miR-762在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞生物学行为的影响

背景与目的：miR-762在多种恶性肿瘤中存在表达异常,参与肿瘤的增殖、凋亡及侵袭转移。观察miR-762在胰腺癌组织和细胞系中的表达及对胰腺癌细胞增殖、侵袭转移的影响。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）技术检测于河北医科大学第四医院行胰腺癌根治术的胰腺癌组织和细胞株中miR-762的表达。通过Lipofectamine ^TM 2000将miR-762模拟物（mimics）、miR-762抑制物（inhibitors）及其阴性对照序列（scramble序列）分别转染胰腺癌PANC-1细胞。采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）实验检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞侵袭转移能力;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transformation,EMT）相关分子标志物表达。结果：胰腺癌组织中miR-762 mRNA表达量显著高于癌旁组织（P<0.01）。胰腺癌细胞株BxPC-3、PANC-1、AsPC-1、SW-1990中miR-762 mRNA的表达量也显著高于正常胰腺上皮细胞HPDE（P<0.01）。转染miR-762 mimics后PANC-1细胞miR-762 mRNA表达量显著增加,而转染miR-762 inhibitors后PANC-1细胞miR-762 mRNA表达量显著降低（P<0.01）。同时miR-762 mimics组450 nm处的吸光度（D ₄₅₀ ）值、细胞迁移距离和穿膜细胞数及间质表型细胞标志物N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）表达量显著增加,细胞凋亡率及上皮细胞标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达量显著降低;而miR-762inhibitors组D ₄₅₀ 、细胞迁移距离和穿膜细胞数及间质表型细胞标志物N-cadherin、vimentin表达量显著降低,细胞凋亡率及上皮细胞标志物E-cadherin表达量显著增加（P<0.05）。结论：miR-762在胰腺癌组织和细胞株中高表达,上调miR-762表达可能通过调控N-cadherin、vimentin、E-cadherin表达促进EMT进程,从而增强PANC-1细胞的增殖和侵袭转移能力。     

胃癌中PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白表达及其预后意义评价

目的 探讨PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白表达在胃癌发生、发展、侵袭转移及预后评价中的作用.方法 随访手术胃癌患者,应用免疫组化方法检测有随访资料的胃癌组织和正常胃黏膜组织中PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白的表达.结果 胃癌组织中PTEN表达降低,IGF-1、IGF-1R表达增高;PTEN、IGF-1、IGF-1R表达与胃癌临床生物学行为有关,PTEN蛋白表达在无淋巴结转移组高于淋巴结转移组,Ⅰ～Ⅱ期组高于Ⅲ～Ⅳ期组.IGF-1、IGF-1R蛋白表达在进展期胃癌组高于早期胃癌组,低分化组高于高中分化组,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组;Ⅰ～Ⅱ期组低于Ⅲ～Ⅳ期组;进展期胃癌中PTEN蛋白表达阳性患者生存率优于阴性患者,IGF-1、IGF-1R蛋白表达阳性患者生存率差于阴性患者.结论 PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白表达改变在胃癌发生、发展中起一定作用,可以帮助判断预后.     

CIK细胞对胃癌OCUM-2MD3细胞体内外杀瘤活性的实验研究

目的：研究正常人细胞因子激活的杀伤细胞（Cytokine-induced killer,CIK)对人胃癌细胞株OCUM－2MD3的体外细胞毒活性以及对胃癌腹膜移植模型的体内抗肿瘤作用。方法：取正常人外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)，加入γ－IFN、IL－2、抗－CD3单抗和IL－1，体外诱导成CIK细胞，用流式细胞仪对细胞作动态表型分析，用MTT法测定CIK细胞体外对OCUM－2MD3的细胞毒活性，并与CD3AK作对比。在Balb/c裸小鼠腹腔内接种OCUM－2MD3细胞，观察CIK细胞对荷瘤鼠的抑瘤作用。结果：CIK细胞在培养2周左右获得大量增殖，CD3^ CD56^ 双阳性细胞大量增殖达1000倍以上；体外实验证明，CIK细胞对OCUM－2MD3有明显的细胞毒活性，对比CD3AK其抑瘤率与85％与62．8％（P＜0．05）。体内实验表明，CIK细胞能够显著抑制癌性腹水的生长，其抑瘤率可达100％；肿瘤标志物CEA含量明显降低。结论：CIK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞，具有较强的体内外抗胃癌细胞活性，具有明显的抑制癌性腹水的生长的作用，有可能用于临床上晚期胃癌的过继性免疫治疗。     

胃癌术后下肢深静脉血栓危险因素的Meta分析

目的 探讨胃癌患者术后发生下肢深静脉血栓（DVT）的危险因素,为胃癌术后DVT防治提供依据。方法 检索2023年4月前PubMed、Embase、Web of Science、Ovid、Scopus和Cochrane library英文数据库以及中国知网、万方、维普、CBMdisc发表的有关胃癌术后DVT危险因素文献,提取的数据采用Revman 5.4.1软件进行Meta分析。结果 共纳入15项病例对照试验3 456例患者。胃癌患者术后发生DVT的重要危险因素包括性别（OR=1.98,95%CI:1.52～2.58,P<0.000 01）、体质指数（SMD=0.36,95%CI:0.10～0.62,P=0.007）、开放手术（OR=1.42,95%CI:1.11～1.82,P=0.000 5）、冠心病（OR=2.29,95%CI:1.58～3.34,P<0.000 1）,而手术时长（SMD=0.00,95%CI:-0.19～0.18, P=0.98）、血小板计数（MD=13.37,95%CI:-5.34～32.07, P=0.16）、高血压（OR=1.21,95%CI:0....     

纳米炭淋巴示踪剂在进展期胃癌根治术中的应用价值

目的 探讨纳米炭淋巴示踪剂在进展期胃癌根治术中的应用价值。方法 选取2013年10月-2014年5月河北医科大学第四医院外三科进展期胃癌患者56例,采用随机数字表法将患者分为纳米炭组和对照组,各28例。患者均接受胃癌根治术D2式全胃切除术,纳米炭组在手术过程中给予纳米炭示踪剂,对照组则不给予。标本离体后,寻找淋巴结,并记录检获淋巴结数目、直径和所需时间|纳米炭组记录淋巴结黑染,分组送病理检查,常规HE染色,显微镜观察淋巴结肿瘤转移情况。结果 纳米炭组淋巴结检获（43.8±10.3）枚,高于对照组的（31.4±8.6）枚（t=6.45,P=0.002）|检获所需时间（19.5±4.9）min短于对照组的（31.7±5.3）min（t=4.52,P=0.013）。纳米炭组检获直径＜5 mm的淋巴结率为58.5%（422/721）,高于对照组的37.9%（209/551）（χ2=53.01,P＜0.05）|纳米炭组黑染检获最小淋巴结直径为（1.7±0.5）mm,小于对照组的（2.2±0.7）mm（t=3.16,P＜0.05）。纳米炭组检获淋巴结转移率为34.3%（247/721）,高于对照组的17.4%（96/551）（χ2=44.95,P＜0.05）。纳米炭组黑染率为84.9%（612/721）,黑染淋巴结转移率为38.1%（233/612）,高于未黑染淋巴结转移率12.8%（14/109）（χ2=26.15,P＜0.05）。黑染淋巴结转移率亦高于对照组淋巴结转移率（χ2=60.94,P＜0.05）。结论 纳米炭淋巴示踪剂在进展期胃癌淋巴结清扫中可达到良好的淋巴结示踪效果,提高了淋巴结检出数目及小淋巴结检出数目。     

胃癌组织中runx3 mRNA和蛋白的表达及其临床意义

目的: 探讨runx3基因mRNA及其蛋白在胃癌与正常胃粘膜组织中的表达差异及其临床病理相关因素之间的关系. 方法: 采用逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot技术对临床60例胃癌新鲜标本及其周围正常粘膜组织中runx3基因和蛋白的表达进行检测,并对其表达和各临床病理参数的关系进行分析. 结果: RT-PCR结果显示runx3mRNA在胃癌组织标本中的表达量相对值(0.7542±0.1284)低于正常胃癌粘膜组织中的表达量(0.8427±0.0541),两组比较差异有统计学意义(t=4.941, P＜0.0001);Western Blot结果显示runx3蛋白在胃癌组织标本中的积分光密度值(10828±988.9)明显低于在正常胃粘膜组织中的光密度值(47833±7566),两组比较差异有统计学意义(t=35.57, P＜0.0001). 结论: runx3 mRNA及其蛋白在胃癌组织中的表达量明显低于正常组织. Runx3基因的表达异常在胃癌的发生发展过程中起着重要作用.     

老年胃癌原发灶与淋巴结转移灶体外化疗药敏性的差异及意义

目的比较老年胃癌原发灶与淋巴结转移灶体外化疗药敏性的差异并探讨其意义。方法对35例伴淋巴结转移的老年胃癌患者(≥60岁)和31例对照组胃癌患者(<60岁)的肿瘤原发灶、淋巴结转移灶进行MTT法原代细胞培养化疗药敏性实验,比较不同病灶肿瘤细胞对11种化疗药物敏感性的差异。结果老年组患者有6/11种化疗药物对原发灶、淋巴结转移灶的肿瘤细胞抑制率不同(均P<0.05),其中L-OHP、CDDP、MMC、THP对转移淋巴结肿瘤细胞抑制率明显低于原发灶(均P<0.05),PTX、EPI对原发灶肿瘤细胞抑制率明显低于淋巴结转移灶(均P<0.05)。与对照组比较,原发灶5-FU、PTX、EPI、MMC、MTX对老年患者肿瘤细胞抑制率低于对照组(均P<0.05);转移灶中5-FU、L-OHP、CDDP对老年患者肿瘤细胞抑制率较对照组降低(均P<0.05)。结论老年胃癌淋巴结转移灶对化疗药物敏感性与原发灶及对照组比较均存在异质性;老年肿瘤原发灶的化疗药敏性结果不能准确反映转移淋巴结的耐药性。     

重症急性胰腺炎大鼠B淋巴细胞、IgG、IgM、IgA变化及乌司他丁早期干预的实验研究

目的观察重症急性胰腺炎及乌司他丁干预时B淋巴细胞、IgG、IgM、IgA的变化。方法SD大鼠随机分为假手术组（F组），SAP组及药物治疗组（W组）。SAP组及W组大鼠经胰管注入5％牛磺胆酸钠0．11ml／100g，制备SAP大鼠模型，W组大鼠开腹后轻轻翻动胰腺后关腹。然后W组经颈静脉给予乌司他丁1000U／100g，F组及SAP组颈静脉输注生理盐水1ml／100g。检测术后1、2、6、12．24h血B淋巴细胞百分比率及血清IgG、IgM、IgA含量及乌司他丁干预时的变化。结果SAP时B淋巴细胞百分比率、IgG、IgM、IgA含量明显降低（P〈0．01）；乌司他丁6h治疗组的B淋巴细胞百分比率及IgG、IgM、IgA含量均分别明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。结论SAP时大鼠体液免疫功能减退，乌司他丁可明显提高SAP大鼠体液免疫力。     

胃癌血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA联合检测的意义

目的联合检测胃癌患者血清及骨髓中糖类抗原72-4(CA72-4)、胃癌相关抗原(MG7-Ag)、癌胚抗原(CEA)含量,评价三者联合检测用于胃癌诊断的价值。方法应用酶联免疫吸附测定法、放射免疫测定法对61例胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量进行检测,并对结果进行分析。结果胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量均明显高于正常对照组(均P<0.01);三者联合检测较单一指标检测准确率明显升高(均P<0.05)。结论联合检测血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量可提高胃癌诊断的阳性率。     

4-1BBL基因转染对小鼠体内胃癌细胞生长的影响

目的观察共刺激分子4-1BBL基因导入小鼠胃癌MFC细胞后在小鼠体内诱导的抗肿瘤效应以及对小鼠免疫状况的影响。方法用脂质体法把pMKITneo/4-1BBL和pMKITneo质粒导入615小鼠胃癌细胞MFC内,再用MFC、MFC/pMKITneo和MFC/4-1BBL细胞分别接种615小鼠,观察其成瘤情况,并测定肿瘤细胞的凋亡率及外周血的CD4~+、CD8~+T细胞和NK细胞的含量。结果4-1BBL基因转染后的胃癌MFC细胞在615小鼠体内成瘤所需的时间长、瘤体的重量轻；且MFC/4-IBBL组的癌细胞凋亡率(22．45±4．11)%明显高于MFC组(18．47±3．34)%及MFC/pMKITneo组(17．87±4．04)%(P＜0．05)；MFC、MFC/pMKITneo组小鼠外周血CD8~+T、NK细胞数明显低于正常对照组和MFC/4-1BBL组(P＜0．05),且MFC、MFC/pMKITneo两组间差异无统计学意义(P＞0．05)。结论4-1BBL基因导入胃癌MFC细胞后能够提高荷瘤机体的免疫能力、延缓肿瘤的发生、抑制肿瘤的发展、促进肿瘤细胞的凋亡。