术病人，随机分为舒芬太尼－异丙酚静脉复合麻醉组合和芬太尼－异丙酚静脉复合麻醉组。分别观察围术期血淬这及血浆肾上腺素，去甲肾上腺素水平的变化以及苏醒时间。     

小儿骶管麻醉中不同镇静方法镇静效果的研究

目的　评价不同镇静方法在小儿骶管麻醉术中镇静的优缺点 ,从而找到一种较为理想的镇静方法。方法　选择 45例ASAⅠ～Ⅱ级在骶管麻醉下行择期下腹部、会阴短小手术的患儿 ,体重 9～ 2 4kg。随机分为氟芬合剂对照组 (I)组、咪唑安定 (M )组和异丙酚 (P)组 ,每组 15例。I组 :氟芬合剂 (芬太尼 2 μg/kg) ;M组 :静脉泵注咪唑安定 1.5～ 2 .0 μg/kg·min ;P组 :静脉泵注异丙酚 2 5～ 75 μg/kg·min。每组患儿术中镇静评分在 2～ 4分。 结果　I组镇静效果比M组和P组差 (P <0 .0 5 ) ,呼吸抑制和术后躁动发生率较高。清醒时间I组比M组和P组延长 ,M组比P组延长 (P <0 .0 5 )。结论　持续静脉泵注异丙酚或咪唑安定是小儿骶管麻醉术中较为理想的镇静方法。     

四环素调控系统修饰永生化大鼠星形胶质细胞株的构建及鉴定

目的构建四环素及其衍生物强力霉素诱导表达目的基因的永生化大鼠星形胶质细胞株。方法用脂质体法将逆转录病毒载体四环素调控系统中的质粒pRevTet-On转染病毒包装细胞 PT67,经筛选培养后获得病毒载体RevTet-On,采用RT-PCR进行鉴定,并应用NIH313细胞测定病毒滴度。将RevTet-On感染永生化大鼠星形胶质细胞,用有限稀释法挑选阳性细胞单克隆后扩大培养,每个克隆瞬时转染含萤光素酶报告基因的质粒pRevTRE-Lue,加入强力霉素48h后分别检测其萤光素酶活性值,挑选出强力霉素诱导表达高、背景表达低的细胞株并检测其诱导表达的时效、量效关系。结果 RT-PCR结果显示逆转录病毒包装成功,病毒最高滴度为7．4×105CFU／ml。RevTet-On转染永生化大鼠星形胶质细胞后挑选出48个单克隆,瞬时转染pRevTER-Luc后筛选出1株高表达低背景细胞株, 其诱导表达值为876．1 RLU,背景表达值为42．5 RLU,诱导倍数为20．6。该细胞株在加入诱导因子强力霉素1 h后目的基因即开始表达,在24 h时达到高峰,在强力霉素浓度100-2 000 ng/ml的范围内, 其诱导表达活性与药物浓度呈剂量依赖性。结论含四环素调控系统的永生化大鼠星形胶质细胞株诱导活性可靠,可用于调控表达外源基因的研究。     

CX3C趋化因子受体1对骨癌痛大鼠吗啡耐受时脊髓背角μ受体和辣椒素受体表达的影响

目的 评价CX3C趋化因子受体1(CX3 CR1)对骨癌痛大鼠吗啡耐受时脊髓背角μ受体和辣椒素受体(TRPVl)表达的影响.方法 清洁级成年雌性SD大鼠,体重180-200 g,月龄3月,经L3.4棘突间隙行鞘内置管,取鞘内置管成功的大鼠48只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=12):对照组(A组)、鞘内注射生理盐水组(AM组)、鞘内注射IgG组(GM组)和鞘内注射CX3CR1中和抗体组(BM组).A组仪手术暴露右侧胫骨七段;其余3组右侧胫骨上段骨髓腔注入Walker256 乳腺癌细胞10μl(400个/ μl)建立骨癌痛模型,术后第10天开始鞘内注射吗啡20tg/kg,2次/d,连续7d,建立骨癌痛-吗啡耐受模型,注射吗啡第8天分别经鞘内注射相应溶液10μl,1次/d,连续3d.分别于接种Walker 256乳腺癌细胞前(T0)、接种后第3、6、9天、注射吗啡第3、7天、鞘内注射抗体第3天(T1-T6)时测定机械缩足阈值(MWT)和机械缩足持续时间(MWD),于T6时测定痛阈后处死大鼠,取脊髓L4-6节段组织,采用Western blot法检测脊髓背角小胶质细胞CX3 CR1蛋白的表达,采用免疫组化法检测神经元μ受体和TRPV1的表达.结果 与A组比较,BM组T2.3.5时、AM组和GM组T2,3,5,6时MWT下降,MWD升高,T6时CX3CR1蛋白和TRPV1表达上调,μ受体表达下调(P＜0.01);与AM组和GM组比较,BM组T6时MWT上升,MWD降低,CX3CR1蛋白和TRPV1表达下调,μ受体表达上调(P＜0.01).AM组和GM组上述指标差异无统计学意义(p＞0.05).结论 CX3CR1可通过下调大鼠脊髓背角μ受体和上调TRPVI参与骨癌痛大鼠吗啡耐受的形成.     

重度多发性创伤患者血清白介素—6及肿瘤坏死因子与多器官衰竭的…

选择８例重度多发性创伤患者，根据创伤后是否接受手术分为创伤手术组，非手术组。动态观察受伤当日，伤后第３、１０、２０天血清白介素－６（ＬＬ－６）以及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）。水平的变化，且与腹部外科选择性手术组进行了比较，分析了创伤后感染性并发症发生率及创伤后ＬＬ－６、ＴＮＦ的变化与多器官功能衰竭的关系。结果表明多发性创伤患者从受伤当日至出院前细胞因子ＩＬ－６、ＴＮＦ明显升高，而发展为多器官功能衰竭者     

N-甲基-D天冬氨酸受体2B亚基重组腺病毒穿梭载体的构建及鉴定

目的：构建携带N-甲基-D天冬氨酸（NMDA）受体2B亚基（NR2B）基因的腺病毒5型（Ad5）穿梭载体，为NR2B重组腺病毒镇痛疫苗的包装做准备。方法：以限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切质粒pcDNA3．1-NR2B获得目的基因NR2B；将NR2B定向克隆入腺病毒穿梭载体pDC515，并行酶切及DNA测序鉴定。在脂质体介导下将pDC515-NR2B转染293细胞，并以RT-PCR及Western blot分别从转录水平和翻译水平检测目的基因NR2B的表达。结果：经酶切和DNA测序证实目的基因NR2B被成功克隆入载体pDC515-NR2B中，RT-PCR及Western blot检测NR2B可在293细胞表达。结论：成功构建NR2B重组Ad5穿梭载体pDC515-NR2B，该载体可用于NR2B重组Ad5载体镇痛疫苗的包装。     

低潮气量机械通气对瓣膜置换病人肺换气功能影响的临床研究

目的以心输出量和肺换气功能为指标研究低潮气量通气对瓣膜置换病人心肺功能的影响。方法30例择期行二尖辩置换手术病人随机分成3组：常规（传统）潮气量组（组Ⅰ），潮气量9mL／kg，呼吸频率12次／min；低潮气量常规频率组（组Ⅱ），潮气量7mL／kg，呼吸频率12次／min；低潮气量高频率组（组Ⅲ），潮气量7mL／kg，呼吸频率15次／min。监测平均动脉压（MAP），放置飘浮导管监测心输出量（CO）和心指数（CI），平均肺动脉压（MPAP），肺毛细血管嵌压（PCWP），中心静脉压（CVP），体循环阻力指数（SVRI），肺循环阻力指数（PVRI）。测定动脉氧分压（PaO2）、动脉二氧化碳分压（PaCO2），以及氧合指数（PaO2／FiO2），肺泡动脉氧分压差（PA-aO2），肺内分流量（QS／QT）。结果组Ⅱ，体外循环后60min时与比麻醉后体外循环前比，氧和指数（PaO2／FiO2）显著降低（P〈0．05），肺泡-动脉氧分压差（PA-aO2）和肺内分流量（QS/QT）显著增加（P〈0.05）。组Ⅱ与组Ⅰ和组Ⅲ相比，在体外循环后60min（T4），氧和指数显著降低（P〈0．05），肺泡-动脉氧分压差和肺内分流量显著增加（P＜0．05）。结论低潮气量机械通气对循环功能无明显影响，并能保持起好通气。低潮气量常规频率通气不能减轻体外循环引起的肺换气功能损害。低潮气量高频率通气和常规潮气量通气能减轻或消除体外循环引起的早期肺换气功能损害。     

慢性疼痛的治疗现状

1986年,世界疼痛学会将慢性疼痛定义为急性组织损伤修复后疼痛持续状态超过1个月或疼痛反复发作3个月以上者。慢性疼痛与急性疼痛在病因、病理生理、症状、诊断、治疗以及生理学功能方面均有明显差异。急性疼痛是机体正常的保护性反应,常由明确的损伤引起,其特点为发生快、程度     

黑体果蝇七氟醚麻醉ED50值测定

目的　在染色体水平对决定果蝇吸入麻醉药敏感性的基因进行定位, 选择合适的果蝇品系。方法　用单瓶连续法测定7 d龄野生黑腹果蝇(HYM3, H) 和黑体果蝇(black body, b) 七氟醚麻醉ED50 值, 将两种品系果蝇七氟醚麻醉ED50值进行比较。结果　黑腹果蝇和黑体果蝇七氟醚麻醉ED50 值分别为(0. 790±0.023)%和(0. 557±0 .029)%, 经t检验, 两种品系果蝇七氟醚半数麻醉有效剂量差异有极显著性意义(P<0 .01)。结论　黑体果蝇可用于决定黑腹果蝇对七氟醚麻醉敏感性基因的定位研究。