乌司他丁对大鼠骨骼肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨乌司他丁对大鼠骨骼肌缺血-再灌注损伤的保护作用.方法 24只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组(每组8只):对照组(C组)、缺血.再灌注损伤组(I/R组)、乌司他丁处理组(U组).C组仅麻醉肢体没有缺血操作;I/R组于再灌注前颈外静脉注入生理盐水0.5 ml;U组于再灌注前同法给乌司他丁0.5 ml(5×104 U/kg).以橡皮带环绕结扎大鼠左后肢根部至趾掌无血流信号达4 h后放开橡皮带,再灌注4 h建立大鼠骨骼肌缺血.再灌注损伤模型.再灌注4 h各组处死动物采集标本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定骨骼肌组织TNF-α mRNA的表达;酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血浆TNF-α水平;比色法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)和组织过氧化物酶(MPO)含量,测定湿质量/干质量均(W/D)及光镜、电镜观察骨骼肌组织结构的变化.应用SPSS 10.0统计软件,用单因素方差分析.结果 骨骼肌组织TNF-α mRNA的表达在I/R组明显高于C组(P＜0.05),而U组则低于I/R组(P＜0.01);血浆TNF-α浓度I/R组明显高于C组(P＜0.01),而U组则低于I/R组(P＜0.05);血浆LDH、MDA、CK和组织MDA、MPO水平以及W/D比值I/R组高于C组(P＜0.05),U组则低于L/R组(P＜0.05);骨骼肌组织形态学和超微结构的损伤U组也较I/R组减轻.结论 乌司他丁通过抑制细胞因子的生成、抑制氧自由基代谢产物MDA的产生和减少MPO的活性而对骨骼肌缺血-再灌注起保护作用.     

体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的研究

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外培养方法和向血管内皮细胞分化的能力.方法:利用淋巴细胞分离液分离出MSCs,体外扩增,流式细胞仪检测MSCs表面抗原表达,以含VEGF、bFGF的诱导分化培养液定向诱导传代使细胞向血管内皮细胞分化,流式细胞仪进行内皮细胞特异性标志物鉴定,测定内皮细胞NO的释放量,电镜观测W-P小体.结果:MSCs在体外传代扩增后流式细胞仪检测结果显示CD29表达阳性,CD34、CD45为阴性,分化后的细胞具有内皮细胞的形态学特征并具特异性W-P小体,可表达CD34,而不表达CD45,能释放NO.结论:骨髓间充质干细胞可在体外诱导向内皮细胞方向分化.     

ROC曲线在临床医学诊断实验中的应用

随着先进医学技术的迅猛发展,各种新诊断试验层出不穷,但并不是每一种新诊断试验肯定比旧试验好.如果医学工作者,特别是临床医生,能够掌握一些评价与解释诊断试验的有关知识,及时取舍或灵活运用新的诊断试验,可以更好地为患者服务.为了进一步推广receiver operating characteristic(ROC)曲线分析方法的应用,本文首先介绍诊断实验的相关慨念,ROC曲线分析的定义、原理及分类,ROC曲线曲线下面积(AUC)及其最佳工作点的确定,然后用SPSS软件具体说明其应用.     

细胞因子在骨髓间充质干细胞修复小鼠急性肾衰竭中的作用

目的： 观察细胞因子在骨髓间充质干细胞（MSC）修复小鼠急性肾衰竭（ARF）中的作用。方法：用顺铂皮下注射建立ARF小鼠模型。小鼠随机分为正常对照组（control组）、急性肾衰竭组（ARF组）和骨髓间充质干细胞组（MSC组）。MSC组在建立ARF模型后24 h经尾静脉输注小鼠MSC悬液。建模后第1、4、7、14、28 d分批处死各组小鼠。测定血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）,观察肾组织病理变化,用RT-PCR和免疫组化方法检测肝细胞生长因子（HGF）、骨形态形成蛋白7（BMP-7）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）mRNA和蛋白的表达。结果：顺铂注射4 d后,MSC组BUN、Scr值比ARF组明显降低（P＜0.01）,在第7和14 d,仍可见MSC组的BUN、 Scr水平低于ARF组（P＜0.01,P＜0.05）。MSC组小鼠肾小管损伤程度明显轻于ARF组。顺铂注射7 d后,MSC组肾组织中BMP-7、HGF、IL-10 mRNA和蛋白的表达均明显高于ARF组,而TNF-α mRNA和蛋白的表达则明显低于ARF组。结论：MSC可改善ARF小鼠肾功能,其机制可能与MSC促进肾脏局部生长因子分泌、减轻炎症反应有关。     

糖尿病肥胖及非肥胖患者影响糖化血红蛋白的因素不同

目的 研究糖尿病肥胖及非肥胖患者糖化血红蛋白(HbA1c)与糖脂代谢指标的相关性.方法 收集121例2型糖尿病研究对象,以体质量指数(BMI)≥25 kg/m2为肥胖症标准,分为糖尿病合并肥胖症组(DM-OB)57例,糖尿病非肥胖症组(DM-NOB)64例,比较DM-OB组及DM-NOB组年龄、BMI、HbA1c、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(PPG)、餐后血糖波动(PPGE)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、1/高密度脂蛋白胆固醇(1/HDL-C)、血清高敏C反应蛋白(hsCRP)差别;相关分析及多因素逐步回归分析HbA1c与以上指标的相关性.结果 DM-OB组HOMA-IR、BMI、DBP、TC、hsCRP、HbA1c、LDL-C较DM-NOB组增高.在DM-OB组,Pearson相关分析显示,HbA1c与BMI、FBG、FPG、HOMA2IR、hs-CRP正相关(P均<0.05);偏相关分析显示,控制FBG、PPG、BMI后,HbA1c仍与HOMA2IR、hs-CRP正相关(P均<0.05);多因素逐步回归分析HbA1c与FPG、HOMA2IR、hs-CRP密切相关(P均<0.01).在DM-NOB组,Pearson相关分析显示,HbA1c与PPG、PPGE呈正相关(P均<0.05);偏相关分析显示,在控制PPEG后,HbA1c仍与PPG正相关(P<0.05);多因素逐步回归分析HbA1c与PPG密切相关(P<0.01).结论 2型糖尿病,胰岛素抵抗、亚临床炎症、高空腹血糖是影响肥胖患者HbA1c水平的主要因素;餐后血糖是影响非肥胖患者HbA1c水平的主要因素,提示应当研究不同的治疗措施治疗糖尿病合并肥胖与不合并肥胖的病人.     

糖尿病肥胖及非肥胖患者影响糖化血红蛋白的因素不同

目的研究糖尿病肥胖及非肥胖患者糖化血红蛋白(HbAlc)与糖脂代谢指标的相关性。方法收集121例2型糖尿病研究对象,以体质量指数(BMI)≥25 kg/m~2为肥胖症标准,分为糖尿病合并肥胖症组(DM-OB)57例,糖尿病非肥胖症组(DM-NOB)64例,比较 DM-OB 组及 DM-NOB 组年龄、BMI、HbAlc、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h 血糖(PPG)、餐后血糖波动(PPGE)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、1/高密度脂蛋白胆固醇(1/HDL-C)、血清高敏 C 反应蛋白(hsCRP)差别;相关分析及多因素逐步回归分析 HbAlc 与以上指标的相关性。结果 DM-OB 组 HOMA-IR、BMI、DBP、TC、hsCRP、HbAlc、LDL-C 较 DM-NOB 组增高。在 DM-OB 组,Pearson 相关分析显示,HbAlc 与 BMI、FBG、FPG、HOMA2IR、hs-CRP 正相关(P 均<0.05);偏相关分析显示,控制 FBG、PPG、BMI 后,HbAlc 仍与 HO-...     

腰围是代谢综合征最主要的危险成分

目的 在代谢综合征(MS)多种成分中,试图发现其中最主要的成分,验证腰围预测中华医学会糖尿病学分会(CDS)建议的MS标准的临床价值.方法 收集163例研究对象,以CDS建议的MS为标准,MS患者80例,非MS患者83例,比较MS及非MS患者年龄、腰围、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),Logistic回归分析预测腰围对MS的危险性,分别建立男性及女性腰围对MS的ROC曲线评价系统,计算ROC曲线下面积,确定腰围最佳诊断界定值,得出灵敏度及特异度.结果 MS患者的年龄、腰围、BMI、SBP、DBP、FBG、TG、1/HDL-C均大于非MS患者;控制年龄、吸烟、糖尿病家族史、高血压家族史后,Logistic回归分析示腰围是MS最主要危险因素;男性ROC曲线下面积0.92,腰围界定值为89.5 cm时,灵敏度为0.84,特异度为0.93.女性ROC曲线下面积0.93,腰围界定值为80.8 cm时,灵敏度为0.97,特异度为0.81;研究发现,吸烟也是MS的危险成分,现仍吸烟者MS的风险是从未吸烟者的6.88倍,曾吸烟者是从未吸烟者的3.96倍.结论 证实高腰围是MS最主要危险因素,是预测CDS建议MS标准的可靠指标.吸烟也是MS的危险成分.     

体外诱导糖尿病鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞分化的研究

目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外培养方法和向血管内皮样细胞分化的能力.方法 利用密度梯度离心分离和贴壁培养相结合的方法从STZ诱导的糖尿病大鼠骨髓中提纯单个核细胞,体外扩增3代,倒置显微镜观察细胞生长及形态,流式细胞仪检测BMSCs表面抗原表达.取扩增第3代的BMSCs,分为2组,诱导组加入诱导培养剂[含10％胎牛血清、10μg/L血管内皮生长因子(VEGF)、2μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、100 U/ml青霉素、100 mg/L链霉素的M199培养基]中诱导分化,对照组则不加任何细胞因子.2周后行细胞形态学观察,免疫细胞化学法检测VEGF受体(VEGFR)-2表达,流式细胞仪测定CD34表达量,紫外线分光光度法测定一氧化碳(NO)含量,电镜观测胞质WeibelPalade小体.结果 STZ腹腔注射可诱导糖尿病大鼠模型.流式细胞仪显示第3代BMSCs表达表面抗原:CD44和CD90阳性细胞表达率分别为(97.8±0.9)％和(96.8±1.4)％,而CD11 b/c和CD34阳性细胞表达率分别为(13.2±0.6)％和(1.2±0.5)％.诱导组大部分细胞形态变化不明显,呈长梭形、杆状、多角形,诱导组VEGFR-2、CD34阳性表达率分别为(97.1±1.0)％和(65.0±3.9)％,而对照组则为(7.0±1.0)％和(0.9±0.3)％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);诱导组胞外NO含量(94.14±3.25) μmol/L亦明显高于对照组(70.37±2.10) μmol/L(P ＜0.05);电镜两组均未观察到胞质Weibel Palade小体.结论 经密度梯度离心分离和贴壁培养相结合的方法可从骨髓中提纯BMSCs.糖尿病鼠BMSCs可在体外诱导向血管内皮样细胞方向分化,BMSCs有望作为治疗糖尿病下肢缺血性疾病的种子细胞.