RFP-AWP1原核表达载体的构建及表达特性研究

目的:建立红RFP-AWP1融合基因的原核表达载体,研究其表达蛋白特性。方法:将克隆的人AWP1(associated with protein kinase Crelated kinase 1,AWP1)和水母的红色荧光蛋白(redfluorescence protein,RFP)的cD-NA插入到原核表达载体pET-17b的多克隆位点(mutiple clone sites,MCS)中,经AWP1 cDNA的PCR鉴定和E.coli DE3中的表达鉴定后,E.coli DE3表达AWP1-RFP融合蛋白,荧光显微镜观察其表达特性及与GST-beads的pull-down实验。结果:成功构建了载体pET-AWP1-DsRed1,在大肠杆菌中获得了高效表达的AWP1-RFP融合蛋白,其活菌液在荧光显微镜下呈火山熔岩状的亮红色,干固的细菌呈斑片状红色荧光;AWP1-RFP融合蛋白可与GST-beads结合,并在激发波长为508nm的条件下呈红色荧光,而在波长为488 nm激发光条件下可见橙黄色荧光。结论:在体外验证了AWP1-RFP融合蛋白具有可视性表达的特点,同时发现其能与GST-beads结合,为pull-...     

术前减黄治疗对梗阻性黄疸患者CA19-9的影响

目的 探讨术前减黄治疗对梗阻性黄疸患者CA19-9和TBil的影响,为梗阻性黄疸患者的鉴别诊断提供依据.方法 回顾性分析2005年7月至2008年7月成都军区总医院收治的32例梗阻性黄疸患者的临床资料.分析17例恶性胆道梗阻性黄疸患者(恶性梗阻组)和15例良性胆道梗阻性黄疸患者(良性梗阻组)通过PTBD进行减黄治疗前后的CAl9-9和TBil的变化情况.采用t检验分析数据.结果 经减黄治疗后,恶性梗阻组患者的TBil由(27l±74)μmol/L下降到(144±33)μmol/L,治疗前后比较差异有统计学意义(t=6.52,P<0.05);CA19-9由(277±114)U/ml下降到(264±98) U/ml,治疗前后比较差异无统计学意义(t=0.34,P>0.05).良性梗阻组患者的TBil和CA19-9均下降明显,分别由(245±67)μmol/L下降到(135±43)μmol/L和(239±103)U/ml下降到(117±84)U/ml,两种指标治疗前后比较差异有统计学意义(t=5.30,3.54,P<0.05).结论 对梗阻性黄疸患者术前进行减黄治疗,动态观察血清CA19-9变化情况,有利于梗阻性黄疸患者的鉴别诊断.     

胰腺血管淋巴管瘤的诊断

Hemolymphangioma is a kind of deformity of the lymphatic vessel and venule,which is rarely seen in clinical practice.A 66-year-old female patient who had a chief complaint of distention in left upper quadrant of the abdomen for 6 months was admitted to the General Hospital of Chengdu Military Region of PLA.Examination of computed tomography and B ultrasound confirmed that the patient had a retroperitoneal cystic mass.During the exploratory laparotomy,the soft mass was found at the left upper quadrant of the abdomen and had invaded to the pancreas.Postoperative pathological examination confirmed that the mass was a pancreatic hemolymphangioma.     

多形核粒细胞在急性胰腺炎肝损害中的作用

目的 观察急性胰腺炎发生时，肝脏中多形核粒细胞（polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润与肝损害间的关系。方法 W istar大鼠72只，随机分为急性胰腺炎组，急性胰腺炎PMN消耗组及对照组，分别于术后3h,6h,12h及24h观察血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT），肝组织髓过氧化物酶（MPO）及肝组织病理改变。结果 在急性胰腺炎诱导6h后，肝组织中MPO明显增加并呈进行性增高，同时，肝脏的病理改变及肝功能损害也呈进行性加重，消耗循环PMN后，肝组织中MPO水平明显下降，肝脏的病理改变及肝功能损害也同时得以减轻。结论 肝组织中PMN浸润在急性胰腺炎肝损害过程中具有重要的作用。     

胆道金属支架置入治疗肝门部胆管癌的临床研究

目的:探讨经皮经肝胆道引流(PTBD)及经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)置入胆道支架治疗肝门部胆管癌的临床应用价值。方法:对75例行金属胆道支架置入的肝门部胆管癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果:PTBD组31例患者中29例实施支架放置,26例(89.7%)成功置入支架并发症发生率为6.5%,中位生存时间为26周;ERCP组44例患者中38例(86.4%)成功置入支架,并发症发生率为13.6%,中位生存时间为28周。29例单侧支架置入者和35例双侧支架置入者中位生存时间均为28周。结论:经PTBD及经ERCP的胆道支架置入对肝门部胆管癌均可获得良好的治疗效果。以PTBD方式放置时可采用单侧置入,以ERCP方式放置时应进行左右侧双支架置入。     

门静脉分支结扎后门静脉压力变化与肝再生的关系

目的 探讨90%门静脉分支结扎后大鼠门静脉压力变化与肝再生的关系.方法 45只雄性SD大鼠行90%门静脉分支结扎术,其中5只进行假手术作为对照.观察不同时相点门静脉压力和非结扎侧肝脏质量变化,光学显微镜下观察非结扎侧肝细胞的形态学变化,免疫组织化学方法检测未结扎侧肝细胞的增殖细胞核抗原(PCNA),TUNEL法检测未结扎侧肝细胞的凋亡情况,并进行定最分析.采用Pearson相关分析和t检验分析数据.结果 95%(38/40)的大鼠存活.结扎侧肝叶进行性萎缩,非结扎侧肝叶占全肝质量的比例随时问推移而增加,12 h内增加较缓慢,仅为10.75%;而1～5 d则增加速度明显加快,达到27.57%;7～28 d达到平台期,缓慢增加到32.37%.术前门静脉压力为(9.1±1.8)cm H_2O(1 cm H_2O=0.098 kPa);结扎后立即升高,12 h达到高峰(15.8±2.7)cm H_2O,与术前比较差异有统计学意义(t=6.847,P<0.05);1～28 d由(13.6±2.3)cm H_2O逐渐下降为(9.3±2.0)cm H_2O.术前大鼠PCNA阳性细胞计数为7%±3%,术后12 h至3 d由14%±5%上升至21%±6%,第5天达到高峰为26%±7%,与术前比较差异有统计学意义(t=9.129,P<0.05),随后逐渐恢复正常.TUNEL法检测结果显示,术前大鼠肝脏和术后各时相点大鼠未结扎侧肝脏仅见极少量凋亡细胞.大鼠门静脉压力与非结扎侧肝叶肝细胞PCNA的表达在术后1、3、5 d呈正相关(r=0.913,0.896,0.908,P<0.05),在术后14 d时相点呈负相关(r=-0.926,P<0.05).结论 大鼠90%门静脉分支结扎术后,引起未结扎侧肝细胞的活跃再生,再生后的肝脏可恢复原来的质量;肝再生以肝细胞增殖加速为主,而非肝细胞凋亡减少;门静脉压力变化在肝再生过程中可能发挥重要作用.     

改善肝部分切除手术中肝脏微循环功能的研究

目的探讨在肝脏部分切除手术前增加肝细胞内糖原含量能否减轻术中因阻断肝血流所引发的肝脏微循环功能的损伤程度。方法将我院近9年治疗的32例原发性肝癌患者分为实验组及对照组。实验组于术前24h内静脉滴注高浓度的葡萄糖;对照组不做特殊处理。两组患者均采用阻断第一肝门方法行病变肝脏切除术。术中动态测定肝脏微循环血流量;并于术前及术后第1、5天,抽取血液标本,检测患者肝功能情况。结果于肝门血流阻断解除后同一时相,两组肝脏微循环血流量值均表现为实验组显著大于对照组(P<0.01),且术后第1、5天,实验组肝功能改善程度均显著优于对照组(P<0.01),而术前两组间差异不显著。结论在阻断肝脏血流施行复杂的肝脏手术之前,增加肝细胞内糖原含量可有效地减轻肝脏微循环功能的损伤程度,降低手术风险。     

腹腔镜胆囊切除术300例报告

１９９２年９月至１９９３年８月，我院共实施腹腔镜胆囊切除术３００例，其中男１０４例，女１９６例，年龄１２～７６岁。行全麻１７６例，持续硬膜外麻醉１２４例（４１％）；中转开腹１６例（５．３％），无一例胆管损伤和死亡，治愈率达１００％。术后共发生并发症１２例（４％），其中出血２例，经开腹止血愈；漏胆５例，经开腹引流１例，穿刺引流４例治愈。作者认为预防并发症的关键在于手术操作熟练和认清局部解剖关系。在遇粘连严重致局部解剖不清时应果断中转开腹。     

选择性逆行胰胆管造影的体会

我院从1975年至83年共作选择性逆行胰胆管造影238例次(229例),获有诊断价值资料200例次(191例),占84.0％。77年以前共作9例,仅成功4例;78年到83年4月共作229例次(220例),成功220例次(211例),成功率为96.1％。     

超声引导下经皮经肝胆管穿刺置管引流在梗阻性黄疸病人中的应用

目的　评价超声引导下经皮经肝穿刺胆管置管引流 (UPTBD)对梗阻性黄疸病人的治疗价值。方法　对 1995年 1月至 2 0 0 2年 7月期间的 4 17例梗阻性黄疸病人进行 4 97次UPTBD治疗 ,并回顾总结他们的临床资料。结果　接受PTBD治疗共有 4 17例 (5 1例病人进行了两个胆管枝的PTBD) ,穿刺成功率达 93.2 % (4 36 / 4 6 8) ,32例首次穿刺失败的病人有 2 9例进行了第二次穿刺置管 ,全部成功。发生胆汁漏 /胆汁性腹膜炎 9例 ,胆道出血 8例 ,感染性休克 1例 ,无腹腔出血、后腹膜血肿、气胸等其他并发症。对 6 4例置管引流患者进行肝功能检测 ,与穿刺前相比 ,引流后 1周和 3周检测病人血清胆红素、转氨酶均显著下降。结论　UPTBD是一项姑息性治疗梗阻性黄疸的快捷、安全、有效的方法