IV型胶原酶在不同转移潜能的前列腺癌细胞系中的表达及活性分析

目的:探讨前列腺癌细胞转移潜能与IV型胶原酶基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的关系。方法:应用免疫组织化学SABC法,研究IV型胶原酶在不同转移潜能的前列腺癌细胞株LNCaP、C4-2B中表达变化。同时采用明胶酶谱法对这2种前列腺癌细胞系分泌的IV型胶原酶活性进行分析。结果:①免疫组织化学染色显示,LNCaP、C4-2B细胞中均有MMP-2、MMP-9表达,主要表达于细胞质中,C4-2B细胞表达明显强于LNCaP(P<0.01)。②人前列腺癌细胞LNCaP的条件培养液中仅能检测到极低的MMP-2和MMP-9活性,酶谱条带的积分A值分别为0.89±0.02和0.86±0.01,主要以酶原形式存在,而C4-2B细胞则表现较强的MMP-2、MMP-9活性,积分A值分别为96.32±4.36和33.89±1.84,其分泌的MMP-2则以活性形式为主,其分泌量显著高于LNCaP细胞(P<0.01)。结论:前列腺癌细胞中IV型胶原酶的表达和分泌,有助于癌细胞的侵袭和转移;前列腺癌细胞的侵袭转移潜能与其产生IV型胶原酶的能力密切相关。     

GLI-1参与表皮生长因子介导的前列腺癌ARCaP_E细胞体外侵袭活性强化的实验研究

目的:探讨Hedgehog(HH)信号通路效应蛋白GLI-1在表皮生长因子(EGF)介导的人前列腺癌AR-CaPE细胞系体外侵袭活性增强中的作用。方法:以人前列腺癌ARCaP细胞系作为研究模型,免疫荧光技术鉴定ARCaPE内EGF受体(EGFR)和GLI-1的表达情况;100 ng/ml EGF体外作用于ARCaPE后,观察细胞的形态及体外侵袭能力的变化,采用Western印迹检测细胞内ERK信号通路成分和GLI-1蛋白的表达变化情况;Transwell侵袭实验检测EGF(100 ng/ml)与GLI-1拮抗剂GANT61(10μmol/L)单独或联合作用对ARCaPE细胞体外侵袭能力的影响。结果:ARCaPE细胞同时表达EGFR与GLI-1蛋白;EGF诱导上皮样外观的ARCaPE细胞向间质样外观的AR-CaPM转化,增强ARCaPE细胞的体外侵袭能力并显著上调细胞内p-ERK和GLI-1蛋白的表达水平(P<0.05);GANT61明显抑制ARCaPE细胞的体外侵袭能力且减弱EGF对细胞侵袭能力的增强效应(P<0.05)。结论:HH信号通路和EGF/ERK信号通路之间存在一定的相互作用,GLI-1可能在EGF介导的人前列腺癌ARCaPE细胞体外侵袭活性增强过程中发挥着重要作用。     

AsRed2示踪前列腺癌肺转移模型的建立

目的:使用携带红色荧光蛋白(AsRed2)的前列腺癌PC-3细胞(PR7细胞)建立可用活体荧光成像技术监测的前列腺癌肺转移模型。方法:分别采用MTT及Transwell实验比较前列腺癌PC-3与PR7细胞体外增殖、迁移及侵袭能力;将20只BALB/c裸鼠随机平均分为4组,分别尾静脉注射不同浓度PR7细胞悬液200μl,A组:1×107/ml,B组:2.5×107/ml,C组:5×107/ml,D组:2.5×107/ml,并于1周后重复注射2.5×107/ml细胞悬液200μl。第2、4、6、8周分别用活体荧光成像技术检测各组肺转移灶形成情况。结果:前列腺癌PC-3细胞与PR7细胞体外增殖、迁移、侵袭能力均无明显差异(P>0.05);第4周D组40%裸鼠用活体荧光成像检测到肺转移灶;第8周,A组20%、B组60%、C组100%、D组100%裸鼠可检测到肺转移灶;通过病理检查证实肺转移灶形成。结论:通过尾静脉注射携带红色荧光蛋白的前列腺癌PR7细胞可成功建立用活体荧光成像技术监测的前列腺癌肺转移模型。     

益肾排石中药促进体外冲击波碎石患者排石的机制探讨

目的探讨自拟益肾排石方剂对体外冲击波碎石肾结石患者的辅助作用及可能机制。方法将确诊的60例肾结石患者按就诊顺序分为2组:2组均行体外冲击波碎石,中药组在冲击前3 d至冲击后3 d口服益肾排石方剂。观察2组患者碎石效果及腰痛、肉眼血尿变化。结果中药组碎石满意率显著高于对照组(P<0.05),碎石后3 d、7 d腰痛缓解率显著高于对照组(P均<0.05),肉眼血尿持续次数显著少于对照组(P<0.05)。结论益肾排石方剂可促进体外冲击波碎石肾结石患者结石排出。     

腰椎间盘突出症病人的辩证施护

腰椎间盘突出症患常有腰部受伤的病史,根据发病原因．我科于1990年1月开始通过对腰椎间盘突出病人进行辨证施护．收到良好效果,具体措施如下。     

针对老年高血压病的特点实施康复护理

现代社会的人均寿命稳步上升．人口老龄化日趋明显．老年人群的绝对数或构成比均明显。老年人问题已成为各国重大的社会问题,鉴于生老病死乃是自然规律,老年人高血压病的发生率也随社会老龄化而增长．老年人对此顾虑尤多．因此如何针对老年高血压病的特点实施康复护理,减少老年高血压病的致残率、病死率具有重要意义。     

肾结石患者尿NAG、γ-GT和β_2-MG水平升高的意义及机制探讨

目的:探讨肾结石患者尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶(NAG)、γ-谷氨酰胺转移酶(γ-GT)和β2-微球蛋白(β2-MG)升高的意义及机制。方法:选择40例肾结石患者(志愿者)和30例健康无结石志愿者,用生化分光光度法测定尿NAG、γ-GT和Cr,以及血浆超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO),用放免法测定尿β2-MG、血浆内皮素(ET-1)和血清肿瘤坏死因子(TNFα)。结果:结石组尿NAG、γ-GT和β2-MG显著高于健康对照组(P<0.05)。结石组血中ET-1、TNF-α和MDA值显著升高,而血SOD、NO值显著降低,两组之间有显著性差异(P<0.05)。结论:肾结石形成可能与肾小管功能损伤相关,氧自由基、局部血流动力学改变和炎症反应在在肾小管损伤中发挥了作用。     

Wnt/β-catenin信号通路在多种人前列腺癌细胞系中的表达研究及意义

目的:检测多种不同上皮细胞间质转化(EMT)特性的人前列腺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白的表达,对细胞中Wnt/β-catenin信号通路的功能状态进行鉴定,分析其在前列腺癌EMT现象中可能的作用。方法:用Western印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2、C4-2B和ARCaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3、DU145细胞中β-连环素(β-catenin),糖原合成酶3β(t-GSK3β),磷酸化糖原合成酶3β(p-GSK3β)的表达差异情况。结果:β-catenin和p-GSK3β在LNCaP、C4、C4-2、C4-2B、IF11、IA8中表达较高,在PC-3中表达较低,在DU145中表达缺失,t-GSK3β在上述所有细胞中表达无明显差异。p-GSK3β/t-GSK3β比值在LNCaP、C4、C4-2、C4-2B、IF11、IA8中较高,在PC-3和DU145中较低。结论:8种不同EMT特性的前列腺癌细胞系中,Wnt/β-catenin信号通路的功能状态存在差异。     

酪酪肽对胰腺癌Miapaca-2细胞凋亡的影响

目的 观察酪酪肽(PYY)对体外培养的胰腺癌Miapaca-2细胞凋亡的影响。方法 不同浓度(0.01、0.005、0.0025、0.00125 mmol/L) PYY分别作用于体外常规培养的Miapaca-2细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期;RT-PCR法检测Survivin mRNA,Western blotting法检测Survivin、Caspase-3蛋白的表达。结果 PYY处理48 h后细胞凋亡率明显升高,并呈浓度依赖性;G₀/G₁期细胞数明显增多,S、G₂/M期细胞数明显减少,G₁期前出现亚二倍体凋亡峰;PYY明显抑制Survivin蛋白和mRNA表达(P<0.01),上调Caspase-3蛋白表达(P<0.01)。结论 PYY能诱导胰腺癌Miapaca-2细胞凋亡,参与细胞周期调控,其机制可能与抑制Survivin蛋白和mRNA表达、上调Caspase-3蛋白表达有关。     

Survivin分子信标诊断膀胱肿瘤的临床应用研究

目的:探讨分子信标检测尿脱落细胞Survivn mRNA的可行性,寻找一种能够早期诊断膀胱肿瘤的方法。方法:分子信标检测膀胱肿瘤5637、J82细胞Survivin mRNA的表达,并通过Western bolt方法验证,并对35例膀胱移行细胞癌患者和35名正常健康成人行分子信标检测尿脱落细胞,Western bolt检测组织中的Survivin含量,同时行尿脱落细胞学检查。结果:Survivin分子信标检测肿瘤细胞内的Survivin表达且具有高特异性。以随机100个细胞中60个以上的细胞为阳性做为阳性标准,确定MB-cy3的阳性率为80%(28/35),特异性为77.1%(27/35);Western bolt检测的阳性率为71.4%(25/35)。两种实验方法对细胞和蛋白质中Survivin的检测结果具有一致性。尿脱落细胞学的敏感性为28.6%(10/35),特异性为100.00%(35/35)。结论:使用分子信标检测尿液脱落细胞中Survivin mRNA具有可行性,分子信标有可能成为在膀胱肿瘤的早期临床诊断和术后随访的有效工具。