胰腺癌组织微血管密度及淋巴管密度的改变及临床意义

目的：研究胰腺癌组织中微皿管密度（MVD）和淋巴管密度（LVD）的变化、与胰腺癌临床病理的联系及相互关系。方法：采用免疫组织化学SABC法应用CD34检测41例胰腺导管腺癌患者配对癌组织和正常胰腺组织中MVD的表达情况,应用D2—40检测配对癌组织、癌旁组织及正常胰腺组织中LVD的表达情况,分析MVD和LVD与肿瘤分化程度、分期和淋巴转移间的相关性以及癌组织MVD与癌旁组织LVD表达之间的关系。结果：癌组织及正常胰腺组织MVD分别为46585±16,935和11．100±4．036,两组差异有统计学意义（P=0．000）。癌组织、癌旁及正常胰腺组织LVD分别为11．244±4．800、15．829±7．470和13．512±5．139;其中癌旁组织与正常胰腺组织LVD差异无统计学意义（P=0．060）,癌旁组织与癌组织的LVD差异有统计学意义（P=0．000）。胰腺癌组织MVD与癌旁组织LVD间存在相关性（P=0.025〈0．05）。结论：胰腺导管腺癌组织中MVD及LVD与肿瘤分化程度、病理分期及淋巴转移相关;胰腺癌组织内MVD与癌旁组织LVD间存在相关性。     

Der p 2基因真核表达载体构建及其在小鼠树突状细胞中的表达

背景：树突状细胞是目前已知的最强大的抗原提呈细胞，已经被应用于免疫治疗的研究中。 目的：构建Der p 2真核表达载体，并证明能在小鼠骨髓来源的树突状细胞中表达。 设计、时间及地点：单一样本观察，实验于2005-05/12在解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所完成。 材料：C57BL/6小鼠；plambd-Der p 2购自美国HESKA公司；pCI-neo质粒为解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所保存。 方法：体外分离，培养小鼠骨髓来源树突状细胞。将原核表达质粒plambdDer p 2携带的Der p 2全长cDNA切下，重组到真核表达质粒pCI-neo中，然后在脂质体介导下，将重组质粒转染到小鼠骨髓来源的树突状细胞，以未转染质粒和转染空白载体pCI-neo的树突状细胞为对照。 主要观察指标：①pCI-neoDer p 2重组质粒结构鉴定。②并用反转录-聚合酶链反应、Western Blot检测Der p 2mRNA和蛋白表达。 结果：测序证实构建的重组质粒中携带了Der p 2的全长cDNA序列，且与Gene Bank序列完全一致。反转录-聚合酶链反应和Western Blot检测结果提示，重组质粒转染的树突状细胞能表达Der p 2 mRNA和Der p 2蛋白。 结论：成功构建重组Der p 2基因真核表达载体，其转染树突状细胞后，能有效地表达于树突状细胞中。     

有哮喘，别喝酒

哮喘是一种慢性呼吸道疾病，一旦发作，来势汹汹，也许前一刻还活蹦乱跳，下一刻就病倒在床。据初步统计，目前世界上约有1亿多人患哮喘，哮喘死亡率高达万分之三点六七，在疾病死亡率中位居第一。因此，人们应高度重视哮喘病的防治。     

屋尘螨过敏原Der p1研究进展

屋尘螨（dermatophagoides，house dust mite，HDM）是国内最重要的室内过敏原之一，含有多种与哮喘有关的抗原成分，其中Der p1是主要抗原之一，在哮喘的发病机制中起着重要的作用，也是研究最多的屋尘螨抗原之一，本文就Der p1的研究现状进行回顾。     

长期吸入沙美特罗/氟替卡松治疗哮喘安全吗?

2006美国食品和药品管理局（FDA）发布了对吸入沙美特罗／氟替卡松治疗哮喘的安全性警示公告，今年以来互联网上也在流传沙美特罗／氟替卡松“致命”的信息。由此，沙美特罗／氟替卡松治疗的安全性问题受到了许多医师和患的关心。美国FDA发布沙美特罗／氟替卡松安全性警示的主要依据来源于“沙美特罗治疗哮喘的多中心临床试验（SMART）研究”，该结果已在今年《Chest》杂志上发表。SMART是葛兰素史克公司发起的一项长期使用沙美特罗治疗哮喘的安全性研究，由于该试验进行到中期时即发生了16例哮喘相关性死亡（治疗组13例，对照组3例）的严重不良事件而终止。     

五味子有效成分提取分离方法的研究进展

五味子为我国传统的中药之一,具有多种药用功效,该文对近些年来五味子多种有效成分的提取分离方法做一综述,以利进一步的研究与开发利用。     

哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞Fas表达及药物的影响

目的：研究哮喘时嗜酸性粒细胞凋亡与Ｆａｓ表达的关系及药物地它们的影响。方法：应用地塞米松（ＤＭ）、雷公藤甲素及氨茶碱（ＡＭ）干预哮喘豚鼠,以ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡,以ＲＴ－ＰＣＲ及原位杂交检测ＦａｓｍＲＮＡ表达。结果：哮喘组Ｅｏｓ凋亡率较正常对照组显著降低。应用ＤＭ、ＴＰ、ＡＭ后均显著增加。正常豚鼠Ｅｏｓ可检测到ＦａｓｍＲＮＡ表达,不同Ｅｏｓ表达差异不显著。哮喘组ＦａｓｍＲＮＡ明显减少,以低密度     

正常人外周血嗜酸性粒细胞的分离与培养方法的改进

目的：探讨外周血嗜酸性粒细胞（Eos）纯化、分离与培养的方法。方法：采用Percoll密度梯度（1．082～1．100）分离外周血Eos,离心前细胞悬液预先与fMLP37℃孵育10min。纯化的Eos分别在加入或不加入细胞因子（IL－3、IL－5和GM－CSF）的条件下培养,观察细胞活力的变化。结果：传统Percoll密度梯度分离Eos的纯度和回收率分别为（15．8±53）％和（64．3±6．4）％。预先用fMLP孵育Eos使分离Eos纯度（96.5±1．8％）显著增高（P<0.01）,回收率（68．4±71）％无明显变化（P>0.05）。Eos体外培养存活2～3d,加入细胞因子可使Eos存活时间延长6d以上。结论：fMLP可有效增加Percoll密度梯度分离Eos的纯度。分离的EoS可用于体外培养。     

056 CD4+T细胞功能性分化的研究进展

近年来关于aⅪ+T细胞功能性分化的研究包括C阱+T细胞亚群的分化,aⅪ+T细胞亚群的多样性、稳定性和h、Tm效应细胞的功能.这些研究有助于进一步探讨免疫性疾病的发病机理及治疗途径.     

肺炎链球菌毒力蛋白DNA疫苗优势抗原组合筛选及鉴定

目的 探讨肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原联合免疫的优势抗原组合方式.方法 分子克隆肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)N端及肺炎链球菌溶血素(Ply)基因序列,构建重组质粒pcDNA3.1-PspA'和pcDNA3.1-PBD(PBD为Ply 点突变减毒体),免疫印迹(Western blot)检测重组质粒在哺乳动物BHK-21细胞中的表达(包括前期工作中构建的重组质粒pcDNA3.1-PsaA).将3种重组基因疫苗以不同方式组合肌肉注射免疫150只BALB/c小鼠(B组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA',C组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PBD,D组:pcDNA3.1-PspA'+pcDNA3.1-PBD,E组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA'+pcDNA3.1-PBD),检测各组小鼠血清特异性抗体IgG水平,观察免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌D39携带改变和D39腹腔攻击小鼠21 d生存情况.结果 成功构建3种重组真核表达载体,ELISA检测结果显示B组小鼠血清特异性IgG抗体水平与E组相似(P>0.05),均明显高于A、C、D组[A组:对照空质粒组pcDNA3.1(+)]小鼠(P<0.01);免疫小鼠鼻咽部D39携带菌落计数提示B组小鼠相似于E组小鼠(P>0.05),并明显少于C、D组和阴性对照组(A组和PBS组,P<0.01),并且D39腹腔攻击小鼠21 d生存时间分析亦提示其中位生存时间明显长于C组及阴性对照组(A组和PBS组,P<0.01).结论 PspA'联合PsaA的抗原组合方式具有高效的协同保护效能,可作为肺炎链球菌DNA疫苗的优势候选抗原组合.