肝癌差异表达基因研究进展(文献综述)

目前发现大量的癌基因、抑癌基因,或相关基因参与肝癌的发生、发展,在肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织之间,在RNA、蛋白水平都存在众多的差异表达基因,认识这些基因及其转录、调控的分子机制,对于揭示肝癌的发病机制具有重要意义,本文就该领域的研究进展进行综述.     

刺五加注射液治疗高通气综合征30例

自2002年2月-2004年2月共收治了56例高通气综合征患者，其中30例除常规治疗外，应用刺五加注射液治疗，收到了较好的效果，现报道如下。     

两种巨噬细胞系中PKC亚型表达的差别与其抗瘤活性的比较:依赖一氧化氮的杀瘤机制

目的探讨 LPS 诱导的巨噬细胞杀瘤效应以及与 PKC 相关的分子机制。方法两种巨噬细胞系 P388D1和 RAW264.7用 LPS 刺激、或先用 PMA 长期处理下调 PKC 表达、或用 L-NAME 阻断 iNOS 后再以LPS 刺激,检测其杀伤肿瘤细胞系 P815(MTT 法)及分泌 IL-1,TNF-α(ELISA 法)和 NO(Griess 试剂)的作用;并用 Western blot 法检测 PMA 长期作用后两株细胞系中 PKC 亚型的表达。结果 LPS 刺激的 RAW264.7细胞有杀伤靶细胞的功能,而 P388D1几乎没有杀伤作用。PMA 预处理(1μg/mL,24h)后可明显抑制 LPS 诱导的杀瘤作用。因上述结果提示 PKC 在巨噬细胞杀瘤活性中可能的重要作用,比较了 PMA 处理后两株细胞 PKC 亚型的表达:Western blot 结果显示,在所检测的 PKCα,β1,β2,δ及ε5种亚型中,在 P388D1细胞均有表达,而在 RAW264.7细胞仅有 PKCα,PKCβ1,PKCδ表达;1μg/mL PMA 作用24h 后明显下调了 RAW264.7细胞 PKCα,PKCβ1和PKCδ的表达,在 P388D1则有 PKCα、PKCδ和 PKCε下调,而 PKCβ1和 PKCβ2不被下调。结合 LPS 诱导的与 PKC 活化有关的 IL-1、TNF-α及 NO 的产生,发现在 P388D1细胞几乎不产生 NO,而在 RAW264.7细胞,NO 合成酶抑制剂 L-NAME 不仅能阻断 LPS 诱导的 NO 的产生,而且明显抑制 LPS 诱导的杀瘤活性。结论 LPS 诱导的巨噬细胞杀瘤作用主要是 NO 的杀伤作用来完成而非巨噬细胞直接与瘤细胞作用所致;而该作用与 PKCβ活性密切相关。     

丝裂霉素C对肝癌细胞中NF-κB基因表达和分布的影响

目的:探讨丝裂霉素C(MMC)对肝癌细胞中NF-κB分布和基因表达的影响.方法:应用细胞免疫组织化学检测不同浓度的MMC对SK-HEP-1细胞中NF-κB分布的影响,Western-blot检测50μg/ml MMC作用不同时间的NF-κB蛋白水平,RT-PCR方法比较50μg/ml MMC持续处理细胞不同时间和作用2 h停止用药后不同时间NF-κB基因表达水平的影响.结果:不同剂量的MMC能够不同程度地使细胞核中NF-κB免疫组化染色增强,50μg/ml的MMC导致了NF-κB蛋白蛋白印迹水平升高,并在MMC处理8 h的细胞中升至最高,RT-PCR方法检测NF-κB基因mRNA水平在MMC持续处理的细胞中也上升,在第2小時水平最高,随后下降,但是在MMC处理2 h停止用药后NF-κB基因mRNA水平没有下降反而继续上升,并持续到第12小時.结论:MMC能够促进NF-κB自细胞浆进入细胞核,50μg/ml的MMC导致了NF-κB自身表达升高并在撤除用药后仍旧存在,提示NF-κB同细胞抗MMC活性密切相关.     

丝裂霉素C对肝癌细胞中NF-κB基因表达和分布的影响

目的：探讨丝裂霉素C(MMC)对肝癌细胞中NF-kB分布和基因表达的影响。方法：应用细胞免疫组织化学检测不同浓度的MMC对SK-HEP-l细胞中NF-kB分布的影响，Western-blot检测50μg／ml MMC作用不同时间的NF-kB蛋白水平，RT-PCR方法比较50μg/ml MMC持续处理细胞不同时间和作用2h停止用药后不同时间NF-kB基因表达水平的影响。结果：不同剂量的MMC能够不同程度地使细胞核中NF-kB免疫组化染色增强，50μg/ml 的MMC导致了NF-kB蛋白蛋白印迹水平升高，并在MMC处理8h的细胞中升至最高，RT-PCR方法检测NF-kB基因mRNA水平在MMC持续处理的细胞中也上升，在第2小时水平最高，随后下降，但是在MMC处理2h停止用药后NF-kB基因mRNA水平没有下降反而继续上升，并持续到第12小时。结论：MMC能够促进NF-kB自细胞浆进入细胞核，50μg/ml的MMC导致了NF-kB自身表达升高并在撤除用药后仍旧存在，提示NF-kB同细胞抗MMC活性密切相关。     

聚糖蛋白抗体的制备及其在肝癌组织及细胞系蛋白表达检测中的应用

目的制备聚糖蛋白3(glypican-3,GPC3)抗体并应用其对肝癌组织及细胞系中GPC3蛋白表达进行研究,探讨GPC3蛋白作为肝癌潜在的新的肿瘤标志物的可能性。方法利用原核表达系统诱导表达了GPC3抗原并制备了特异性好的兔抗GPC3多克隆抗体,应用该纯化的抗体对40例组织(正常肝7例,肝细胞型肝癌26例,胆管细胞型肝癌7例)及4个细胞系(肝癌细胞系HepG2、HuH-7、Hep3B,非肝癌细胞系Hela)进行了蛋白印记杂交试验。结果Western blot结果显示,肝癌组织及肝癌细胞系HepG2、HuH-7、Hep3B细胞系中有相对相对分子质量约70000的蛋白主带,与GPC3的核心蛋白带相对分子质量大小相一致;正常肝组织不表达GPC3蛋白,肝细胞型肝癌中癌组织(HCC)及癌旁组织表达GPC3蛋白的比例分别为84.6%(22/26)及30.8%(8/26),7例胆管细胞型肝癌(ICC)中有2例癌组织及其旁组织表达GPC3。结论GPC3蛋白广泛存在于肝癌组织中,很可能成为一种新的肝癌肿瘤标志物。     

原发性肝细胞性肝癌分子机理研究的几个热点问题

肝细胞性肝癌 (ＨＣＣ)是最常见的一种肝癌 ,我国每年新发病例约占全球 4 5 %。且近年来 ,我国肝癌发病率上升 ,严重危害劳动人民的健康与生命安全。经过半个世纪的努力 ,我国医学工作者在肝癌的外科治疗上已取得了突破性的成绩 ,但传统的外科手术加化疗或放疗等方法仍有其局限性 ,肝癌的生物治疗也很不成熟 ,肝癌根治性切除后的复发率很高 ,复发的危险因素主要与肝癌的侵袭转移性有关。要使肝癌患者的生存率提高到一个新的水平 ,应加强肝癌分子病理机制的研究 ,寻找肝癌复发转移的靶基因 ,探讨肝癌生物治疗的新途径。现提出肝癌分子生物学…     

实时超声弹性成像评价无水酒精所致兔肝坏死灶的研究

目的 探讨应用实时超声弹性成像技术评价无水酒精注射所致兔肝局部坏死灶形态及大小的价值.方法 健康日本大耳兔24只,随机分成4组:酒精注射即刻组、1周组、2周组、4周组,每组6只,将1mL无水酒精注入兔肝左叶,分别用常规二维超声及超声弹性成像测量坏死灶的最大横径,并与大体标本测量的结果进行对照.结果 各组弹性图上均显示坏死灶呈均匀蓝色(较硬区),明显区别于周围正常肝组织(绿色区域).弹性成像测量的各组坏死灶大小与大体标本的相关性(r)分别为0.803、0.854、0.858、0.844(P值分别为0.039、0.030、0.029、0.035).其中常规二维超声与大体标本测量值比较,差异有统计学意义(P<0.05),实时超声弹性成像与大体标本测量的结果比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 常规二维超声不能准确评价坏死灶的大小,而实时超声弹性成像能很好的反映无水酒精所致兔肝坏死灶的大小,实时超声弹性成像可能成为评价无水酒精所致兔肝坏死灶形态及大小的有效方法.     

成人社区获得性肺炎住院病人支原体、衣原体IgM抗体检测结果分析

社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)是威胁人类健康的常见病。随着生存环境的改变,抗生素的广泛应用以及先进诊断方法的不断出现等,CAP中非典型病原体如肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cp)的感染率在不断上升。为了解本地区下呼吸道Mp、Cp感染的情况,我们对2001年10月-2003年9月期间于我院呼吸内科住院的242例CAP患者进行了回顾性分析。