聚集素在前列腺癌细胞不同周期时相的表达

目的探讨凋亡相关基因聚集素（clusterin）在前列腺癌不同周期时相的差异表达及意义。方法应用改良的胸腺嘧啶核苷（TdR）和高压笑气双阻断法将前列腺癌细胞系PC-3同步在不同的周期时相，应用流式细胞术检测同步化的效率。应用RT-PCR及Western blotting方法检测不同周期时相聚集素在mRNA和蛋白水平的表达。结果前列腺癌细胞系PC-3的M、G1、S和G2期细胞同步化效率分别为92．1％、87．0％、80．2％和75，9％；聚集素在不同周期时相均有表达且存在差异，G1和S期表达水平较低，M期和G2期表达水平较高，RNA和蛋白表达具有一致性。结论细胞周期对聚集素的表达有较大的影响，对于采用聚集素途径治疗前列腺癌具有指导意义。     

复方中药紫龙金对前列腺癌的体外作用

目的　探讨复方中药紫龙金对前列腺癌的体外作用机理。　方法　应用MTT法、软琼脂集落生长实验、流式细胞术和显微荧光术测定紫龙金对LNCaP、DU 1 4 5和PC 3细胞的增殖抑制、集落生长抑制、周期阻滞和诱导凋亡作用 ;应用RT PCR方法检测对前列腺特异性抗原基因PSA和雄激素受体基因AR、凋亡相关基因Bcl 2和Bax以及抑癌基因p1 6表达的影响。　结果　紫龙金对 3种前列腺癌细胞系均具有剂量依赖性增殖抑制和G0 /G1 期阻滞作用 ,作用 72h时 3种细胞IC50 分别为 0 .79、0 .4 2和 0 .5 2mg/ml;对LNCaP和DU 1 4 5细胞具有诱导凋亡作用 ,可以显著抑制DU 1 4 5细胞的集落生长 ;紫龙金可以下调LNCaP细胞PSA、AR和Bcl 2表达 ,下调DU 1 4 5细胞Bcl 2 ,上调Bax和P1 6基因表达。　结论　紫龙金可以通过抑制前列腺癌细胞增殖、抑制集落生长、G0 /G1 期阻滞、诱导凋亡、调节PSA、AR、Bcl 2、Bax和p1 6基因表达等作用机理发挥抗肿瘤作用     

3＇,5＇-cAMP对不同瘤龄的艾氏腹水癌细胞内cAMP免疫荧光细胞化学反应及其磷酸二酯酶的细胞化学反应与癌细胞膜表面某些形态学变化的关系

本工作用外源性 cAMP 加氨茶碱对小鼠艾氏腹水癌细胞进行了多方面的研究,观察到外源性3′,5′-cAMP 不仅对小鼠艾氏腹水癌细胞增殖有显著的抑制作用。在接种后第9天,看到癌细胞增殖受到抑制的同时,大多数癌细胞胞质内的 cAMP 免疫荧光细胞化学反应增强,癌细胞内3′,5′-cAMP 磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制,此外,还观察到某些癌细胞表面膜上微绒毛消失或变短以及对植物凝集素的凝集反应减弱等现象,这些癌细胞的逆转表现的变化均与不同瘤龄的癌细胞有关,如经外源性 cAMP 处理后,cAMP-PDE 活性降低出现的最早,均在接种后5～7天时最为明显,cAMP 免疫荧光细胞化学反应是在接种后第9天最为显著,癌细胞表面膜上的微绒毛消失和变短的细胞比数明显增多,对植物凝集素的凝集反应减轻都是在接种后7～9天时最为显著,而 cAMP 对小鼠艾氏腹水癌细胞的增殖抑制作用是在接种后第9～11天最为明显。根据上述实验结果,本文讨论了外源性 cAMP 加氨茶碱对腹水癌细胞的抑制作用和癌细胞内cAMP 荧光反应,3′,5′-cAMP-PDE 活性以及癌细胞表面膜上微绒毛形态学变化的因果关系。     

白龙片治疗恶性肿瘤的临床与实验研究

目的：观察白龙片以吉晚期恶性肿瘤的临床疗效并探讨其作用机理。方法：利用白龙片治疗３４例恶性肿瘤患者胺实体瘤疗效标准进行疗效分析，证定其生存质量改善情况及免疫功能的变化，并通过动物实验和细胞生物学实验观察其在体外对人淋巴细胞、小鼠腹腔巨噬细胞、人胃癌细胞等的作用。结果：临床观察３４例患者缓角率为１１．８％，缓稳率为８２．３％；生存质量改善，机体免疫力增强，治疗前后比较有显著性差异（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈     

中药白龙与HMBA对人癌周期细胞CKI-P16的调控

目的 :研究中药白龙与西药环六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)对人癌细胞中周期蛋白抑制因子P16的表达与调节。方法 :采用Northernblot、Westernblot等方法检测人癌细胞在白龙或HMBA作用下P16的表达调节。结果 :在白龙或HMBA作用下癌细胞G1期P16的表达增加 ,这一作用与cAMP PKA和DAC PKC两套信号通路共调节作用密切相关。当以PKA抑制剂阻断PKA通路时 ,P16表达下降 ,相反当PKC通路被阻断时P16表达水平升高。结论 :(1)癌细胞G1期P16的低表达 (与其他时相比较 )可能是P16不能有效抑制癌细胞恶性变化的重要原因。 (2 )白龙和HMBA对肿瘤细胞的增殖抑制机理与G1期细胞P16表达升高相关。 (3)白龙和HMBA对人癌细胞内P16的表达调节表现了中西药对肿瘤细胞调节机理的共性。 (4 )首次阐明了P16上游调控与cAMP/PKC信号通路密切相关。     

紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响

目的观察复方中药紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及对其凋亡的诱导作用,探讨紫龙金治疗乳腺癌的作用机制。方法依据培养液紫龙金浓度的差异,实验共设4组:(1)对照组:不加紫龙金干预的1640培养液;(2)紫龙金低浓度组:1.5 mg生药/mL紫龙金培养液;(3)紫龙金中浓度组:3 mg生药/mL紫龙金培养液;(4)紫龙金高浓度组:6 mg生药/mL紫龙金培养液。采用细胞计数法绘制生长曲线及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度紫龙金对MCF-7细胞增殖能力的影响,并应用流式细胞术、Hoechst 33342核染色法及DNA梯度形成法测定紫龙金诱导凋亡的作用。结果(1)与对照组比较,紫龙金各剂量组的细胞计数在各时间点(24、48、72、96、120、144 h)明显减少,其差异均有统计学意义(P0.05);紫龙金各剂量组间的生长抑制率差异除低、中浓度组间在24、72 h无统计学意义外(P0.05),各剂量组间两两比较在不同时间点(24、48、72、96、120、144 h),其差异均有统计学意义(P0.05)。紫龙金对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈时间依赖性和剂量依赖性;(2)紫龙金使细胞阻滞在G_0/G_1期;(3)中、高浓度紫龙金诱导MCF-7细胞凋亡,并形成DNA ladder。结论紫龙金能抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖,并诱导细胞凋亡,从而起到抗肿瘤的作用。     

复方中药紫龙金抑制肾癌ketr-3细胞增殖的血清药理学研究

目的观察复方中药紫龙金含药血清对人肾癌ketr-3细胞生长增殖的抑制作用。方法运用血清药理学方法,选择不同浓度的含紫龙金大鼠血清与ketr-3细胞共同孵育,于不同时间用生物倒置显微镜观察细胞形态变化,W ST-8比色法检测紫龙金含药血清对人肾癌ketr-3细胞的增殖抑制率。结果紫龙金含药血清作用ketr-3细胞48 h后,细胞呈现典型的凋亡形态学改变,可见部分细胞变圆,体积变小,有凋亡小体产生;且抑制作用呈现时间和剂量依赖关系,与对照组比较,各浓度含药血清（5%、10%、20%）作用24 h后细胞增殖抑制率无明显差异（P〉0.05）,作用48 h后细胞增殖抑制率分别为4.9%（P〉0.05）、22.6%（P〈0.01）、28.7%（P〈0.01）。结论紫龙金含药血清可有效抑制人肾癌ketr-3细胞体外增殖。     

复方中药白龙对人胃癌BGC82-3细胞恶性增殖表型的影响

目的：观察复方中药白龙（简称白龙）对人胃癌ＢＧＣ８２－３细胞恶性增殖表型的逆转作用方法：通过测定生长曲线、软玉脂集落及裸鼠致瘤实验，观察人胃癌ＢＧＣ８２－３细胞增殖的变化。结果：（１）生长曲线表明白龙明显３了ＢＧＣ８２－３细胞的增殖到第５天抑制率达８６％。（２）经白龙处理的ＢＧＣ８２－３细胞在软玉脂中形成的集落小且少，与对照组比交集落形成率仅为５２％。（３）白龙明显抑制接种ＢＧＣ８２－３细胞的裸鼠     

复方中药和3′,5′环腺苷酸(cAMP)对小鼠艾氏腹水癌细胞的抑制效果与癌细胞内cAMP含量及cAMP-PDE活性变化关系

本工作用复方白蛇酒及外源性cAMP对小鼠艾氏腹水癌进行比较实验,通过实验观察到该复方制剂和外源性3’,5’-cAMP对小鼠艾氏腹水癌细胞的增殖均有显著的抑制作用,癌细胞增殖受到抑制的同时,癌细胞内3’,5’-cAMP含量显著提高;控制cAMP水平的3’,5’-cAMP磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制。该复方之所以能提高癌细胞内cAMP水平可能是由于细胞内3’,5’-cAMP-PDE.活性受到抑制所致。本工作进一步将该复方组分的两部份(六味中草药和蟾蜍酒)与原复方白蛇洒分别进行实验比较,观察到前两组癌细胞内3’,5’-cAMP水平和3’,5’-cAMP-PDE的活性均未看到显著变化,本工作可为中医临床用药和疗效机理提供一定的理论依据。