谷氨酰胺下调大鼠肝细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的 利用原代培养的大鼠肝细胞,观察谷氨酰胺(Gln)在体外对白细胞介素-1β(IL-1β)刺激下一氧化氮合酶(iNOS)过度表达的影响.方法 原位胶原酶灌注法获取原代大鼠肝细胞,分别用生理盐水、IL-1β(1 nmol/L)以及IL-1β(1 nmol/L)联合不同浓度的Gln(2、5、10 mmol/L)刺激24 h,留取细胞和堵养液,采用生化法测定培养液一氧化氮(NO)的水平,采用实时定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法及蛋白质印迹法检测肝细胞内iNOS信使RNA和蛋白质水平,采用电泳迁移率转变试验检测肝细胞核内核因子κB(NF-κB)的活性.结果 IL-1β刺激后培养液NO的平均浓度为72.7 μmol/L明显高于生理盐水组41.7 μmol/L,肝细胞iNOS蛋白和mRNA水平分别增加了35%和90%,同时给予Gln能够抑制iNOS的过度活化减少NO的产生,并且这种抑制作用随着Gln浓度的增加而增强;IL-1β刺激后肝细胞核内NF-κB的结合活性增强约50%,Gln对NF-κB的活化没有抑制作用,在5、10 mmol/L浓度时反而对NF-κB有进一步的激活.结论 谷氨酰胺能够下调肝细胞在炎症应激诱导下iNOS基因的过度表达,减少NO的产生,这一作用不是通过NF-κB信号通路实现的.     

早期肠内营养添加谷氨酰胺对重症急性胰腺炎炎症反应和免疫功能的影响

目的: 观察EEN中添加Gln对重症急性胰腺炎(SAP)炎症反应和免疫功能的影响. 方法: 将60例病人随机分为三组,常规EN组在入院第7～10天行EN;EEN组在第2～4天行EN;Gln强化组在EEN液中添加Gln 0.6 g/(kg·d).进行APACHEⅡ评分,并检测病人入院时、入院后第2、5、7、10、14和30天的CRP、IL-6、Gln浓度和单核细胞表面人白细胞抗原(HLA-DR);记录EN前后病人每天的膀胱压和肠鸣音.当膀胱压﹥25 cmH2O、肠鸣音消失时,停用EN. 结果: ①常规EN组、EEN组和Gln组病人各完成临床观察17例、16例和16例.常规EN组病人EN开始时间晚于EEN组和Gln组(P<0.05),但在耐受性、达全量时间、持续时间、EN支持途径和并发症等比较中,三组病人无显著性差异(P>0.05).②在病程早期,常规EN组病人APACHEⅡ评分、CRP、IL-6均高于EEN组和Gln组,HLA-DR和Gln浓度较低(P<0.05),Gln组IL-6较EEN组更低,而HLA-DR和Gln浓度更高(P<0.05);③未完成临床观察者EN前的APACHEⅡ评分、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率、膀胱压均明显高于完成临床观察者(P<0.05). 结论:SAP病人早期在EN液中添加Gln,对升高血Gln浓度、降低早期炎症反应、改善免疫功能的作用更加明显.     

沧州市农村居民慢性肾脏病流行病学调查

目的探讨沧州市农村慢性肾脏病(CKD)的患病率及危险因素。方法对沧州市青县和沧县8个自然村的2863例20岁以上的常住居民进行问卷调查、肾脏损伤指标及相关危险因素检测。结果在2754例资料完整的调查对象中,血尿和(或)白细胞尿的患病率为8.86%,蛋白尿的患病率为1.56%,肾功能下降的患病率为2.65%。该人群中CKD的患病率为9.84%,知晓率为8.3%,治疗率为8.31%。多因素Logistic回归分析显示,高血压、糖尿病和年龄与蛋白尿的发生独立相关,肾功能下降还与高胆固醇、高三酰甘油血症和体质量指数相关。结论沧州市农村CKD的患病率较高,且呈逐年增高趋势,但未引起人们的注意,知晓率和治疗率较西方国家低。CKD相关危险因素包括糖尿病、血压及年龄。     

谷氨酰胺抑制人外周血单个核细胞细胞因子表达的机制

目的 探讨谷氨酰胺抑制人外周血单个核细胞(PBMCs)细胞因子表达的分子机制.方法 Ficoll密度梯度离心法提取健康志愿者新鲜PBMCs,将分离得到的细胞分为两部分.第一部分细胞分为六部分,分别用不同浓度的Gln(0、8、15 mmol/L)预处理0.5 h及2.0 h后,再用10 g/L内毒素刺激4.0 h,留取细胞及上清.第二部分细胞分为A、B、C三组,将热休克蛋白(HSP)阻断剂Quercetin(200 μmol/L)加入A组及B组中,作用0.5 h;再将谷氨酰胺8 mmol/L加入A组和C组中;1.0 h后在三组中均加入10 g/L内毒素刺激4.0 h,留取细胞及上清.酶联免疫吸附(ELISA)测定上清中PBMCs肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的表达,免疫印迹(Western Blot)技术检测细胞内HSP70的表达情况.对指标检测结果进行统计学分析.结果 8 mmol/L及15 mmol/L谷氨酰胺预处理0.5 h后能够明显增加HSP70的表达(P<0.05),8 mmol/L谷氨酰胺预处理2.0 h后能明显增加HSP70的表达(P<0.05).同时TNF-α和IL-10表达受抑(P<0.05);使用HSP70阻断剂Quercetin后,HSP70表达量明显下降,同时TNF-α和IL-10表达增加(P<0.05).结论 谷氨酰胺抑制内毒素刺激下PBMCs细胞因子的表达与HSP70介导有关.     

IL-1β诱导大鼠肝细胞NO产生增多及线粒体膜电位降低

目的: 观察体外培养的大鼠肝细胞在促炎细胞因子IL-1β刺激下一氧化氮(NO)的产生和线粒体膜电位的变化,探讨两者之间的关系.方法: 原位胶原酶灌注法分离和培养原代大鼠肝细胞后,分别用生理盐水、脂多糖(LPS)(10 mg·L-1)、IL-1β(1 nmol·L-1)及LPS(10 mg·L-1)联合IL-1β(1 nmol·L-1)刺激肝细胞,并分别在刺激后6、12、24、48 h留取细胞和上清液,采用分光光度法测定上清液NO的含量,采用荧光探针JC-1结合流式细胞仪检测肝细胞线粒体膜电位的变化.结果: IL-1β刺激后肝细胞产生NO增加而线粒体膜电位降低,两者均呈时间依赖性,并在24 h达峰值;LPS对肝细胞NO的合成没有直接诱导作用,与IL-1β联合刺激也没有协同作用.结论: IL-1β诱导肝细胞过度产生NO从而抑制线粒体呼吸功能可能是炎症应激下肝损伤的潜在机制之一.     

阿霉素肾病大鼠肾小球nephrin、podocin蛋白的表达

2003年10月我们利用Sprague Dawley大鼠单次尾静脉注射盐酸阿霉素(ADR)诱导微小病变肾病模型，应用免疫蛋白印迹技术，检测ADR肾病大鼠肾小球nephrin及podocin蛋白进行了检测，以了解其表达特征。     

药物反应致溶血性贫血1例

1　病情过程患者男性 ,6 9岁 ,主因“右侧肢体肌肉僵痛 10余天”于 2 0 0 1年 10月 16日以“中风后遗症—脑梗塞后遗症”入院。患者既往有磺胺类药过敏 (皮肤红肿史 )。入院后予葛根素 6 0 0ｍｇ、脑复康 2 5 0ｍｌＱ .ｄ ,口服抵克力得 0 .2 5 ,2次 /ｄ。患者于入院第 8天 (2 3日 )开始周身不适 ,中午时感恶寒 ,自觉为感冒 ,下午 2ｐｍ测Ｔ :38.9℃ ,急查ＷＢＣ14 .1× 10 9/Ｌ ,考虑为上呼吸道感染 ,予铃兰欣静点。次日继前治疗 ,11Ａｍ时自觉胸闷 ,周身不适 ,予复方丹参滴丸 5粒 (含 ) ,11:30Ａｍ时患者烦躁 ,呻吟 ,周身不适 ,寒战 ,口唇…     

肾移植术后巨细胞病毒感染诊断、预防与治疗

目的:探讨肾移植术后巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染的诊断、治疗与预防方法。方法:回顾性分析28例肾移植患者临床资料,检测手术前、后血中CMV抗原和CMV抗体及肾脏穿刺标本组织中CMV抗原的表达,并采用静脉注射更昔洛韦进行预防与治疗。结果:11例发生CMV感染,均为无临床症状的CMV感染,均治愈。结论:积极预防、早期治疗肾移植术后CMV感染至关重要,CMV抗原检测和免疫组织化学检测共同应用能够对CMV感染作出早期诊断,更昔洛韦能有效治疗CMV感染。     

指肛检查致Ⅱ°Ⅱ型房室传导阻滞1例

病例报告男,56岁。因排尿不畅2年,加重2天来诊。外院疑为“前列腺肥大”。无高血压、冠心病及其它病史。近期曾在健康体检时作心电图、胸片、血脂、血糖均正常。查体:血压20/12千帕,心肺(-)。行指肛检查以证实前列腺肥大。指套进入20秒钟患者突觉心悸、乏力、头晕、恶心、大汗,遂停     

急性胰腺炎合并胰性脑病30例临床分析

胰性脑病(pancreatic encephalopathy, PE)是急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)时出现的以精神症状和神经系统体征为主要临床表现的并发症,死亡率高(57%)[1],预后差.我们回顾分析了从1997年1月至2003年12月南京军区总医院普通外科研究所SICU收治的448例AP的临床资料,其中30例AP患者并发PE.现将结果报告如下,并对其治疗体会进行探讨.