体外培养后深低温保存兔颈总动脉结构和力学性能

①目的　观察深低温保存后兔颈总动脉内皮细胞存在状态、平滑肌细胞存活与再生能力;观察并分析深低温保存后、体外培养后动脉血管壁的结构变化、血管力学性能变化。②方法　获取兔子的颈总动脉并用含有1.5 mol/L 1,2 丙二醇(PROH)的低温保护剂深低温保存,复温时采用液氮中预冷的冰袋缓慢复温。以新鲜动脉作为对照。体外培养新鲜和冷冻复温后的动脉的平滑肌细胞(SMCs);同时将冷冻复温后的血管组织在体外培养6、12和24 h,以观察血管内皮细胞和SMCs的变化,以及血管壁的完整性(弹力膜或纤维的完整性)和这些血管的力学特性(弹性模量和断裂压力)的变化。③结果　冷冻复温后血管SMCs在体外培养开始生长增殖所需的时间(24~36 h)几乎与新鲜血管相似,生长的速度也相似。冷冻复温后,血管内壁存留有少量的内皮细胞,平滑肌和血管壁结构没有明显变化。但是,血管力学性能显著降低(F=5.325~97.458,q=2.32~12.38,P<0.05、0.01)。冷冻复温后的血管作为完整的组织体外培养后,所有的内皮细胞脱落,部分SMCs出现变性和坏死;弹力纤维和胶原出现不同程度的断裂,力学性能进一步降低(q=2.12~8.76,P<0.05、0.01)。④结论　本研究中应用的方法对于保护血管的SMCs是有效的,但是对于血管内皮细胞效果不好;冷冻复温过程和复温后体外培养     

卵母细胞深低温保存的策略分析

背景：卵母细胞具有特殊而复杂的低温生物学性质,致使卵母细胞在深低温保存中易受到多因素的损伤而影响复温后的存活率、受精率和受精后发育潜能。 目的：综述卵母细胞深低温保存技术的研究进展,阐明存在的技术缺陷以及解决问题的思路与研究路线。 方法：以“卵母细胞,深低温保存/慢速冷冻,玻璃化”为中文捡索词,以“oocyte, cryopreservation/slow freezing, vitrification”为英文检索词,在中国知网(CNKI)期刊全文数据库和PubMed数据库检索2004 年1月至2014年10月有关卵母细胞深低温保存文献,排除陈旧性、重复性研究,最终纳入41篇文献进行综述。 结果与结论：慢速冷冻、玻璃化方法深低温保存卵母细胞得到较好的临床应用,但复温存活率、受精能力、发育能力损伤等仍困扰医生们。卵母细胞深低温保存技术的进一步完善或突破在于对深低温保存技术环节的细化、卵母细胞低温生物学特性的研究以及相关技术的创新,如深低温保护剂选择、冷冻载体的改进、卵母细胞时相选择、卵母细胞体外成熟技术、卵巢组织保存与移植等。     

甘油和二甲基亚砜对人精子冻贮存活率影响的研究

本文通过19项实验对甘油、二甲基亚砜单独或配伍、以及不同的使用方法对人精子冻贮存活率的影响做了比较,寻找二者的最低用量和最佳使用方法。结果表明,用二甲基亚砜冻贮复温后的精子存活率较用甘油复合液低26.9～32%(P<0.01)。低浓度甘油与4～20%二甲基亚砜配伍,精子存活率低于14%甘油复合液。     

冷冻干燥法对人精子DNA的影响

目的探讨冷冻干燥法用于人类精子保存的安全性。方法取健康志愿者合格精液40份，平均分为4组，其中3组分别加入不同的冻干保护剂（ETBS；ETBS＋海藻糖：ETBS＋海藻糖＋蛋黄）后给予冷冻干燥处理，在4℃冰箱中保存3周；1组作为新鲜精液对照组。对4组标本分别以原位缺口末端标记（TUNEL）法和彗星试验进行DNA断裂精子百分率检测。结果ETBS、ETBS＋海藻糖、ETBS＋海藻糖＋蛋黄组和新鲜精液组DNA断裂精子百分率以TUNEL法检测，分别为（6．39±1．46）％、（5．75±1．29）％、（5．20±1．38）％、（4．94±1．86）％；以彗星试验检测，分别为（6．48±1．58）％、（5．83±1．48）％、（5．28±1．42）％、（5．12±1．65）％。冷冻干燥保存后的各组与新鲜精液相比较，DNA断裂精子百分率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论以ETBS或ETBS加海藻糖、蛋黄为保护剂的冷冻干燥法对人精子DNA无明显损伤，可有效地保护人精子的DNA。     

深低温保存自体颅骨瓣修补颅骨缺损

１９９２年９月至１９９７年９月，我们采用深低温保存自体颅骨瓣修补颅骨缺损，效果满意。资料与方法：本组３６例，男２６例，女１０例；年龄８～５３岁。均为颅脑损伤后行颅骨减压患者。骨瓣１０ｃｍ×８ｃｍ～６ｃｍ×５ｃｍ。骨瓣保存方法：术中将骨瓣自骨膜下剥离，...     

卵巢深低温保存的现状及应用前景

卵巢是女性的重要生殖器官和性激素分泌腺体 ,具有繁衍后代和维持女性性征的双重作用。许多女性病人 ,由于疾病而接受化疗、放疗或外科手术治疗 ,面临失去卵巢或丧失卵巢功能的痛苦 ,不仅不能生育 ,还会出现由此而引起的绝经和性激素分泌障碍造成的各种并发症[1 ] 。对于这些病人来说 ,胚胎的深低温保存是唯一选择 ,但存在许多实际困难和社会伦理问题 ,限制胚胎的冷冻保存技术的应用和开展 ;而卵子的深低温保存成功率很低 ,不能作为一项可行的治疗选择应用于临床 ,其成功率低于胚胎保存 ,总体看来临床应用价值不大[2～4] 。目前动物卵巢组织…     

青少年精索静脉曲张诊断评估与治疗干预新进展

青少年精索静脉曲张(varicocele,VC)发病率不断增高,对患儿身体发育和生殖健康带来显著影响,已引起医学界广泛关注。VC的发病原因除了已知的解剖因素外,还包括胡桃夹现象(nutcracker phenomenon,NCP)、遗传因素等,对青少年VC的临床诊断和评估至关重要。精液检查虽然是对VC疾病最准确的评估措施,但在青少年患儿中往往无法获取精液样本,除此之外,监测双侧睾丸体积发育差异、彩色多普勒血流成像、内分泌检查等方法也是很有意义的评估依据和随访措施。青少年VC的治疗方案主要包括观察随访和外科干预,争论的焦点集中在手术指征及对手术方案的选择上。虽然目前仍无充足证据证明在传统开放手术、腹腔镜手术和显微镜精索静脉结扎术中哪种是最佳的手术方式,但是术中保留淋巴管可以显著减少手术并发症,特别是显微外科技术可以清晰显示精索内动脉、静脉及淋巴管等结构,在青少年VC手术治疗方面有良好的应用前景,但其技术优势仍需更多的循证医学证据。     

卵母细胞浆内单精子显微注射治疗男性不育的效果

①目的 探讨卵母细胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术治疗因严重少、弱精及阻塞性无精子症引起的男性不育的效果。②方法 对28对不育夫妻中的女方经控制性超促排卯技术获得卵子．男方少、弱精子症者采用梯度密度离心法分离精子,阻塞性无精子症者采用附睾或者睾丸穿刺获得精子,选择成熟卵子行ICSI。胚胎发育至4～8个细胞时移植。③结果 32个治疗周期中,获卵361个．其中成熟卯306个,ICSI后256个受精．受精率为83．7％。卵裂233个,卵裂率91％。临床妊娠11例,临床妊娠率34．4％。④结论 ICSI是治疗男性重症少、弱精子症引起的不育症的有效方法,     

血栓调节蛋白在肾脏肿瘤组织中的表达及临床意义

目的研究血栓调节蛋白（TM）在肾盂移行细胞癌及肾细胞癌中的表达及临床意义。方法选择40例不同分期、不同分级的肾盂移行细胞癌及20例不同分期、不同分级的肾细胞痛标本，应用免疫组织化学SP法研究TM的表达。结果40例肾盂移行细胞癌，TM表达者37例（92．5％），20例肾细胞癌，TM表达1例（5％），其两组表达率明显不同（P〈0．01）。肾盂移行细胞癌组织TM表达阳性细胞百分数随病理分级、临床分期的上升而下降（P〈0．01或P〈0．05）。另外TM表达阴性者再发膀胱癌发生率为66．7％，TM表达细胞百分数小于41．7％的患者中再发膀胱癌发生率为62．5％，TM表达细胞百分数大于41．7％的患者中再发膀胱癌发生率为3．4％，前两者与后者相比，其再发膀胱癌发生率明显升高（P〈0．01）。结论TM表达量与肾盂移行细胞癌的恶性程度、病程情况等生物学行为有关。TM表达阴性及TM表达阳性细胞百分数小于41．7％的肾盂移行细胞癌再发膀胱癌可能性大，应对此类肾盂移行细胞癌患者术后按膀胱肿瘤对待。TM可以作为一种瘤标来鉴别诊断肾盂移行细胞癌与肾细胞癌。