糖皮质激素、糖皮质激素受体和热休克蛋白对大鼠严重创伤后早期肝损伤的作用机制

目的 探讨严重创伤后糖皮质激素(GC)、糖皮质激素受体(GR)、热休克蛋白(HSP70)在肝脏继发性损伤中的作用机制。方法 成年雄性Wistar大鼠88只，随机分成正常对照组、严重创伤组、阻断50％GR伴严重创伤组。采用严重胸部撞击伤伴单侧股骨骨折模型、动态观察创伤后大鼠血清皮质醇浓度、肝组织GR及HSP70、肝脏病理、血清肝功能生化指标等变化。结果 创伤后血浆皮质醇浓度迅速增加，伤后4h达到峰值，24h仍维持在高水平；肝组织GR的结合容量伤后即开始下降，12h降至最低，24h有所回升，HSP70在伤后增加，8h达到高峰，24h仍持续在较高水平；但肝脏病理、血清ALT、TB的改变差异无显著性。使用GR阻断剂后，血浆皮质醇浓度较严重刨伤组明显增加，肝淤血明显，肝窦内有较多炎性细胞浸润；血清ALT、TB在伤后早期即有明显升高；肝组织HSP70较单纯创伤组明显增多。结论 GR不足可导致创伤后继发性肝功能不全的发生；HSP70参与了肝组织细胞抗损伤机制的启动；GC、GR及HSP70在严重创伤后肝组织细胞的损伤与抗损伤机制方面起着重要作用。     

促甲状腺素释放激素对失血致低血容量性休克大鼠心肺功能的影响

目的：探讨促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）抗失血致低血容量性休克的作用和对呼吸频率（ＲＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、血气参数及酸碱平衡紊乱的影响。方法：复制失血致低血容量性休克大鼠模型,观察ＴＲＨ治疗前、后及各组各时间点大鼠ＲＲ、ＭＡＰ、血气和酸碱平衡等各参数的变化。结果：ＴＲＨ组给药后ＭＡＰ即刻升高,５分钟ＭＡＰ达（１４．０±１．３）ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）,较低血容量性休克（ＨＳ）组增高３２％（ｔ＝２．５３１,Ｐ＜０．０５）;休克组大鼠在伤后３６０分钟ＭＡＰ仍较低,ＴＲＨ治疗组ＭＡＰ还比休克组高４２％（ｔ＝３．０１４,Ｐ＜０．０５）。休克组和ＴＲＨ治疗组失血后ＲＲ明显减慢,ＴＲＨ给药后５分钟ＲＲ升为（８０±９）次／ｍｉｎ,较休克组升高７８％（ｔ＝３．８９２,Ｐ＜０．０１）;伤后３６０分钟,ＴＲＨ组ＲＲ达（９９±９）次／ｍｉｎ,比休克组高７１％（ｔ＝３．４５６,Ｐ＜０．０１）。ＴＲＨ降低了肺体指数和肺含水率;升高ｐＨ、ＨＣＯ－３,改善酸中毒和酸碱失衡。结论：ＴＲＨ在失血致低血容量性休克治疗过程中有重要作用,能有效减轻休克的严重程度。     

利用pcDNA 3.0裸质粒探讨创伤愈合动物模型中转入基因的分布规律

目的 通过在Wistar大鼠皮肤伤口局部应用含半乳糖苷酶（LacZ）报告基因的裸peDNA3．0重组质粒,建立创伤愈合转基因治疗动物模型并评价其应用价值。方法 通过建立大鼠全层皮肤切割伤模型,采用自身对照,在治疗侧伤口周围局部注射重组转染裸pcDNA3．0-LacZ质粒,通过B-gal原位染色检测注射3、30、100μg剂量后1、3、6、15天及愈合时的伤口组织标本中报告基因LacZ的表达,确定目标基因表达效率。结果 报告基因LacZ主要表达于皮下成纤维细胞中,100μg剂量有较高表达,表达效率为10．3％,表达时间主要在注射后3-6天,15天时仍可检测到少量表达细胞,愈合时及对照侧各个时相点均未检测到表达。结论 重组的裸pcDNA3．0-LacZ质粒能成功转染伤口的成纤维细胞等修复细胞,表达效率及时间适用于动物创伤愈合的转基因治疗。     

糖皮质激素及其受体在大鼠严重创伤后早期肝脏损害中的变化

目的 探讨严重创伤后血浆糖皮质激素（Glucocorticoid,GC）、肝组织糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor,GR）的变化,及其在肝脏继发性损害中的作用。方法 成年雄性Wistar大鼠176只,随机分成正常对照组、严重创伤组、阻断GR50%伴严重创伤组、阻断GR80%伴严重创伤组。采用严重胸部撞击伤伴单侧股骨骨折模型。动态观察创伤后大鼠血浆皮质醇浓度、肝组织RG、肝脏病理、血清肝功能生化指标等变化。结果 创伤后血浆皮质醇浓度迅速增加,伤后4h达到峰值,24h仍维持在高水平;肝组织GR的结合容量伤后即开始下降,12h降至最低,24h有所回升,但肝脏病理、血清ALT及白蛋白的改变无显著差异。当使用GR阻断剂后,血浆皮质醇浓度较严重创伤组明显增加;肝脏明显淤血,肝窦内有较多炎性细胞浸润,且与GR阻断程度有关;血清ALT在伤早期即有明显升高,白蛋白明显下降。结论 GR不足可导致创伤后肝功能损害的发生;GR可作为反映早期肝功能损害的重要指标。     

神经生长因子治疗10例脑梗塞的疗效

神经生长因子治疗１０例脑梗塞，总有效率达１００％，以病程短，病情轻，中型，范围小者疗效更佳。其治疗机理可能与ＮＧＦ在脑梗塞后促进神经纤维增生，预防神经细胞坏死，营养神经细胞等有关。结果表明ＮＧＦ治疗脑梗塞疗效确切且未发现不良反应，脑梗塞患者可试用。     

用标准镜头拍摄医学实验标本照片的4点体会

<正>医学实验研究离不开标本照片,标本照片在医学实验研究中有着重要的作用,它能非常真实地反映组织的病理变化.但拍摄标本不同于静物摄影,从事医学实验标本的摄影工作者不但要掌握一般的摄影技术,更重要的是要掌握往往容易忽略的拍摄标本照片的特殊方法.作者从1979年起,即开始探索用标准镜头拍摄医学试验标本的方法,积累了一些实用性经验,现介绍如下.     

缺血半暗带组织中水通道蛋白4表达的初步研究

背景：在组织学和细胞学上对半暗带的认识已取得了进展，而关于水通道蛋白(aquaporin-4，AQP4)与半暗带和磁共振成像相结合的报道不多。目的：探讨水通道蛋白-4(aquaporin-4，AQP4)在缺血半暗带(ischemic penumbra，IP)中的表达规律。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：健康Wistar大鼠35只，体质量300～400g，雌雄不拘，随机分为对照组和栓塞组；栓塞组又分为大脑中动脉栓塞(MCAO)后15，30min，1，3，6，24h组，每组各5只大鼠。干预：对照组的大脑中动脉不栓塞，其余操作同栓塞组。在对照组术后30min、各栓塞组于栓塞结束时行脑部T1WI，T2WI和DWI扫描。采用刘梅丽等方法界定影像半暗带，计算影像半暗带和中心梗死区的相对表观扩散系数(ADC1和ADC2)，将缺血脑组织进行红四氮唑(TTC)染色，并与DWI图像对比。取最大层面的影像半暗带组织进行病理观察、免疫组织化学及原位杂交实验，用图像分析检测AQP4蛋白、基因的表达量。并进行统计分析。主要观察指标：①影像半暗带组织病理观察结果。②影像半暗带和中心梗死区的相对表现扩散系数。③AQP4蛋白、基因的表达量。结果：对照组的DWI和T2WI未见异常，ADCR为(98．7&;#177;0．8)％，AQP4蛋白表达平均值为(7．9&;#177;0．5)％，基因表达平均值为0．5&;#177;0．06。栓塞后15min即在DWI上出现高信号；平均于栓塞后1．4h在T2WI显示高信号，ADC1在24h内始终呈下降趋势，在1h内迅速下降；而ADC2呈现先降后升的变化规律。在1h内AQP4表达迅速上调，1～24h仍缓慢增加，AQP4表达与ADC1呈显著负相关(r=-0．989，P&;lt;0．001)。影像半暗带与组织半暗带都具有相同的病理改变—细胞性水肿。结论：影像半暗带与组织半暗带是等值的，半暗带的病理基础之一是细胞内水肿，AQP4表达增强是缺血半暗带形成的重要原因，半暗带组织的ADC值下降可以间接反映AQP4表达上调的水平。     

褪黑激素与癌症

本文探讨了褪黑激素与癌症的关系。通过复习文献，从褪黑激素的催眠、清除自由基、增加免疫力三个方面阐述其在防癌抗癌中的作用。结果表明：褪黑激素可以预防、治疗和控制癌症，且因其是内源性物质，无任何副作用。     

核因子-κB、IκB在创伤失血性休克大鼠肝损伤中的作用

目的 从组织受体水平探讨核因子-κB(NF-κB)、IκB在创伤失血性休克后肝组织中的变化及其在肝损伤中的作用机制.方法 雄性健康Wistar大鼠36只,采用双侧股骨骨折伴失血性休克模型,随机分成正常对照组6只,双侧股骨骨折伴失血性休克组30只.动态观察伤后0.5、2、4、6、8 h大鼠肝组织核因子-κB、IκB、肝脏病理、肝功能、TNF-α、IL-6等变化.肝组织NF-κB采用EMSA法测定结合活性、IκB采用免疫印迹法测定其蛋白含量,并进行计算机图像分析.数据采用SPSS 12.0软件分析,两组间比较采用配对资料的t检验.结果 NF-κB的活性伤后迅速升高,伤后2 h与正常对照相比,差异具有统计学意义,[(8.4±0.7) vs (2.3±0.4),P＜0.01];伤后6 h达到高峰,和正常组相比,P＜0.01[(43.4±4.6) vs (2.3±0.4),P＜0.01].IκB伤后迅速降低,伤后2 h和正常对照相比,差异具有统计学意义[(17.0±2.0) vs (26.4±2.2),P＜0.01].伤后6 h继续下降至比较低的水平,和正常组相比,P＜0.01[(6.5±1.1) vs (26.4±2.2),P＜0.01].TNF-α、IL-6伤后逐渐升高,并于伤后6 h达到高峰:和正常组相比,P＜0.01[TNF-α,(173.7±12.1) vs (30.8±1.8)pg/ml,P＜0.01;IL-6,(175.5±12.5) vs (10.4±0.7)pg/ml,P＜0.01].光镜下伤后4～8 h肝窦内有少许淤血,有散在炎性细胞浸润;血清ALT、TB伤后4 h开始增高,和正常组相比,P＜0.01[ALT,(640.6±80.2) vs (536.8±60.0)nmol·L-1,P＜0.01;TB,(4.7±1.1) vs (1.6±0.2)mol/L,P＜0.01];白蛋白伤后4 h明显下降,和正常组相比,P＜0.01[(13.3±1.6) vs (20.6±3.4)g/L,P＜0.01].结论 NF-κB及其抑制蛋白IκB参与了严重创伤失血性休克后肝损伤的发生;且NF-κB增高越多、IκB减少越明显,肝损害越重.提示NF-κB及其IκB在严重创伤休克后肝组织细胞损伤与抗损伤机制方面起着重要作用.     

彩色多普勒超声对大鼠早孕胚胎组织细胞凋亡及Bcl-xl表达的影响

目的 探讨诊断用彩色多普勒超声对大鼠早孕胚胎组织细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-xl基因(Bcl-xl)表达的影响.方法 彩色多普勒超声固定持续照射孕鼠子宫体表位置,60只大鼠按照射时间分为0、5、10、20、30、60 min组.利用Western blotting检测胚胎组织Bcl-xl表达强度变化,流式细胞仪检测胚胎组织凋亡细胞百分率.结果 各组胚胎组织中Bcl-xl蛋白均有表达,照射20 min、30 min组较0 min组Bcl-xl表达增强(P<0.05),照射60 min组较 0 min组Bcl-xl表达减弱(P<0.05).各组胚胎组织均存在凋亡细胞,照射30 min组、60 min组凋亡细胞百分率高于0 min组 (P<0.05).结论 诊断用彩色多普勒超声过度照射早孕大鼠,可诱发胚胎组织细胞凋亡,抑凋亡基因Bcl-xl参与了细胞凋亡的调节过程.