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目的 制备兔抗人KiSS-1多克隆抗体.方法 聚合酶链反应(PCR)法扩增出KiSS-1基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠埃希菌BL21(DE3).采用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,采用镍离子螯合琼脂糖凝胶(Ni^2+-NTA)亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫家兔,制备多克隆抗体,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)、Western blot及免疫组织化学法检测抗体.结果 成功构建了KiSS-1原核表达载体pET28/ KiSS-1,高效表达并纯化KiSS-1蛋白,间接ELISA检测所制备抗体的效价为1:6 400.Western blot鉴定制备的抗体与KiSS-1蛋白能特异性结合,免疫组织化学法检测结果表明该抗体识别人卵巢癌组织中的天然KiSS-1.结论 成功制备了效价高、特异性较强的兔抗人KiSS-1抗体,为进一步探讨KiSS-1在卵巢癌的发生、发展过程中的作用奠定了基础. 相似文献
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目的评价西地那非治疗新生儿持续肺动脉高压(PPHN)的有效性和安全性。方法对确诊PPHN的23例患儿给予西地那非0.25~0.5 mg.kg-1.次-1,6~8 h 1次。观察治疗前和服药3 d后,利用超声心动图仪检测平均肺动脉压等。结果治疗3 d后,除病情恶化2例死亡外,平均肺动脉压、PaCO2均有下降(P<0.01),SaO2、PaO2显著升高(P<0.01)。治愈14例,好转5例,无效4例,总有效率82.6%。结论西地那非对新生儿持续肺动脉高压有肯定的疗效,且安全性较高。 相似文献
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目的:建立胆南星样品中猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量测定方法,比较胆南星发酵前后这几种胆酸类成分的含量变化,为胆南星发酵原理、工艺规范化研究提供参考。方法:Waters C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃;流动相为乙腈-0.5%冰乙酸溶液(60∶40);检测器:奥泰2000蒸发光散射检测器;流速:1.0 mL·min~(-1);漂移管温度:105℃,气体流速:3.0 mL·min~(-1)。结果:猪胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸均在定量范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.63%、100.04%、101.4%。结论:本方法操作简单,测定结果准确,胆南星发酵后猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量增加,可作为胆南星发酵程度及胆汁加入量的判定指标。 相似文献
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目的构建抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素原核表达载体并测定表达产物对隐孢子虫的杀灭作用。方法利用基因工程原理,以含抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素的菌株为模板,利用设计合成的一对引物扩增出ScFv-PE,利用pMAL-p2X载体构建重组毒素pMAL-ScFv-PE,并将其导入大肠杆菌中进行表达,产物进行SDS-PAGE和Western-blot,纯化后治疗感染隐孢子虫的小鼠。结果重组质粒经酶切鉴定正确,IPTG诱导后可看到明显的条带。凝胶薄层扫描分析目的蛋白表达量占菌体蛋白总量的21%。纯化后的表达产物治疗感染隐孢子虫的小鼠治疗组比对照组肠滞留物中卵囊计数(P〈0.05)与肠道平均累计感染积分明显减少(P〈0.01)。结论利用原核表达载体成功构建了可溶性形式表达的pMAL-ScFv-PE重组质粒,重组毒素对隐孢子虫具有明显的杀灭作用。 相似文献
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了解北京市通州区儿童青少年法定传染病流行病学特征,为儿童青少年传染病防控提供依据.方法 采用描述流行病学方法,对来源于中国疾病预防控制信息系统中的通州区儿童青少年法定传染病流行病学特征进行分析.结果 通州区2005-2015年共报告0~ 24岁儿童青少年法定传染病23种67 457例,年平均发病率为2 113.27/10万.甲、乙类传染病年平均发病率为387.84/10万,2005年为434.57/10万,2015年为220.3/10万;其中0岁组发病率最高(1 167.95/10万),其次为5岁组(410.27/10万),10岁组发病率最低(80.15/10万).丙类传染病年平均发病率为1 725.44/10万.2005年为768.41/10万,2015年为1 814.06/10万;其中0岁组发病率最高(9 417.82/10万),10岁组最低(203.97/10万).结论 通州区儿童青少年甲乙类传染病发病率呈下降趋势,丙类传染病发病率呈先升后降的趋势. 相似文献