慢传输性便秘乙状结肠c-kit蛋白和mRNA表达

目的探讨c-kit蛋白和mRNA在慢传输性便秘结肠的表达.方法乙状结肠标本取自12例慢传输性便秘患者和8例年龄相匹配的非梗阻性结直肠癌患者.用Western blot 方法检测c-kit蛋白表达,用RT-PCR方法检测mRNA表达情况.结果聚丙烯凝胶电泳结果显示c-kit蛋白质一145×103的条带,与对照组相比,慢传输性便秘结肠c-kit蛋白表达明显下降(P＝0.021);RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳显示c-kit基因和β-actin(内参照)两条带,经半定量分析发现c-kit mRNA表达降低(P=0.029).结论慢传输性便秘乙状结肠c-kit蛋白和mRNA表达均明显降低,提示c-kit基因表达下调与慢传输性便秘Cajal间质细胞减少有关.     

糖皮质激素受体在创伤失血性休克大鼠肝损伤中的作用

目的 从组织受体水平探讨糖皮质激素受体(GR)在创伤失血性休克后肝组织中的变化及其对肝损伤的作用机制.方法 采用双侧股骨骨折伴失血性休克模型,并对GR进行阻断后再致伤,动态观察伤后8h大鼠肝组织GR、肝脏病理、肝功能生化指标、伤后8h大鼠死亡率等变化.肝组织GR采用免疫印迹法测定其蛋白含量,并进行计算机图像分析.结果 肝组织GR的蛋白含量在创伤失血性休克后1h即开始下降,2h明显低于正常对照组(P＜0.01),6h降至最低,8h仍显著低于正常;光镜下伤后4h-8h肝窦内少许淤血,有散在炎性细胞浸润;血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)伤后4h开始增高,白蛋白下降;大鼠死亡率10%.GR阻断后再致双侧股骨骨折并失血性休克,光镜下伤后2h肝窦内即可见较多炎性细胞浸润,血清ALT、TB在伤后2h即有明显升高(P＜0.01),白蛋白明显下降(P＜0.01);大鼠死亡率明显升高(50%).结论 GR不足可导致严重创伤并失血性休克后肝损伤的发生;且减少越多,肝损害越重,死亡率越高.提示GR在严重创伤休克后肝组织细胞损伤与抗损伤机制方面可能起着重要作用.     

犬急性心肌缺血后左心室功能与抑凋亡蛋白Bcl-xl表达的研究

目的 观察犬急性心肌缺血后左心室壁动度、射血功能、细胞凋亡与心肌组织中Bcl-xl表达的变化.方法 犬30只随机分为实验组15只及对照组15只,实验组结扎左冠状动脉前降支近端,结扎时间分别为10,30,60min,每一时间点5只,对照组游离左冠状动脉前降支近端,不结扎.心肌组织行三苯四氮唑(TTC)染色,梗死区为黄白色,非梗死区为红色.超声心动图测定左室前壁增厚率及左心室射血分数,原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测梗死区心肌组织凋亡细胞数,Western blotting检测梗死区心肌组织Bcl-xl的表达强度变化.结果 TTC染色示左室前壁及部分前间隔染色为黄白色,其余区域为红色.实验组冠脉结扎后10 min,左室前壁增厚率降低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).左心室射血分数未发生明显改变,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).冠脉结扎后30～60 min,前壁增厚率降低与左心室射血分数进一步下降,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).实验组在冠脉结扎后10 min,梗死区心肌TUNEL阳性细胞数与对照组比较差异无统计学意义;冠脉结扎后30～60 min,梗死区心肌TUNEL阳性细胞数明显增加,与对照组比较差异有显著统计学意义(P＜0.01).实验组在冠脉结扎后30min,梗死区心肌Bcl-xl表达增高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).冠脉结扎后60min,梗死区心肌Bcl-xl表达明显增高,与对照组比较差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 急性心肌缺血后,心肌细胞凋亡可能为其早期病理改变,并且与心肌室壁动度与左室收缩功能降低有一定关系,同时抑凋亡基因Bcl-xl表达迅速增加,以对抗促凋亡基因的作用.     

妊娠高血压综合征患者G蛋白变化的研究

人体信号转导系统与血管收缩的关系已成为高血压发病机制研究的热点之一[1] ,Ｇ蛋白是连接多种细胞膜受体与选择性效应器之间信号转导的重要蛋白质。在受体腺甘酸环化酶 (ＡＣ)信号转导系统中 ,存在着两种Ｇ蛋白 ,刺激性Ｇ蛋白 (Ｇｓ)和抑制性Ｇ蛋白 (Ｇｉ) ,它们为不同的受体所激活 ,通过调控ＡＣ活性影响环一磷酸腺苷 (ｃＡＭＰ)的生成 ,进而调节着血管的舒缩功能[1,2 ] 。现已证明 ,妊娠高血压综合征(妊高征 )时外周阻力血管痉挛 ,导致血压升高 ,并带来一系列病理变化。然而 ,在妊高征时是否有Ｇ蛋白的变化 ,目前尚未见文献报道。本研究…     

失血致低血容量性休克大鼠心脏G蛋白表达及纳络酮的影响

目的：探讨纳络酮对失血致低血容量性休克大鼠的治疗作用及其对休克大鼠心脏组织Ｇ蛋白含量的影响。方法：颈总动脉放血,使平均动脉压降至６ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）稳定１小时完成失血致低血容量性休克大鼠模型。２１只大鼠随机均分为：休克组（ＨＳ组）、纳络酮治疗组（ＮＡＬ组）和正常对照组（ＮＳ组）。在观察动脉血压、血气等指标的同时,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ技术测定大鼠伤后６小时心脏组织中Ｇｓａ、Ｇ     

火焰温度及其作用时间对犬皮肤烧伤深度的影响

烧伤在平战时均十分常见,且成人烧伤多见于火焰热力引起。随着燃烧武器的发展,战时烧伤的比例也随之增高,根据历次常规武器战争统计,其发生率约占伤员总数的3％～10％。有关烧伤的临床和病理报道较多,但火焰温度及其作用时间对皮肤烧伤深度影响的文章少见。本实验旨在观察用600℃、800℃及1000℃,分别对皮肤作用不同时间后所造成的烧伤深度,供烧伤防治时参考。     

小牛胸腺素蜇取及其对哮喘豚鼠肺组织Gq蛋白的表达影响

目的从小牛胸腺中提取胸腺素并检测药物指标,观察其对哮喘豚鼠肺组织Gqα表达的影响.方法酸碱沉淀加离心法制备胸腺素,经多肽定量、活性鉴定、细菌培养、毒性试验和热原实验检测其药物指标.卵蛋白雾化吸入致敏法复制哮喘模型,Western blot (蛋白免疫印迹)分析法测定Gqα水平.结果所制胸腺素符合中国药典标准.其治疗哮喘豚鼠后,肺组织Gq α水平显著降低(P＜0 05).结论采用酸碱沉淀加离心法可制备胸腺素,其治疗哮喘的机理可能是通过改变肺组织Gqα水平来达到.     

创伤小鼠脾细胞核因子κB的表达变化

目的：探讨创伤后不同时间点脾细胞核因子kappa B(NFκB)的DNA结合蛋白和NFκB p65蛋白亚型表达的动态变化。方法：采用小鼠双后肢闭合性砸伤+骨折模型,于创伤后1、4、7日处死动物,分离、纯化脾细胞,提取脾细胞核蛋白。用电泳迁移率改变试验(EMSA）检测NFκB的DNA结合活性;用免疫蛋白印迹法（Western blot）检测NFκB p65蛋白亚型表达。结果：脾细胞NFκB的DNA结合活性在创伤后1、4、7日表达明显增高。NFκB p65蛋白亚型在创伤后1、4、7日表达明显增加。结论：创伤可明显增强脾细胞NFκB的DNA结合活性和p65蛋白亚型的表达。在创伤后淋巴细胞活化及全身炎症反应综合征(SIRS)发生、发展过程中可能起重要作用。     

小鼠颌下腺神经生长因子的提取及活性鉴定的初步研究

对神经生长因子（Nerve Growth Factor,NGF）提取纯化、活性鉴定进行了研究。将小鼠颌下腺组织匀浆、离心,取其上清,在不同pH和离子强度,依次通过两个离子交换纤维素层析柱,制得 2.5 S NGF纯品。其分子量约43.5 kD,3种主要组分的等电点分别为8.85、9.10和9.20。用鸡胚背根培养法证明其具有刺激神经生长的作用。