A549细胞条件培养液激活PI3K-Akt1信号通路促人脐静脉内皮细胞存活

目的:研究肺癌A549细胞条件培养液(conditioned medium, CM)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生存活性和凋亡的影响,以及PI3K-Akt信号通路在其中的作用.方法:用制备获得的人肺癌A549细胞CM 培养HUVECs;XTT 法检测HUVECs活性; Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变;FCM法检测细胞的凋亡率; Western印迹法检测Akt总蛋白和磷酸化Akt蛋白表达.分别用特异性PI3K抑制剂 wortmannin(WT)和针对Akt1基因的siRNA (siAkt1)转染HUVECs, RT-PCR法检测Akt亚型mRNA的表达,并观察上述各指标的变化.结果:在CM刺激后24 h, HUVECs活性明显增强(P=0.037),凋亡率下降(P =0.001).CM呈时间依赖性激活HUVECs Akt磷酸化,CM处理后15 min即显示磷酸化Akt水平增高,30 min达高峰,此后呈下降趋势.WT或siAkt1转染均能阻断前述效应.结论:肺癌A549细胞CM经PI3K-Akt途径促进HUVECs存活并抑制其凋亡,其中Akt1起关键作用.     

胸腔镜在不明原因胸腔积液老年患者中的诊断价值

胸腔积液是老年患者常见病、多发病，通过常规胸片、肺部SCT、电子支气管镜、胸水实验室（包括生化、常规、细胞学、CEA、流式细胞学）等检查，仍有部分患者不能明确原因，从而导致误诊或延误治疗。为提高老年患者胸腔积液诊断的准确性，评价内科胸腔镜检查在老年胸腔积液患者中的安全性，我科自2004年6月-2008年8月对常规检查诊断不明或药物治疗效果不好的60例胸腔积液老年患者进行了局麻下内科电子胸腔镜检查，现将结果报告如下。     

舒利迭联合噻托溴铵治疗重度-极重度COPD

目的:观察舒利迭联合噻托溴铵治疗重度-极重度COPD的临床疗效。方法:采用随机、双盲、平行对照试验,47例重度-极重度COPD患者分别给予舒利迭(250μg/50μg)早晚各一次吸入联合噻托溴铵胶囊(18μg)或安慰剂每天上午1粒吸入,治疗1年。在治疗前、治疗1月、3月、12后行肺功能检测;同期采用6 min步行距离评价运动能力,圣乔治呼吸问题调查问卷(SGRQ)评价生活质量。结果:在治疗3月及12月联合治疗组FEV1优于对照组(P均<0.01);在各治疗阶段联合治疗组6 min步行距离及SGRQ总评分均明显优于对照组(P<0.01)。结论:联合噻托溴铵治疗重度-极重度COPD能增加舒利迭对肺功能和生活质量的改善作用,早期改善COPD的运动耐量,延缓肺功能的下降。     

内源性孤啡肽通过调节β1肾上腺素能受体对大鼠缺血性心律失常的影响

目的 探讨内源性孤啡肽（N/OFQ）对大鼠缺血性心律失常的影响以及心肌细胞β1肾上腺素能受体（β1-AR）在其中的作用。方法 采用结扎左冠状动脉前降支（冠脉）的方法制备大鼠急性心肌缺血模型。将60只大鼠按随机数字表法分为3组,即假手术组（Sham组）、冠脉结扎组（CAO组）和孤啡肽受体拮抗剂（UFP-101）预处理组（U+CAO组）,每组20只。3组大鼠分别在冠脉结扎后15 min和1 h 2个时间点各处死10只大鼠。记录心电数据,采用Western blot法分别检测心肌细胞膜以及全细胞β1-AR的表达,RT-qPCR法检测β1-AR mRNA的表达。结果 与Sham组比较,CAO组出现缺血性心律失常,且主要集中在冠脉结扎后15 min内,UFP-101预处理显著降低心律失常发生。15 min 时：与 Sham 组比较,CAO 组全细胞 β1-AR、β1-AR mRNA 表达下调,而细胞膜 β1-AR 上调（均 P＜0.05）,U+CAO组全细胞β1-AR蛋白及其mRNA表达无统计学意义（均P＞0.05）,而细胞膜β1-AR下调（P＜0.05）;与CAO组比较,U+CAO组全细胞β1-AR蛋白及mRNA表达上调,而细胞膜β1-AR下调（P＜0.05）。1 h时：与Sham组比较,CAO组和U+CAO组全细胞β1-AR蛋白及mRNA表达上调,而细胞膜β1-AR下调（均P＜0.05）。结论 内源性N/OFQ可上调心肌细胞膜β1-AR参与大鼠缺血性心律失常过程。     

腺病毒介导反义血管紧张素Ⅱ1型受体cDNA对人肺动脉平滑肌细胞生物学行为的影响

目的探讨腺病毒介导的反义血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1R)cDNA转染对培养的人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)迁移、增殖和凋亡的影响。方法构建重组反义人AT1R腺病毒(AdCMVahAT1)和表达β半乳糖苷酶的对照腺病毒载体AdCMVLacZ,将培养的PASMC分为DMEM组、AdCMVLacZ组和AdCMVahAT1组,分别给予不同的干预因素干预PASMC,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组化及彩色图像分析法检测AT1R的表达情况,并用改良的迁移小室进行细胞迁移实验。又将培养的PASMC分为DMEM组,AngⅡ组,AdCMVLacZ+AngⅡ组和AdCMVahAT1+AngⅡ组,用流式细胞仪检测各组PASMC的增殖指数和凋亡率,绘制DNA合成直方图。结果转染AdCMVahAT1后48h的PASMC,AT1RmRNA明显低于对照组[AT1R/βactin吸光度(A)比值:AdCMVahAT1组为0.48,DMEM组为0.97,AdCMVLacZ组为0.96];AdCMVahAT1组AT1R蛋白表达水平(A值为176.39±21.63)显著低于DMEM组(A值为310.21±29.82)和AdCMVLacZ组(A值为306.45±30.09),差异均有统计学意义(P均<0.01),转染AdCMVahAT1后24h的PASMC迁移距离为(40.93±9.69)μm,显著短于DMEM组的(78.23±11.79)μm和AdCMVLacZ组的(77.80±10.66)μm,差异均有统计学意义(P均<0.01)。给予AngⅡ刺激48h,AngⅡ组PASMC的增殖指数(59.69±3.46)显著高于     

苦参碱对体外人肺癌A549细胞的抑制作用

目的:研究苦参碱对体外培养人肺癌A549细胞的抑制作用及其机制.方法:用不同浓度的苦参碱作用A549细胞24、48、72 h,以MTT法检测苦参碱对A549细胞的抑制作用,流式细胞仪检测凋亡率和细胞周期分布时相,TRAP-ELISA法检测端粒酶的活性.结果:随着时间和浓度的增加,苦参碱对A549细胞的抑制作用逐渐增强(P＜0.01);不同浓度苦参碱(0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)诱导A549细胞的凋亡率分别为3.2%、9.5%、13.4%、17.6%;G0/G1期细胞比例增加,G2/S期细胞比例下降;端粒酶的活性呈浓度和时间依赖性降低.结论:苦参碱可通过抑制端粒酶活性、诱导细胞凋亡抑制体外培养的A549细胞的增殖.     

艾迪对高龄晚期非小细胞肺癌患者生存质量改善效果的观察

目的观察艾迪注射液对高龄晚期非小细胞肺癌患者的生存质量的影响。方法 58例高龄晚期非小细胞肺癌患者分为对照组(支持对症治疗)和治疗组(艾迪注射液+支持对症治疗)。评价治疗组和对照组患者临床症状、日常活动能力、情绪状态等在治疗前后不同时间段的变化。结果治疗组治疗后第1、3个月临床症状、日常功能活动均较治疗前改善不明显,但与对照组相应时间点比较有明显改善(P<0.05)。对照组患者日常活动能力随着时间的推移而明显下降。但治疗组治疗后1、3个月情绪状态较治疗前有明显改善,且与对照组相应时间点比较差异显著(P<0.05)。艾迪治疗组1个月QLQ总评分较治疗前及对照组均显著降低(P<0.05),3个月后总评分有所增加,但仍低于对照组。结论艾迪注射液具有缓解临床症状、改善生存质量等优点,可作为高龄晚期非小细胞肺癌患者姑息治疗的重要辅助用药。     

肺内压力监测联合开胸前肺萎陷技术用于胸腔镜手术的效果

目的 评价肺内压力监测(IPM)联合开胸前肺萎陷技术(PTLCT)用于胸腔镜手术的效果.方法 选择择期行胸腔镜左肺叶楔形切除术的患者96例,性别不限,年龄30～79岁,体重指数(BMI)<30 kg/m2,美国麻醉医师协会分级(ASA)为Ⅰ级或Ⅱ级,采用随机数表法分为4组(n=24):PTLCT组(C组)、-5～5 m...