ROR-γ在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义分析

  目的  探讨视黄酸受体相关孤儿受体-γ（retinoic acid receptor-related orphan receptor-γ,ROR-γ）在三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）中的表达及临床意义。  方法  采用Oncomine网站数据库分析乳腺浸润性癌与癌旁组织中ROR-γ mRNA的表达差异,通过Kaplan-Meier Plotter网站评估ROR-γ mRNA在乳腺癌不同分子亚型中的表达预后意义。收集2011年1月至2014年12月收治于天津医科大学肿瘤医院的269例TNBC患者的组织标本和临床病理资料,采用免疫组织化学染色法（immunohistochemistry,IHC）检测TNBC组织中的ROR-γ蛋白表达,并探讨其与患者临床病理特征、预后的关系。  结果  Oncomine和Kaplan-Meier Plotter网站分析结果显示,乳腺浸润性癌组织中的ROR-γ mRNA表达显著高于癌旁组织（P<0.000 1）。相较于其他分子亚型,ROR-γ在TNBC中的预后意义更为显著,且与不良预后相关。IHC检测结果显示,ROR-γ蛋白在TNBC组织中的表达高于癌旁组织,ROR-γ在TNBC中的高表达率为18.2%（49/269）。ROR-γ高表达的患者具有较高的发病年龄（P=0.001）、已绝经状态（P＜0.001）、高肿瘤Ki-67指数（P=0.001）和淋巴结转移（P=0.003）。ROR-γ高表达是TNBC患者无病生存期（P=0.031）和总生存期（P=0.029）的独立影响因素。  结论  ROR-γ在TNBC组织中高表达,并与肿瘤的增殖活跃、淋巴结转移和患者不良预后相关,或可作为潜在的预后标志物,为TNBC的诊疗提供新的参考。      

腋淋巴结阳性乳腺癌结外侵犯的临床意义

目的 探讨乳腺癌患者淋巴结外侵犯(ECE)的临床意义.方法 回顾性分析1230例腋窝淋巴结阳性乳腺癌,观察ECE与临床病理指标之间关系及对患者预后的影响.结果 腋窝淋巴结阳性乳腺癌患者中,ECE阳性率为39.5%.绝经前和绝经后患者ECE的发生率分别为35.5%和47.5%(P＜0.001).ECE阳性组和阴性组的肿瘤直径分别为5.11±2.53 cm和3.90±1.80 cm(P＜0.001),肿瘤直径越大,ECE阳性比例越高(P＜0.001).ECE阳性患者和ECE阴性患者的阳性淋巴结数目分别为16.96±12.16和5.24±6.60(P＜0.001),随腋窝阳性淋巴结数目增多,ECE阳性率明显增加(P＜0.001).ECE的发生与ER、PR状态无显著相关(P=0.706).ECE足乳腺癌患者局部或区域复发的危险因素(P＜0.001),复发时间差异无统计学意义(P=0.559).ECE阳性组和ECE阴性组的远处转移时问分别为30.0个月和37.5个月(P=0.006).首发骨、皮肤和远隔淋巴结组及内脏转移组的ECE阳性率分别为60.4%和42.0%(P=0.001).ECE阳性患者的无转移生存时间、无局部或区域复发生存时间及总生存时间均小于ECE阴性患者.预后单因素和多因素分析显示,ECE是影响乳腺癌患者无转移生存时间、无局部或区域复发生存时间及总生存时间的独立危险因素.结论 乳腺癌患者ECE的发生与肿瘤直径和受累淋巴结数日呈正相关;ECE是乳腺癌局部或区域复发和远处转移的危险因素;ECE是影响乳腺癌患者无转移生存时间、无局部或区域复发生存时间及总生存时间的危险因素.     

血清乙型肝炎病毒RNA定量分析系统的建立

目的 :建立针对血清乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus,HBV)转录体的定量分析系统 .方法 :从血清中提取病毒DNA和RNA ,采用竞争性PCR技术、Southern blotting及分子克隆等技术 ,建立循环病毒DNA和RNA(转录体 )的定量分析系统 ,并应用其对抗病毒药物Lamivudine干预治疗后HBV感染患者血清中HBVDNA和RNA结构和数量的变化进行分析 .结果 :建立了两个针对X区RNA的定量分析系统 ,可检测带有全长型和顿挫型 3′端结构的转录体 .我们还建立了HBVX ,Core和X PreCore区段的DNA/RNA定量分析系统 ,三者分别与HBV基因复制的早、中、晚期对应 .此研究初步阐明了Lamivudine治疗期间患者血清中HBVDNA和转录体结构和数量的变化 .治疗 8wk以后 ,在Core和X PreCore区DNA拷贝数从 10 9·mL-1下降为 10 5·mL-1,下降幅度明显高于X区(下降至 10 7·mL-1) ,其比率更准确地反映了Lamivudine的作用效率 ,可用于疗效的评估 .转录体的拷贝数仅有小幅下降 ,采用锚定的Oligo(dT)引物检测的两种全长和顿挫型Ploy(A)RNA (10 5·mL-1)明显低于X区 (10 7·mL-1)RNA的拷贝数 ,提示在基因复制过程中前基因组RNA的Ploy(A)尾被去除 .结论 :这一分析系统可显示血清中HBV转录体含量及定量不同 3′端结构 ,为研究循环中HBV转录体和DNA的动态变化提供     

雄激素受体在乳腺癌细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

目的 检测雄激素受体(AR)在乳腺癌细胞中的表达,并观察雄激素刺激对乳腺癌细胞增殖的影响.方法 选择雌激素受体(ER)阳性的MCF-7和ER阴性的MDA-MB-453乳腺癌细胞,体外培养,Western blot技术检测两乳腺癌细胞株中AR蛋白的表达,MTT法检测用1×10-7、1×10-8和1×10-9 mol/L不同浓度的雄激素二氢睾酮(DHT)分别干预48、96、144 h后的细胞增殖,并应用流式细胞术检测DHT刺激乳腺癌细胞72 h后细胞周期的变化.结果 两个乳腺癌细胞株经DHT作用后AR蛋白表达均增多,DHT通过AR抑制MCF-7和MDA-MB-453两个乳腺癌细胞株的生长,各时间段不同浓度组比较A值差异无统计学意义(P＞0.05),细胞周期结果显示G1期细胞比例增高,S期细胞比例降低.结论 雄激素受体途径对ER阳性的MCF-7和ER阴性的MDA-MB-453乳腺癌细胞均有抑制生长作用,可能通过抑制细胞由G1期到S期转化来实现的.

Abstract：

Objective To evaluate the expression of androgen receptor (AR) in the breast cancer cell lines and its effect on proliferation of breast cancer cells. Methods The estrogen receptor (ER) -positive MCF-7 and ER-negative MDA-MB-453 cells were involved in this study and cultured in vitro. The expression of AR was detected by using Western blotting. Cell proliferation was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay after the treatment with different concentrations of dihydrotestosterone (DHT) ( 1 x 10 -7, 1 x 10- 8, 1 x 10 -9 mol/L) for 48, 96 and 144 h respectively. Cell cycle was analyzed by flow cytometry following culture for 72 h. Results DHT increased the AR expression in the two breast cancer cell lines. AR pathway could inhibit proliferation of MCF-7 and MDA-MB-453 cells. There was no significant difference in absorbance values among three treatment groups at different time points (P ＞ 0. 05). Cell cycle analysis revealed that the proportion of cells at G1 phase was increased, and that at S phase decreased. Conclusion AR pathway may inhibit proliferation of ER-negative MDA-MB-453 breast cells as well as ER-positive MCF-7 cells, by suppressing the process of G1 to S phase progression.     

CD24表达在乳腺浸润性导管癌中的意义

目的 探讨乳腺浸润性导管癌组织中CD24的表达与肿瘤增殖和侵袭的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测142例乳腺浸润性导管痛组织中CD24、Ki67的表达,与其他临床病理参数进行比较;分析57例CD24阳性病例中导管内癌成分与浸润性成分CD24的表达;根据ER和c-erbB-2表达分组,比较各组间CIY24的表达.结果 在乳腺浸润性导管癌中,CD24的表达在患者年龄分组、肿瘤大小及PR、c-erbB-2的表达上差异无统汁学意义,而在有无淋巴结转移、组织学分级、临床分期、ER及Ki67的表达上差异有统计学意义;且CD24表达等级与Ki67的表达等级之间呈正相关.在合并DCIS的IDC中导管内癌成分和浸润性成分CD24的表达差异无统计学意义.在不同的ER和c-erbB-2表达组间CIY24的表达差异有统计学意义.结论 CD24的高表达在乳腺癌的增殖和侵袭中起重要作用.检测C1Y24和Ki67有助于乳腺癌病情的预后判断.     

HER-2阳性乳腺癌中肿瘤浸润淋巴细胞与雄激素受体的相关性研究

  目的  探讨人表皮生长因子受体-2（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）阳性乳腺癌中肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes，TILs）浸润水平与雄激素受体（androgen receptor，AR）表达的关系。  方法  收集2018年3月至2018年11月天津医科大学肿瘤医院收治的448例HER-2阳性乳腺癌患者的临床资料。病理评估TILs浸润水平，免疫组织化学方法检测AR表达情况，分析TILs浸润水平和AR表达与临床病理学参数的关系以及TILs和AR的相关性。  结果  448例HER-2阳性乳腺癌患者中TILs无浸润或低浸润的患者占38.2%（171/448）、中等浸润者占42.2%（189/448）、高浸润者占19.6%（88/448），AR阳性率为62.7%（281/448）。Spearman等级相关分析显示TILs浸润水平与AR表达呈负相关（r=-0.140，P=0.003）。在雌激素受体（estrogen receptor，ER）阳性乳腺癌中，TILs浸润水平和AR表达密切相关（P=0.009）。  结论  HER-2阳性乳腺中TILs浸润水平和AR表达呈负相关，提示HER-2阳性乳腺癌患者可根据TILs的不同浸润水平与AR的表达行精准治疗。      

雄激素受体在乳腺癌细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

Objective To evaluate the expression of androgen receptor (AR) in the breast cancer cell lines and its effect on proliferation of breast cancer cells. Methods The estrogen receptor (ER) -positive MCF-7 and ER-negative MDA-MB-453 cells were involved in this study and cultured in vitro. The expression of AR was detected by using Western blotting. Cell proliferation was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay after the treatment with different concentrations of dihydrotestosterone (DHT) ( 1 x 10 -7, 1 x 10- 8, 1 x 10 -9 mol/L) for 48, 96 and 144 h respectively. Cell cycle was analyzed by flow cytometry following culture for 72 h. Results DHT increased the AR expression in the two breast cancer cell lines. AR pathway could inhibit proliferation of MCF-7 and MDA-MB-453 cells. There was no significant difference in absorbance values among three treatment groups at different time points (P ＞ 0. 05). Cell cycle analysis revealed that the proportion of cells at G1 phase was increased, and that at S phase decreased. Conclusion AR pathway may inhibit proliferation of ER-negative MDA-MB-453 breast cells as well as ER-positive MCF-7 cells, by suppressing the process of G1 to S phase progression.     

Expressions and significances of Nek2 and β-catenin in breast invasive ductal carcinoma

Objective To investigate the expression and significance of NIMA related kinases 2 ( Nek2) and β-catenin (β-cat) in breast invasive ductal carcinoma (IDC) and concomitant ductal carcinoma in situ (DCIS). The roles of Nek2 and β-acat in the development and progression of breast cancer were explored. Methods The protein expression of Nek2 and β-cat in the tissues from 186 patients with IDC, 75 concomitant DCIS, 80 normal tissue adjacent to carcinoma and 40 fibroadenoma of breast was detected by using immunohistochemistry. Their relationship between clinicopathologic parameters was analyzed. Results There were correlations between the Nek2 expression in cytoplasm and grade(x2=8. 756;P<0.05) as well as tumor size (x2=6. 518;P<0.05) in IDC. The positive expression of Nek2 in nuclei was 32/186 and 15/75 in IDC and DCIS, respectively. There were correlations between the β-cat expression on the cytomembrane and grade (x2=45.493;P<0. 01) , TNM stage (x2=9. 510;P<0. 01), node status (Z=-2.035;P<0. 05) and estrogen receptor (ER) status (Z=-3. 004;P<0. 01). The β-cat expression on the cytoplasm was related with TNM stage (x2=8. 194;P<0. 05). The expression of Nek2 and β-cat had no correlation with clinicopathologic parameters in concomitant DCIS (P>0. 05), the Nek2 expression in cytoplasm had a correlation with the β-cat expression in cytoplasm (r=0. 226,P<0.05) in concomitant DCIS, and the same relationship could also be seen in IDC (r=0. 368,P<0.01). There was significant difference in the β-cat expression on the cytomembrane between IDC and concomitant DCIS (Z=-3. 804,P<0. 01). In the normal tissue adjacent to carcinoma and fibroadenoma, the Nek2 expression in cytoplasm and nuclei Was low or negative;the β-cat expression on the cytomembrane was high but that Was low in cytoplasm.Conclusion Centrosome regulatory factor Nek2 and β-cat can support a new way to explore the mechanisms of breast tumorigrenesis.And they may become a new antitumor drug target in the future.     

炎性乳腺癌分子病理学研究进展

炎性乳腺癌(inflammatory breast cancer,IBC)~([1])虽为一种较少见的乳腺恶性肿瘤,但由于它的高侵袭性、高转移复发率和低无病生存率而引起肿瘤学家的关注.而以往病理学者多认为IBC是一种以临床表现为特征的乳腺癌,对其缺乏重视.近年来国外学者们对于其概念和意义有了新的认识,在分子病理学方面的研究进展也很快.但国内研究尚少~([2-3]).笔者拟从几方面介绍其新进展,希望能引起同道们的研究兴趣.     

腋淋巴结阴性乳腺癌中组织蛋白酶D表达意义的比较研究

目的 对组织蛋白酶D(Cath-D)在腋淋巴结阴性(ANN)乳腺癌中不同部位的表达与预后的相关性进行比较性研究。方法 根据术后病理检查腋淋巴结有否转移及根据随访结果选取192例乳腺癌病例作为本项目研究对象,并将其分为ANN预后差组、ANN预后好组和淋巴结阳性(ANP)组3组。采用免疫组化S-P法检测全部病例中Cath-D的表达,根据不同的表达部位,采用三种不同的评价方法分析比较,并用χ2。检验、χ2分割法和u检验进行统计学处理。结果 Cath-D阳性表达为棕黄色着色,定位于部分癌细胞和间质细胞胞质中;ANN预后差组和ANP组癌细胞Cath-D阳性率明显高于预后好组(χ2=23.20,P<0.01);ANP组表达与预后差组间无统计学差异(χ2=0.19,P>0.05);三组间间质细胞Cath-D表达阳性率无统计学差异(χ2=1.56,P>0.05);癌细胞和间质细胞表达均计入阳性率时,其阳性率与仅观察癌细胞表达无显著意义的提高(u1=0.47;u2=1.41;P>0.05)。结论 Cath-D可以作为ANN乳腺癌预后差的标志物之一,仅观察评价其在癌细胞中的表达是比较可靠、实用和简便的方法。