手法治疗膝骨关节炎的系统回顾

目的:归纳分析手法治疗膝骨关节炎的治疗资料及症状体征的改善情况.方法:检索发表在中国知网、重庆维普、PubMed及OVID上用具体手法治疗KOA的临床文献;统计手法治疗资料及使用频率.结果:共有271篇文章纳入研究.手法单纯治疗54篇,联合治疗217篇.症状体征改善中,疼痛42篇,功能41篇,活动范围12篇,肿胀11篇...     

膝骨关节炎患者局部病性证素与整体舌象参数关系的研究

目的探讨膝骨关节炎患者关节局部病性证素与舌象参数的关系。方法采用横断面研究方法,调查110例膝骨关节炎患者膝关节局部的中医症状,通过聚类分析概括局部的病性证素,同时应用"舌面脉信息采集体质辨识系统"中的舌部模块采集患者的舌质及舌苔参数,进而探讨关节局部病性证素与舌象之间的关系。结果 (1)通过聚类分析,关节局部病性证素可分为3个类型,即风性证素、寒性证素和湿性证素。(2)寒湿证素组与无风寒湿证素组比较,舌质的舌尖和舌根部L值以及舌根部b值差异有统计学意义(P0.05);寒湿证素组与无风寒湿证素组比较,舌苔的舌中以及舌根部b值差异有统计学意义(P0.05);结果提示,具有寒湿证素的膝骨关节炎患者舌尖及舌根部的舌质色泽更淡而亮,舌苔中根部的颜色更重,并有一定的化热趋势。结论膝关节局部病性证素与整体舌象参数,特别是舌中、根部的参数之间存在着较强的关联性,可以为临床辨治膝骨关节炎提供一定的客观依据。     

全膝关节磁共振成像积分对膝骨关节炎诊断价值的探讨

目的:探讨全膝关节磁共振成像积分(WORMS)对膝骨关节炎(KOA)患者的诊断价值。方法:回顾性分析2009年11月至2011年1月门诊及住院KOA伴膝关节积液患者70例,男12例,女58例;年龄46～75岁,平均(59.66±9.93)岁。用WOMAC量表进行临床症状评估,用K-L分级及全膝关节磁共振成像积分(WORMS)进行放射学评估,同时应用ELISA法检测患者关节液中COMP及CTX-Ⅱ的浓度。并对上述指标进行相关性分析及多重线性回归分析。结果:WOMAC评分及WORMS分别为(57.50±8.20)和(64.54±16.45)分,CTX-Ⅱ及COMP含量分别为2.42ng/ml和4.56ng/ml。选择WORMS四分位数中轻和严重2组,比较2组COMP差异有统计学意义(Z=2.04,P=0.039),而CTX-Ⅱ差异则无统计学意义(Z=0.79,P=0.427)。相关性分析发现WORMS与WOMAC评分、K-L分级呈正相关(r=0.777,P<0.01;r=0.716,P<0.01),K-L分级与WOMAC评分也呈正相关(r=0.692,P<0.01)。WORMS中关节软骨积分、骨赘积分、滑膜炎积分分别与WOMAC评分、K-L分级及COMP亦呈正相关(r=0.771,P<0.01;r=0.509,P<0.01;r=0.917,P<0.01)。以WOMAC评分为应变量,年龄、性别、K-L分级、WORMS、COMP和CTX-Ⅱ为自变量进行逐步回归(F=20.327,P<0.01),KOA病情主要受WORMS、K-L分级影响(P=0.015,P=0.025)。结论:WORMS对膝骨关节炎的诊断有较高的参考价值。WORMS高时,关节液中COMP含量升高。膝骨关节炎的临床症状主要受WORMS、K-L分级影响。     

中药贴膏治疗膝骨关节炎及其作用机制的研究思路初探

探讨中药贴膏干预膝骨关节炎及其作用机制的研究思路。认为应重视阐释贴膏的镇痛抗炎作用途径,明确延缓软骨退变的原理,加强对免疫和神经化学系统的影响及安全性研究。     

河蚌提取物葡聚糖对软骨细胞Wnt通路的调控作用研究

目的 ：探讨河蚌肉提取物葡聚糖HBP-A（anodonta glucan HBP-A）对体外软骨细胞Wnt通路的调控作用。方法：体外培养大鼠软骨细胞,添加IL-1β（10 ng/ml）诱导分化,分为空白组,IL-1β组,IL-1β＋IWP-2（5μM,Wnt通路抑制剂）组,IL-1β＋HBP-A（0.3 mg/ml）组,IL-1β＋IWP-2＋HBP-A共5组培养,提取各组细胞RNA和蛋白,采用Rt-PCR检测各组细胞Wnt-3a、β-catenin（24、48、72 h）及MMP-13（72 h）的基因表达;采用Western-blot检测β-catenin、MMP-13、Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白的表达水平（48 h）。结果：细胞经IL-1β诱导分化,Wnt-3a基因表达升高,β-catenin以及MMP-13基因和蛋白表达升高,Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白表达下调。添加HBP-A干预可以抑制IL-1β诱导下软骨细胞Wnt-3a基因的高表达、β-catenin以及MMP-13基因和蛋白的高表达,上调Sox-9和Ⅱ型胶原蛋白的表达。IWP-2和HBP-A合用时,Wnt-3a、β-catenin基因以及β-catenin蛋白表达最低,Sox-9蛋白表达最高。结论：HBP-A可通过降低Wnt/β-catenin信号通路表达,延缓软骨细胞分化,并且可与Wnt抑制剂协同调节Wnt-3a、β-catenin和Sox-9因子的表达。     

TLR4/NF-κB通路参与大鼠膝骨关节炎滑膜早期病变的研究

目的:探讨TLR4/NF-κB通路在大鼠膝骨关节炎(OA)滑膜早期病变的表达情况。方法:将8周龄体重为(200±20) g的18只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为模型组和对照组,每组9只。模型组按照改良Hulth法构建膝OA模型,对照组不做手术。分别于术后4、 21 d提取滑膜组织和血清,采用PCR法检测CD14、TLR-4、IL-1β、TNF-α、MMP-13、ADAMTS-4表达;采用Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达;采用Elisa法检测血清中透明质酸(HA)及Ⅲ型前胶原氨基端(PⅢNP)浓度。结果:术后4、21 d时模型组CD14、ADAMTS-4及NF-κB p65表达均较对照组升高,术后21 d时模型组TLR-4、Ⅱ-1β、TNF-α及MMP-13表达较对照组升高(P0.01)。模型组术后4 d时血清PⅢNP和HA浓度高于对照组,术后21 d时两组比较差异无统计学意义。结论:NF-κB通路可通过CD14/TLR-4早期激活进而触发滑膜分泌炎性因子IL-1β、TNF-a、MMP-13、ADAMTS-4,PⅢNP和HA增加介导膝OA发生。     

塞来昔布抑制凝血酶诱导的大鼠软骨细胞退变

背景：骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著高于正常人,且凝血酶可以诱导大鼠软骨细胞退变,提示抑制凝血酶功能可能成为治疗骨关节炎的一种方法。塞来昔布为临床治疗骨关节炎的常见药物,是否可以抑制凝血酶的促炎作用而改善大鼠软骨细胞退变尚未可知。目的：探讨塞来昔布对凝血酶诱导软骨细胞退变的影响。方法：使用ELISA试剂盒检测骨关节炎患者与正常人血清中凝血酶含量。体外提取、培养SD乳鼠关节软骨细胞,使用第一代细胞进行实验,将软骨细胞分对照组、凝血酶组和塞来昔布组。显微镜下观察3组细胞形态,并使用Edu试剂盒检测细胞增殖情况;qRT-PCR检测软骨细胞外基质成分(聚集蛋白聚糖、弹性蛋白、软骨寡聚基质蛋白)、炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)的表达;免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1的表达;Western Blot检测分解代谢基因如基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2等蛋白的表达。结果与结论：(1)与正常人相比,骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著增高;(2)塞来昔布可明显抑制凝血酶诱导的软骨细胞纤维样形态改变;...     

一种获取具有旺盛增殖力的大鼠软骨细胞培养方法

目的探讨大鼠软骨细胞的培养方法。方法采用单纯胶原酶消化配合吹打法,从新生(出生24 h内)SD大鼠的膝、肩、肘关节和股骨头处的软骨中提取软骨细胞进行原代培养,在显微镜下观察并对甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色、II型胶原免疫荧光染色和增殖细胞核抗原免疫荧光染色进行鉴定;针对不同批次的实验观察结果,进行一致性检验。结果原代细胞培养第3天即可传代,前3代细胞表型稳定,增殖力良好;第4代开始出现细胞分化的迹象。不同批次实验的一致性检验结果稳定。结论采用单纯胶原酶消化配合吹打法能够在短时间内获取大量纯化且增值能力旺盛的软骨细胞。     

大鼠血浆血清对软骨细胞纤维化转变的影响

目的 观察大鼠的血清和血浆对大鼠软骨细胞的增殖,形态改变,基质蛋白及基质调控基因的表达变化。方法 取出生24h SD大鼠关节处软骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得软骨细胞,取P1代细胞进行实验。软骨细胞分别培养于含10%大鼠血浆（rat plasma,RP）和10%大鼠血清（rat serum,RS）的DMEM低糖培养基中,分别为血浆组和血清组。分别培养24h,镜下观察细胞形态变化,CCK8方法检测24h、48h和72h软骨细胞增殖（A₄₅₀）。细胞免疫荧光、Western blot和定量PCR检测软骨指标Sox9、Ⅱ型胶原、MMP13、Col2a1、A-can、ADAMTS5、MMP9、MMP3的表达。结果 培养于大鼠血清和血浆的培养基中,24h后血清组的软骨细胞由鹅卵石样排列的多角形变成长梭形。血清组24h（0.67±0.01）,48h（1.29±0.05）和72h（1.92±0.03）A₄₅₀值,明显高于血浆组24h（0.43±0.01）,48h（0.72±0.01）和72h（1.27±0.04）A₄₅₀值,差异均有统计学意义（P<0.01）。血清组软骨细胞MMP13和Col1a1表达显著上调,Ⅱ型胶原和Sox9的表达显著下调。PCR结果表明,血清组A-can（0.24±0.01）和Sox9（0.56±0.04）基因表达相对于大鼠血浆组Sox9（1.00±0.05）和A-can（1.00±0.08）表达明显降低,而血清组ADAMTS5（34.51±2.25）和MMP3（40.33±2.43）表达相对于大鼠血浆组ADAMTS5（1.02±0.21）和MMP3（1.00±0.11）表达明显增强,两组间基因表达差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 血清促进软骨细胞转变成纤维样软骨细胞。     

软骨标志物CTX-Ⅱ在骨关节炎中的应用

骨关节炎(OA)的临床诊断尚缺乏有效的生物学标志物.研究证实标志物Ⅱ型胶原羧基端交联肽(CTX-Ⅱ)是关节软骨降解的特异性指标.CTX-Ⅱ检测可及时反映软骨损伤和退变程度、诊断OA发生、预测OA进展和监测药物治疗效果,从而间接反映OA患者的病情.CTX-Ⅱ的应用主要集中于OA早期,并需联合其他生物学标志物一起检测,以便更准确的反映OA病变,但其检测结果具体临床指导意义还需进一步完善.