dsRNA介导的PTEN基因表达上调及其与启动子区甲基化的关系

目的 观察以启动子区非CpG岛序列为靶点的dsRNA促进PTEN基因的表达,并探讨RNAa现象对PTEN基因启动子区DNA甲基化的影响.方法 将与PTEN基因启动子区非CpG岛DNA序列互补的双链RNA分子(dsPTEN) 转染入A549和H292肺癌细胞中,采用real-time聚合酶链反应(PCR)检测PTEN的表达,筛选能够促进PTEN基因表达的有效dsRNA序列.通过甲基化特异性PCR(MSP)产物测序,检测dsRNA转染前后启动子区甲基化程度的变化.结果 经多条dsRNA分别转染肺癌细胞,证实针对PTEN基因-57到-38的序列(dsPTEN2-2)转染H292肺癌细胞后出现PTEN基因表达的明显上调,上调最高达5.1倍(与对照dsRNA比较,P<0.05),证实了RNAa现象的存在;使用5-Aza处理后的A549和H292细胞与空白组比较CpG点甲基化明显减少(5±3比10±4、6±3比9±3,P均<0.05),而转染PTEN2-2 dsRNA后的两个细胞株CpG点甲基化情况与未转染组比较无明显变化(9±2比10±4、9±3比9±3,P均>0.05).结论 dsRNA可以促进PTEN基因表达的上调,RNAa现象并不改变PTEN基因启动子区甲基化程度.

Abstract：

Objective To evaluate the phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN) gene activation induced by double-standed RNA (dsRNA) in lung cancer cell line and its correlation with CpG island methylation in the promoter region. Methods Specific dsRNA complementary to the non-CpG island sequence in the promoter of PTEN gene was designed and transfected into H292 and A549 cell lines, and the expression of PTEN mRNA was determined by real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR). The methylation status of the CpG island in the promoter region was tested by DNA sequencing on the bisulfate modified DNA. Results By testing several dsRNA sequences targeting promoter region of PTEN, a dsRNA named PTEN2-2 (target on -57 to -38 of the PTEN) was identified, which could upregulate the PTEN expression by 5.1 times at most (P<0.05, controlled with the dsControl). Epigenetic analysis of PTEN promoter region confirmed DNA hypermethylation. PTEN2-2 dsRNA transfection turned on the expression of PTEN without affecting the methylation status of promoter DNA (9±2 vs 10±4, 9±3 vs 9±3, both P>0.05), as the DNA methyltransferase inhibitor did (5±3 vs 10±4, 6±3 vs 9±3, both P<0.05). Conclusion The expression of PTEN mRNA could be enhanced by inducing the dsRNA into the cells, but no evidence was found that dsRNA could affect the methylation status of the CpG island in the promoter region of this gene.     

EB病毒相关胃癌中EB病毒编码基因与P53蛋白的表达

研究表明，EB病毒(EBV)感染与胃癌发生有关，但其在胃癌发生发展过程中的作用尚未完全明了，EBV相关胃癌(EBVaGC)中EBV与癌基因和抑癌基因的相互作用成为致癌机制研究的热点。本研究选择EBVaGC和各种临床指标与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGC)作为研究对象，检测EBV相关基因和P53蛋白的表达，以探讨它们的相互关系及在胃癌发生发展中的作用。     

黄连素对2型糖尿病大鼠主动脉内皮功能及形态的保护作用

目的 通过观察黄连素对2 型糖尿病大鼠血管内皮功能的影响,探讨黄连素对2型糖尿病血管并发症的防治意义及其机制.方法 采用小剂量链脲佐菌素腹腔注射加高脂饲料喂养的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将模型动物随机分为模型组、黄连素治疗组,另设正常对照组以及正常黄连素组.药物干预治疗8 w后,处理动物,检测各组动物血清中空腹血糖(...     

菊黄枫红鱼肥果香

<正>农历九月是秋季的最后一个月,也称菊月、暮秋。此时正时菊黄枫红的深秋时节,鱼肥蟹美,瓜果飘香。天气明显转凉,人们胃口大开,正适合多进食一些滋补食品,如鸡肉、鸭肉、牛肉、鱼肉、莲子、银耳、大枣之类营养丰富的清补食品。不过此时人体脾胃经历夏天后还没有恢复到位,故羊肉之类的大补之品并不适合。     

冬月固阳

<正>农历十一月又称为“冬月”,基本上到了一年中最冷的时节,尤其是北方寒风凛冽。此时应防寒保暖,固护身体的阳气,饮食上宜适当进补,为来年开春的阳气生发打好基础。食物可选择羊肉、牛肉、桂圆、红枣、核桃、山药、枸杞子等温补平补之品,还要多摄入一些白菜、白萝卜、胡萝卜等应季蔬菜,以及苹果、梨、柑橘等水果,以补充维生素、矿物质和膳食纤维。     

子宫肌瘤超声诊断

子宫肌瘤是由子宫平滑肌和结缔组织所构成的子宫良性肿瘤. [病理] 大体观子宫肌瘤是实性肿瘤,可发生在子宫的任何部位,大小差异很大,可单个,也可多个.形态多呈圆形,也可不规则形或多个肌瘤相互融合成结节状.肌瘤组织较正常子宫肌组织硬而致密.肌瘤自身没有包膜,周围被压迫的肌壁纤维形成假包膜,肌瘤与假包膜间界限清楚.肌瘤表面色淡,切面呈灰白色,可见呈漩涡状或编织状排列的结构,组织质地致密.     

CT增强扫描中静脉穿刺的护理体会

目的 探讨CT增强扫描中静脉穿刺的注意事项,提高穿刺成功率.方法 总结回顾62例CT增强扫描患者静脉穿刺的护理过程.结果 62例患者中60例穿刺成功,2例穿刺失败.结论 护理人员在临床实践中要加强学习,善于观察和总结,不断提高CT增强扫描中静脉穿刺成功率,减少并发症发生.     

存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂联合检测对胰腺癌预后的判断价值

目的:探讨存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂联合检测对胰腺癌预后的判断价值。方法:选取于我院2010年5月~2015年5月进行手术的60例胰腺癌患者所切除的组织为研究样本。采用免疫组化法检测并分析存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂对评估胰腺癌患者预后的临床价值。结果:随访3~24个月,术后意外死亡的失访人数有6例,失访率为10.00%;中位无复发生存期(RFS)为11.38个月;1、2年的累计无瘤生存率分别为43.33%(26/60)、28.33%(17/60);Survivin及u PA表达在不同性别、年龄、肿瘤大小及部位、是否远处转移等方面比较均无显著性差异,P>0.05,而在不同分化程度、临床分期及淋巴转移中的表达比较差异显著,P<0.05。经Spearman分析,分化程度(RR=2.618,P<0.05)、临床分期(RR=1.714,P<0.05)、淋巴转移(RR=1.496,P<0.05)及Survivin(RR=0.516,P<0.05)及u PA(RR=0.644,P<0.05)过度表达为影响胰腺癌预后的独立危险因素。结论:存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂联合检测,对胰腺癌患者早诊断、早治疗和评估预后具有非常重要的临床意义。     

找回传统“年夜饭”

如今餐桌上的饮食越来越丰富,各种新鲜美食让人应接不暇。但到了春节,有几样传统的"年夜饭"总要端上餐桌。虽然各地有其独特的饮食风俗,但有几种年夜饭差不多是家家必备的,如喻示着"年年有余"的鱼、"年年高"的年糕、"富贵吉祥"的鸡、"团团圆圆"的汤圆,还有饺子、黏豆包等。