多种来源造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

背景：造血干细胞移植是年轻重型再生障碍性贫血患者首选方法,但在中国多数重型再生障碍性贫血患者无合适的供者,单倍体相合或非血缘造血干细胞移植国内外目前还处于探索阶段,联合间充质干细胞移植报道少见。 目的：观察不同干细胞来源造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的疗效。 方法：10例(3~52岁)重型再生障碍性贫血患者,分别接受了亲缘HLA相合(2例),单倍体相合(5例),非血缘(3例)的外周血和/或骨髓造血干细胞移植,其中5例患者同时联合了间充质干细胞共移植。预处理方案主要为环磷酰胺、氟达拉滨和抗人胸腺球蛋白,以霉酚酸酯、环孢素A加短疗程的甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病,单倍体相合移植的患者在此基础上加马利兰和CD25单克隆抗体;同基因的例5患者预处理方案为抗人胸腺球蛋白+甲基泼尼龙。输注间充质干细胞的量为(0.27~1.85)×106/kg。接受和未接受间充质干细胞组的患者回输的造血干细胞有核细胞分别为(7.4~17.38)×108/kg和(6.09~13.68)×108/kg。 结果与结论：除1例单倍体相合患者移植未成功,+36 d死于并发症外,余患者移植后染色体及DNA指纹检测等说明造血干细胞移植完全供者植入。移植后中性粒细胞达到0.5×109 L-1,血小板计数≥20×109 L-1中位时间分别为12 d和13 d;其中造血功能恢复快慢的趋势是同基因移植>外周血或/和骨髓+间充质干细胞移植>单纯外周血或/和骨髓干细胞移植,而亲缘HLA全相合的52岁患者造血恢复最慢。非血缘移植例1、6患者发生了Ⅰ度急性移植物抗宿主病,单倍体相合移植的例2和例10患者发生了Ⅱ度急性移植物抗宿主病后出现了局限性的慢性移植物抗宿主病,余下患者移植后生活质量良好,无慢性移植物抗宿主病;除未接受间充质干细胞的例3患者移植后出现严重感染外,其余患者移植后再未出现严重的感染和出血。结果提示造血干细胞是安全,高效治疗重型再生障碍性贫血的方法,联合应用间充质造血干细胞者患者造血恢复快,移植并发症少。     

一种从骨髓血凝块中分离间充质干细胞的方法

目的 探讨一种从骨髓血凝块中分离培养间充质干细胞的简易方法.方法 采集肝素化骨髓标本7份,部分加入凝血酶以模拟血液凝固过程,并于0、8和16 h分别使用尿激酶或机械处理,分为尿激酶处理组、机械处理组、凝固未处理组及未凝固对照组.各组标本经氯化铵溶解红细胞后,分别进行成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)和MSC传代培养.计每组CFU-F及第0、1和2代MSC数量.流式细胞仪测定细胞表型,组织化学法检测细胞体外成骨和成脂肪能力.结果 尿激酶处理组样本CFU-F数平均为(33.71±23.54),接近于未凝固对照组样本(40.43±21.29)(n=7,P＞0.05),显著高于机械法处理组(13±11.91)(n=7,P＜0.01)和凝固未处理组(3.71±3.89)(n=7,P＜0.01).储存8或16h后的标本,各组CFU-F形成能力下降,而未凝固对照组和尿激酶处理组数量仍显著高于另外两组(P＜0.05).标本储存不同时间进行MSC传代培养,未凝固对照组及尿激酶处理组细胞数量无明显差别,但均显著高于凝固未处理组及机械处理组.各组MSC均表达CD73和CD90,不表达CD31和CD45.经特异诱导后,各组MSC均呈现碱性磷酸酶活性,细胞内出现亲油红O染料的脂肪滴.结论 对于已经凝固的骨髓标本而言,尿激酶预处理是分离培养MSC的良好途径.     

HMGB1分子A-BOX的表达纯化及其促分化功能鉴定的研究

目的克隆人HMGB1 A-box的cDNA,构建高效稳定的大肠杆菌(E.coli)表达菌株并对其诱导表达纯化,同时探讨其对间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)的促分化作用。方法根据优选合成的HMGB1基因序列设计引物,PCR扩增目的基因片段,插入克隆载体pGEM-T并进行序列测定。重组克隆载体经BamHⅠ和XhoⅠ酶切,琼脂糖凝胶电泳分离目的基因,插入含His标签的表达载体pET24a。将构建的质粒转染BL21大肠杆菌,经IPTG诱导后,SDS-PAGE观察表达量。HIS-link层析柱纯化重组人HMGB1 A-box,蛋白印迹鉴定重组蛋白。将重组蛋白加入hBMSC培养体系中培养一周后,碱性磷酸酶染色检测其促MSC成骨分化作用。结果经RT-PCR扩增得到了261 bp的DNA片段,经测序分析,与GenBank中报道的已知序列完全一致,构建了含融合蛋白的重组表达质粒。经诱导后细菌高表达A-box,表达量为总蛋白的45%。经层析柱纯化后,蛋白印迹证实目的蛋白为高纯度的A-box。将A-box加入MSC培养体系中培养后,细胞活性无明显改变,但细胞碱性磷酸酶表达明显增高。结论成功构建了重组人HMGB1 A Box的表达载体,纯化的重组蛋白能有效促进MSC向成骨细胞分化。     

自体造血干细胞移植治疗鼻腔NK/T细胞淋巴瘤患者长期生存二例

 目的　观察自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）治疗结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤的长期疗效。方法　回顾分析2例鼻腔NK／T细胞淋巴瘤患者的临床治疗经过及APBSCT 的效果,复习相关文献。结果　2例患者均经鼻腔肿物病理活组织检查确诊,化疗和局部放疗达到完全缓解（CR）,例1接受单次APBSCT,例2接受双次APBSCT。动员方案分别为CNOP方案和CELD方案,预处理方案为卡铂 +阿糖胞苷 +替尼泊苷+地塞米松,移植后造血恢复迅速。定期随访,2例分别无瘤生存60、36个月。结论　化放疗联合APBSCT方案增加了鼻腔NK／T细胞淋巴瘤患者长期生存的机会。     

40例老年急性髓系白血病诱导化疗的临床分析

目的：探讨联合诱导化疗方案治疗老年急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者的疗效和预后。方法收集我院40例老年AML患者临床资料,根据治疗方案分为联合诱导化疗组和姑息治疗组,分析2组的临床特点、预后和不良反应。结果26例接受诱导化疗患者,完全缓解（complete remission,CR）率为46.1%,部分缓解（partial remission,PR）率为15.4%,总有效（overall response,OR）率为61.5%,1例发生早期死亡（3.8%）;14例接受姑息治疗患者,无一例缓解,2例发生早期死亡（14.2%）。诱导化疗组中位生存时间6.0个月,姑息治疗组中位生存时间2.5个月,1年生存率分别为19.2%及7.0%,2年生存率分别为15.4%及0,诱导化疗组中位生存期高于姑息治疗组（χ2=6.95,P=0.024）。诱导化疗组不良反应主要包括骨髓抑制、肺部感染、出血、胃肠道反应及肝功能损害,经输血及抗感染等对症支持治疗多数可耐受,其中有4例患者死于严重并发症。结论诱导化疗可改善部分老年患者的预后,明显延长生存期,但老年患者对化疗耐受力差,不良反应多,需要对患者实施个体化治疗。     

HLA半相合未去除T细胞骨髓移植治疗白血病的初步观察

目的探索半相合未去除T细胞骨髓移植治疗白血病的可行性.方法15例白血病患者接受HLA2～3个位点不匹配亲缘骨髓移植.用阿糖胞苷、环磷酰胺和γ射线全身照射进行预处理,供者应用G-CSF250μg/d,连用7d后采髓,移植物抗宿主病(GVHD)预防除用环孢菌素A(CsA)和甲氨蝶呤(MTX)外,在移植前第4天～第1天用抗胸腺细胞球蛋白ATG5mg@kg-1@d-1,移植后第7天开始加用霉酚酸酯1.0g/d.结果患者移植后均获得造血重建,中性粒细胞＞0.5×109/L和血小板＞20×109/L的中位时间分别是19d(13～23d)和21d(16～32d).5例(33.3%)发生急性Ⅱ～Ⅳ度GVHD,其中急性Ⅱ度肠道GVH2例,急性Ⅲ度肠道GVHD2例,急性肠道和肝脏Ⅳ度GVHD1例.可评价的9例患者中8例发生慢性GVHHD,无一例发生广泛性慢性GVHD.中位随访时间395d(110～690d),死亡6例,其中死于急性GVHD3例,死于感染2例,复发死亡1例.无病存活9例,其中6例存活在1年以上.结论供者应用G-CSF后采髓,多种免疫抑制剂联合应用的HLA半相合未去除T细胞骨髓移植,在治疗自血病过程中,有效地降低了急性重症GVHD发生,提高了无病生存,对拓宽供髓来源有重要实用价值.     

血管免疫母细胞淋巴腺病样T细胞淋巴瘤1例报告复习

血管免疫母细胞淋巴腺病(angioim-munoblastic lymphadenopathy,AILD)是一种最近报道的具有充分临床病理特征性疾病。20％病例转变为恶性淋巴瘤,其临床表现及生物学特征与AILD相同。国内马明信首次报道2例AILD转变为淋巴瘤。本院于1993年10月5日收治1例AILD转变为经病理及免疫学证实的T细胞淋巴瘤。现报道及讨论如下。     

伴骨髓广泛浸润的眼眶、副鼻窦胚胎型横纹肌肉瘤一例

患者 ,男 ,14岁 ,无明显诱因右眼痛伴视物模糊 ,并发现右眼球突出 1个月余。头颅 ,眼眶 ,副鼻窦ＣＴ、核磁共振检查 ,右眼眶后外下方肌锥外占位 ,累及肌锥内 ;左侧蝶窦、筛窦、上颌窦内占位病变累及翼腭窝并伴骨质破坏及阻塞性鼻窦炎。住我院眼科。行右眼外侧开眶探查。发现肿物弥漫生长 ,无包膜 ,行球后肿物大部分切除。术前血常规 :Ｈｂ 95ｇ Ｌ ,ＷＢＣ 3.5× 10 9 Ｌ ,ＢＰＣ 30× 10 9 Ｌ ,中性粒细胞 0 .5 7,淋巴细胞 0 .43,涂片中未见异常细胞。后多次复查血常规显示三系血细胞呈进行性下降。血液生化检查 :谷氨酸转氨酶、肌酸激酶、…     

格列卫治疗单倍体骨髓移植后复发的难治性急性淋巴细胞白血病缓解 1例报告

目的：探讨格列卫治疗Ph^1阳性儿童急性淋巴细胞性白血病单倍体骨髓移植后复发的疗效。方法：用格列卫，300mg，1次／d，顿服治疗1例单倍体骨髓移植后复发难治性急性淋巴细胞白血病。治疗前后观察血常规、骨髓象、BCR／ABL融合基因。结果：治疗4周后达完全缓解，BCR／ABL基因转阴。结论：格列卫治疗Ph^1阳性儿童急性淋巴细胞性白血病单倍体骨髓移植后复发有效。     

急性白血病诱导治疗期间医院感染的临床分析

医院感染在急性白血病治疗过程中发生率较高 ,成为其常见死亡原因之一。为了探讨医院感染的原因和预防措施 ,我们对 80例急性白血病诱导治疗期间医院感染进行了回顾性分析。1　材料与方法1 994年 7月至 2 0 0 0年 7月我院共收治急性白血病 80例 ,男 46例 ,女 34例 ,年龄 1 5～ 64岁 ,平均36岁。其中初治 54例 ,复发 1 8例 ,难治 8例。化疗前常规应用小苏打、硼酸漱口 ;肠道消毒药氟哌酸、氟康唑 ;1∶ 2 0 0 0洗必泰坐浴。初治急性粒细胞性白血病采用 DA或 HA方案 ,急性淋巴细胞性白血病采用 VDLP方案诱导治疗 ,复发或难治白血病采用中剂…