缺氧条件下共培养时观察Mtiller细胞对RPE细胞生长的影响

背景视网膜色素上皮（RPE）细胞和Mtiller细胞在维持视网膜的正常代谢中起重要作用,多种生理、病理过程与二者的相互作用有关。目的利用Transwell小室体外共培养兔Mtiller细胞与RPE细胞,观察缺氧条件下Moller细胞对RPE细胞增生和迁移的影响。方法应用组织块培养法和酶消化法分别培养原代兔Mtiller细胞和RPE细胞,免疫组织化学法鉴定2种细胞。取第3代培养良好的细胞进行试验。应用CoCl2培养细胞以建立细胞化学缺氧模型,分为常氧组和缺氧组,每组又分为对照组（RPE细胞单独培养）、共培养组（MOiler细胞与RPE细胞共同培养）。利用Transwell小室建立Mtiller细胞和RPE细胞的共培养模型,各组分别培养3、6、24、48h,利用MTT法和结晶紫染色法对培养存活的RPE细胞进行计数,检测常氧及缺氧条件下Miiller细胞对RPE细胞增生和迁移的影响。结果原代培养的RPE细胞符合RPE细胞的特征,90％以上呈现CK．18阳性反应。培养的Miiller细胞对胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S-100染色呈阳性反应。与常氧培养条件比较,缺氧条件下单独培养的RPE细胞增生数量增加,细胞迁移数量增加,差异有统计学意义（P〈0．01）;缺氧条件下与MUller细胞共培养的RPE细胞增生数量和迁移数量明显增加,与常氧组和单细胞培养情况下比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。缺氧条件下,与RPE细胞单细胞培养组比较,共培养组RPE细胞的增生和迁移增加,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论缺氧可以促进RPE细胞的增生和迁移,Mtiller细胞可以加重缺氧引起的RPE细胞的增生和迁移。     

行全视网膜光凝时不同象限顺序对治疗效果影响的临床研究

目的:利用光学相干断层扫描仪(OCT)视网膜地形图,探讨糖尿病性视网膜病变患者行不同顺序全视网膜光凝术前后对黄斑水肿的影响。方法:随机选择发生糖尿病性视网膜病变Ⅲ和Ⅳ期患者共19例(30眼),按不同象限顺序行全视网膜光凝。分成3组,每组10眼。第1组光凝顺序鼻侧、下方、上方、颞侧象限;第2组下方、鼻侧、上方、颞侧象限;第3组颞侧、下方、鼻侧、上方象限。每周一个象限,共4周完成。分别在术前、术后1,2,3,4,8wk测量视网膜地形图,比较各组间黄斑水肿程度及视力有无差异。结果:第1组和第2组术后8wk视力较术前轻度提高,第3组术后8wk视力较术前轻度下降,差异无统计学意义(P>0.05);第1组和第2组术后4wk黄斑视网膜厚度较术前增加,差异有统计学意义(P<0.05);第3组术后4wk黄斑视网膜厚度较术前增加,差异有统计学意义(P<0.01);术后8wk3组黄斑视网膜厚度均较术前变薄,前两组比第3组减轻幅度大,第1组、第2组在中心环处视网膜水肿减轻同术前比差异有统计学意义(P<0.05),第3组中心环处视网膜厚度同术前相比差异无统计学意义(P>0.05),余各处3组较术前相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:对于Ⅲ期和Ⅳ期糖尿病性视网膜病变全视网膜光凝时,第2组获得较好视力,引起黄斑水肿较轻;通过OCT检查视网膜地形图是观察糖尿病性视网膜病变激光手术前后黄斑水肿的一种有效、敏感方法。     

眼部钝挫伤单纯眶内壁骨折诊断及治疗

眼部是人体暴露部分,外伤发生率较高,常见的颜面钝挫伤可引起软组织的破裂伤及骨损伤。开放性外伤容易引起重视,通过影像学得以骨损伤的诊断。临床单纯眼部钝挫伤外观皮下淤血、气肿、视力正常者易忽略影像学检查,漏     

冠心舒通胶囊HPLC指纹图谱研究

目的建立冠心舒通胶囊的HPLC指纹图谱,为其质量评价提供依据。方法采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,在280 nm波长下,以0.05%磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,体积流量为1.0 m L/min。测定10批冠心舒通胶囊样品,应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2009版)建立冠心舒通胶囊HPLC指纹图谱,并通过对照品对共有峰进行指认。结果通过10批样品的测定,建立冠心舒通胶囊HPLC指纹图谱,相似度均在0.95以上,共标定45个共有色谱峰,34个共有峰归属到各药材,其中5个共有峰来源于广枣,23个共有峰来源于丹参,7个共有峰来源于丁香(其中1号峰为广枣和丁香共有),并通过对照品比较指认了其中13个色谱峰,分别为没食子酸(1号峰)、丹参素(3号峰)、原儿茶酸(5号峰)、原儿茶醛(6号峰)、鞣花酸(10号峰)、迷迭香酸(16号峰)、丹酚酸B(19号峰)、丹酚酸A(23号峰)、丁香酚(24号峰)、二氢丹参酮I(30号峰)、隐丹参酮(34号峰)、丹参酮I(35号峰)、丹参酮IIA(39号峰)。结论此方法专属性强、准确可靠、重复性好,可为冠心舒通胶囊的质量控制提供依据。     

缺氧条件下共培养时观察Müller细胞对RPE细胞生长的影响

背景 视网膜色素上皮(RPE) 细胞和Müller细胞在维持视网膜的正常代谢中起重要作用,多种生理、病理过程与二者的相互作用有关.目的 利用Transwell小室体外共培养兔Müller细胞与RPE细胞,观察缺氧条件下Müller细胞对RPE细胞增生和迁移的影响.方法 应用组织块培养法和酶消化法分别培养原代兔Müller细胞和RPE细胞,免疫组织化学法鉴定2种细胞.取第3代培养良好的细胞进行试验.应用CoCl2培养细胞以建立细胞化学缺氧模型,分为常氧组和缺氧组,每组又分为对照组(RPE细胞单独培养)、共培养组(Müller细胞与RPE细胞共同培养).利用Transwell小室建立Müller细胞和RPE细胞的共培养模型,各组分别培养3、6、24、48h,利用MTT法和结晶紫染色法对培养存活的RPE细胞进行计数,检测常氧及缺氧条件下Müller细胞对RPE细胞增生和迁移的影响.结果 原代培养的RPE细胞符合RPE细胞的特征,90%以上呈现CK-18阳性反应.培养的Müller细胞对胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S-100染色呈阳性反应.与常氧培养条件比较,缺氧条件下单独培养的RPE细胞增生数量增加,细胞迁移数量增加,差异有统计学意义(P＜0.01);缺氧条件下与Müller细胞共培养的RPE细胞增生数量和迁移数量明显增加,与常氧组和单细胞培养情况下比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).缺氧条件下,与RPE细胞单细胞培养组比较,共培养组RPE细胞的增生和迁移增加,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 缺氧可以促进RPE细胞的增生和迁移,Müller细胞可以加重缺氧引起的RPE细胞的增生和迁移.

Abstract：

Background More and more evidences suggest that the interaction of retinal progression of retinal diseases.Objective Present study was to investigate the primarily cultured and digested using explant culture method and trypsas acidic protein(GFAP) staining,S-100 staining and cytokine-18 staining co-cultured under the normoxia and hypoxia using transwell chamber,and the proliferation and migration of cultured RPE cells were examined using MTT and compared with only RPE cells cultured group at 3, 6, 24 and 48 hours.Results Over 90% of primarily cultured RPE cells showed the positive response for S-100.The proliferation and migration of RPE cells were significantly increased in hypoxia condition compared with normoxia condition (P＜0.01).In hypoxia group,amount of proliferation and migration of RPE cells in co-culture group were higher than the only RPE cells cultured group(P＜0.01).Conclusion Hypoxia appear to aggravate the proliferation and migration of RPE cells under the hypoxia status.     

三氧化二砷对兔视网膜色素上皮细胞DNA损伤的研究

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对视网膜色素上皮（RPE）细胞的损伤作用。方法按照Singh的方法从色素兔眼分离RPE细胞并进行体外培养,培养的细胞用细胞角蛋白进行免疫组织化学鉴定。按照对培养细胞的干预方式不同分为阴性对照组（培养基中加入PBS）、阳性对照组（254nm紫外线照射10min）及实验组。实验组分别在培养基中加入终浓度为50．00、5．00、2．00、1．00、0．50、0．25μmol／L的As2O3作用1h。采用锥虫蓝染色法检测各组细胞的活性。采用彗星实验的方法测定细胞的损伤程度。结果90％以上的培养细胞对细胞角蛋白产生阳性的免疫反应。锥虫蓝染色表明各组细胞的形态和细胞活力均无明显差别。不同组中RPE细胞的尾部DNA含量和尾距的差异均有统计学意义（F=88．548,P=0．000;F=129．704,P=0．000）。与对照组比较,不同浓度的As2O3实验组RPE细胞的尾部DNA含量和尾距明显增加,差异均有统计学意义（P〈0．05）,其中50μmol／L组最明显,而0．5μmol／L、0．25μmol／L组与对照组间差异则无统计学意义（P〈0．05）。结论As2O3能够诱导RPE细胞的DNA损伤,损伤程度与As2O3的浓度有关。     

脉络膜转移癌早期误诊为虹膜炎1例

周某某,男,44岁。吉林省榆树市城发乡人。2002年11月因左眼疼痛视物不清就诊。眼部检查:视力右1.0,左眼前手动,右眼前后节检查无异常。左眼混合充血(++),颞侧球     

136例有眼干症状学生泪液分泌观察

1材料与方法2003年12月—2006年12月对门诊136例18～25岁有眼干症状的高中生、大学生进行了基础泪液分泌Schirmer test I检查。     

小儿视交叉周围肿瘤误诊为弱视原因分析

小儿视交叉周围肿瘤所致视功能障碍而误诊为弱视的病例尚未见报告.我们在临床上遇到4例,经手术证实为视交叉周围肿瘤.本文特就其误诊原因进行分析.     

外路提上睑肌缩短术治疗上睑下垂临床体会

上睑下垂是眼科常见疾病,不仅防碍正常视功能,同时还影响外观,给患者生理和心理上造成很大损害。我院自1980年起采用外路提上睑肌缩短术治疗上睑下垂81例,109只眼,疗效满意,总结如下。1 临床资料:81例109只眼中,先天性上睑下垂76例104只眼,麻痹性上睑下垂3例3