核转录因子κB 抑制子α、β和ε共同稳定下调的HepG2细胞系的建立

目的:利用RNA干扰的方法,构建针对人核转录因子κB抑制子(IκB)α、β和ε的共同干扰载体,转染人肝细胞癌HepG2细胞,建立稳定、共同下调IκBα、IκBβ和IκBε的HepG2细胞系,为后续研究奠定基础。 方法:构建3个针对人IκBα基因的干扰载体pcDNATM6.2-miR-IκBα(1,2,3),转染HepG2细胞,在mRNA和蛋白水平检测3个干扰载体对IκBα表达的抑制作用,筛选出抑制效果最好的干扰载体。以同样的方法构建并筛选出分别针对人IκBβ和IκBε基因的最佳干扰载体,通过酶切连接反应将分别针对IκBα、IκBβ和IκBε基因的3个最佳干扰片段串联连入pcDNATM6.2-miR干扰载体中,构建可同时干扰IκBα、IκBβ和IκBε的共同干扰载体pcDNATM6.2-miR-IκBα-IκBβ-IκBε。将共同干扰载体转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立IκBα、IκBβ和IκBε的表达共同稳定下调的HepG2细胞系,并以蛋白质印迹法检测IκBα、IκBβ和IκBε的蛋白表达。 结果:成功构建共同干扰载体pcDNATM6.2-miR-IκBα-IκBβ-IκBε;Western印迹结果显示,与正常及对照载体pcDNATM6.2-miR-Neg转染的HepG2细胞相比,在稳定转染pcDNATM6.2-miR-IκBα-IκBβ-IκBε的HepG2细胞系中,IκBα、IκBβ和IκBε的表达均稳定下调。 结论:成功建立了IκBα、IκBβ和IκBε共同稳定下调的人肝细胞癌HepG2细胞系,为后续研究奠定了基础。     

肺癌晚期患者心理调查及抗焦虑、抑郁干预观察

肺癌是一种常见的肺部恶性肿瘤,死于癌症的男性患者中肺癌已居首位。当前肺癌的早期诊断尚有困难,70%～80%的患者确诊时已超越根治性切除范围,临床确诊多为晚期[1]。肺癌患者,尤其是晚期患者承受着较大的身心压力,负性情感,如焦虑、抑郁,较为严重。本文对我院2008年以来收住的肺癌晚期患者65例进行心理状况调查并同时采取心理干预及抗焦虑、抑郁干预措施,取得了较好效果,报道如下。     

强的松对大鼠肺纤维化的治疗作用

目的 研究强的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的治疗效果.方法 45只Wistar大鼠随机均分为三组:肺纤维化模型(A)组、强的松6 mg/kg治疗(B)组和生理盐水对照(C)组.第28、42、56天取各组肺组织行HE和Masson染色,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组织化学方法测定白细胞介素1β(IL-1β)表达.结果 B组肺泡炎及肺纤维化评分、羟脯氨酸含量、IL-1β表达均较A组明显减少(P＜0.01).结论 强的松可能通过减轻炎症反应,从而对大鼠肺纤维化起治疗作用.     

临床路径在支气管哮喘患者健康教育中的应用

[目的]探讨临床护理路径在支气管哮喘患者健康教育中的作用与应用。[方法]将收治的139例支气管哮喘患者随机分为实验组与对照组,通过临床护理路径对实验组81例患者进行健康教育,并用对照组58例患者进行对照。[结果]两组患者的健康教育达标情况的差异有统计学意义(P﹤0.01),实验组患者对临床护理工作的满意程度显著高于对照组(P﹤0.01)。[结论]临床护理途径是对支气管哮喘患者进行健康教育的有效途径,通过对哮喘患者进行健康教育可提高患者对临床护理工作的满意度。     

间歇性重度低氧对大鼠学习记忆影响

目的 建立不同暴露时间点大鼠间歇重度低氧模型,探讨间歇重度低氧对大鼠学习记忆功能的影响.方法 成年雄性Wistar大鼠48只分为对照组和间歇性低氧组;采用低氧舱模拟5%间歇低氧环境.在间歇低氧2、4、6、8周采用Morris水迷宫检测学习记忆功能,苏木精-伊红(HE)染色观察海马区神经细胞形态变化.结果 与对照组比较,间歇性低氧组中神经细胞形态结构损伤明显,存活神经元密度(13.18±2.18)随低氧时间延长降低(P<0.05);低氧2、4、6、8周大鼠逃避潜伏期时间分别为(49.17±8.87)、(58.47±6.98)、(65.15±7.44)和(68.42±7.91)s,随低氧时间延长动物逃避潜伏期时间延长(P<0.5).结论 间歇性低氧可造成神经细胞损伤、学习记忆功能障碍,且随间歇性低氧时间延长而加重.     

人信号调节蛋白α单克隆抗体的制备及初步应用

目的 以合成的多肽制备人信号调节蛋白α(SIRPα)的单克隆抗体(mAb),并初步应用于免疫学检测,评价其应用效果。方法 以合成多肽与载体KLH交联的偶联物为免疫原,免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术建立能稳定分泌抗人SIRPα的杂交瘤细胞株。采用分泌的mAb进行流式细胞术、蛋白质印迹及免疫组化检测,观察检测结果;采用分泌的mAb刺激经豆蔻佛波醇乙酯(PMA)处理的THP-1细胞,抗体芯片检测分泌细胞因子水平的变化,ELISA法验证其中TNF-α、IL-6的水平变化。结果 成功获取可分泌抗人SIRPα的杂交瘤细胞,分泌的mAb应用于流式细胞术、蛋白质印迹及免疫组化检测,取得较好的效果;与阴性对照组和同型抗体对照组相比,制备的mAb能促进经PMA处理的THP-1细胞分泌TNF-α、IL-6等细胞因子(P＜0.01)。结论 利用合成多肽成功制备了高特异性抗人SIRPα的单克隆抗体。     

糖尿病对老年高血压病患者认知功能的影响

①目的 研究糖尿病与老年高血压病患者认知功能的关系.②方法 将140例60岁以上老年高血压患者分为单纯高血压组、高血压合并糖尿病组、高血压合并高脂血症组、高血压同时合并高脂血症和糖尿病,并采用简易精神状况表(MMSE)进行认知功能测定.③结果 4组老年人中,高血压并存高脂血症组MMSE成绩(28.4±1.6)分最高,单纯高血压组MMSE成绩(27.3±2.1)分次之,高血压并存糖尿病组MMSE成绩(25.3±2.7)分,(P<0.01).高血压同时合并糖尿病、高脂血症组MMSE成绩(27.0±2.5)分明显降低(P<0.05),但以单纯合并糖尿病组下降最明显.④结论 糖尿病是老年人认知功能障碍的危险因素.糖尿病合并高血压时,可使认知功能下降显著.     

王红阳院士题词

坚持发挥优势勇于开拓创新。     

无创双水平气道正压通气联合丹红注射液对肺心病合并睡眠呼吸暂停综合征的影响

目的探讨无创双水平气道正压通气(BIPAP)联合丹红注射液治疗肺源性心脏病(肺心病)合并睡眠呼吸暂停的临床疗效。方法选择51例肺心病合并睡眠呼吸暂停患者,随机分成2组,联合组26例采用常规药物治疗加无创双水平气道正压通气联合丹红注射液治疗,对照组25例采用常规药物治疗。观察2组患者治疗前后临床症状、体征、Sa(O2)及血气分析情况。结果联合组患者临床症状、体征的改善及血气分析好转较对照组更迅速而显著。结论无创双水平气道正压通气联合丹红注射液治疗肺心病合并睡眠呼吸暂停快速有效。     

细胞外信号调节激酶抑制剂对间歇低氧早期大鼠神经元凋亡及P53表达的影响

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对间歇低氧早期大鼠海马CA1区神经元凋亡及凋亡相关蛋白P53表达的影响。方法选择雄性Wistar大鼠135只,采用随机数字法分为对照组、间歇低氧组、U0126组,每组45只,每组又分为1、3、7、10、14d共5个时间点,每个时间点9只。各组大鼠采用免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法检测海马CA1区ERK1/2、P53表达;TUNEL法检测海马CA1区神经细胞凋亡情况。结果与间歇低氧组比较,U0126组海马CA1区神经细胞1、3、7、10、14dERK1/2蛋白和P53蛋白表达明显降低(P0.05)。与对照组比较,间歇低氧组和U0126组海马CA1区3、7、10、14d神经细胞凋亡指数明显升高(P0.05)。与间歇低氧组比较,U0126组海马CA1区3、7、10、14d神经细胞凋亡指数明显降低(0.100±0.021 vs 0.133±0.015,0.160±0.017 vs 0.253±0.019,0.239±0.027 vs 0.351±0.024,0.332±0.033 vs 0.500±0.048,P0.05)。结论 ERK抑制剂U0126通过阻断ERK信号通路减少间歇低氧早期神经细胞的凋亡,可能与其降低P53表达有关。