CD44v6 mRNA在原发性肝癌患者外周血中检测的临床意义

目的：检测原发性肝癌（primary hepatocellular neoplasms，PHC）患者外周血及组织中的CD44v6 mRNA表达，并探讨其临床意义。方法：采集60例PHC患者、40例肝良性疾病（10例肝血管瘤，10例肝囊肿，10例肝硬化，10例慢性肝炎）患者、30例健康志愿者的外周血，用RT—PCR方法检测外周血中CD44v6 mRNA的表达。同时RTPCR检测PHC患者的肝癌组织、癌旁及正常肝组织中CD44v6 mRNA的表达。结果：PHC患者外周血中CD44v6 mRNA检出率为53％（32／60），而肝癌组织中CD44v6 mRNA检出率为75％（27／36），癌旁组织中检出率为17％（6／36）。在肝癌组织中不表达CD44v6m RNA的肝癌病例，40倒肝良性疾病患者和健康志愿者外周血中，以及正常肝组织中均未检测出CD44v6 mRNA。PHC患者外周血中CD44v6 mRNA检出率与肿瘤大小、门静脉癌栓、血管浸润、肝内外转移密切相关（P〈0．05），而与肿瘤细胞分化程度及血清AFP水平无相关性（P〉0．05）。结论：外周血CD44v6 mRNA可能作为肝癌外周血微转移检测的特异性标志物。其检测结果有助于判断PHC患者的预后，监测其复发以及对PHC的鉴别诊断。     

肿瘤的分子靶向治疗进展

肿瘤的分子靶向治疗(molecular targeted therapy,MTT)指针对肿瘤相关基因及其表达产物或表达过程,通过阻断肿瘤或相关细胞的信号转导改变基因表达,从而抑制甚至杀死肿瘤细胞的药物治疗方法.     

来氟米特在大鼠异种心脏移植排斥反应中对NF-κB P65的影响

目的 复制小鼠到大鼠异种心脏移植模型,探讨来氟米特(Ieflunomide,Lef)在大鼠异种心脏移植排斥反应中对NF-κB P65的影响.方法 实验动物按随机数字表法分成4组,每组6只空白移植组、环孢素A(CsA)组、来氟米特(Lef)组、Lef CsA组.采用免疫组化法和蛋白印迹杂交法检测各组移植心肌组织中NF-κB P65的表达;凝胶电泳迁移率法检测NF-κB DNA结合活性.结果单用CsA不能延长移植心脏存活时间[(2.50±1.05)d],也不能抑制移植心肌NF-κB P65蛋白的表达(263.09±28.81,IOD)和NF-κB DNA结合活性(227.49±14.83,IOD);而单用Lef可显著延长移植心脏存活时间[(4.17±1.33)d],也能显著抑制移植心肌NF-κB P65蛋白的表达(173.48±5.85,IOD)和NF-κB DNA结合活性(109.96±12.46,IOD),与空白移植和CsA组比较,均有显著性差异(P＜0.05).Lef与CsA联合应用使移植心脏存活(6.50±2.56)d,抑制移植心肌组织中NF-κB P65蛋白的表达(67.79±3.79,IOD)和NF-κB DNA结合活性(43.61±7.42,IOD)最为显著,与其他3组比较,均有显著性差异(P＜0.05).结论 在大鼠心脏异种移植中Lef与CsA联用可通过显著抑制NF-κB P65蛋白表达和NF-κB DNA结合活性来延长移植心脏的存活时间,二者具有免疫协同作用.     

siRNA沉默HYAL1基因表达对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

目的研究RNA干扰对透明质酸酶基因HYAL1的表达以及对人乳腺癌细胞侵袭力的影响。方法体外化学合成HYAL1序列特异性双链RNA（dsRNA）,在脂质体（SiPORT Lipid）的介导下转染人人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA—MB-453S、ZR-75和ZR-75-30。荧光共聚焦显微镜下观察转染效率,RT—PCR分析HYAL1 mRNA的表达,体外实验测定肿瘤细胞穿透matrigel的能力。结果4种乳腺癌细胞株的HYAL1基因的表达均被HYAL1-siRNA有效封闭,HYAL1 mRNA相对水平明显降低（P〈0．05）。转染48h后4种人乳腺癌细胞的侵袭力均明显降低（P〈0．01）。结论HYAL1-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株HYAL1基因的表达,降低人乳腺癌细胞的侵袭力。     

人乳腺癌MCF-7他莫昔芬耐药细胞株的建立及鉴定

目的 构建人乳腺癌细胞MCF-7他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)耐药细胞模型,并鉴定其耐药性.方法 采用高浓度短时间4-羟他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen,OHT)冲击法,诱导人乳腺癌MCF-7/TAM耐药细胞株.通过细胞形态学观察、生长曲线、细胞倍增时间、药物毒性实验、细胞周期及凋亡相关蛋白BI...     

The Effects of PDTC plus Leflunomide and Cyclosporine on the NF-κB Signaling Pathway in Mouse-to-rat Cardiac Xenografts

In this study, the effects of pirrolidine dithiocarbamate （PDTC） plus leflunomide （Lef） and cyclosporine （CsA） on the NF-κB signaling pathway in mouse-to-rat cardiac xeno-transplantation models were investigated. NIH mice and Wistar rats served as donors and recipients respectively. Mouse-to-rat cardiac xenotransplantation was performed. The recipients were divided into 5 groups： group A （the control group）, group B （PDTC group）, group C （PDTC plus CsA group）, group D （PDTC plus Lef group） and group E （PDTC plus Lef and CsA group）. The expressions of IKKa/[3, NF-κB-P65, IκBct, ICAM-1 and NF-κB DNA binding activity in xenograft tissues were determined by immunohistochemistry and Western blot as well as electrophoretic mobility shift assay （EMSA）. The median survival time of cardiac xenografts in the control group, PDTC group, PDTC plus CsA group, PDTC plus Lef group and PDTC plus Lef and CsA group was （2.17±0.41）, （2.33±0.52）, （4.67±1.21）, （7.00±1.79） and （9.00±1.41） days respectively. The survival time of xenografts in the PDTC plus Lef and CsA group was significantly longer than that in other four groups （P〈0.05 for all）, that in the PDTC plus Lef group longer than that in the control group, PDTC group and PDTC plus CsA group （P〈0.05 for all）, that in PDTC plus CsA group longer than the control group and PDTC group （P〈0.05 for all）. The expressions of IKKα/β, NF-κB-P65, IκBα and ICAM-1 and NF-κ3 DNA binding activity were notably increased in mouse-to-rat cardiac xenografts. The expressions were decreased in the control group, PDTC group, PDTC plus CsA group, PDTC plus Lef and PDTC plus Lef and CsA group in turn. It was concluded that PDTC plus Lef and CsA can significantly suppress the expressions of IKKα/β, NF-κB-P65, IκBα, ICAM-1 and NF-κB DNA binding activity, thereby prolonging the survival of the cardiac xenografts.     

EphB4在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的 探讨EphB4在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学S-P法榆测65例浸润性导管癌以及12例癌旁乳腺组织中的EphB4、ER、PR、CerBb-2、P53的表达.结果 EphB4在65例乳腺浸润性导管癌中的表达明显高于癌旁乳腺组织(P<0.05),EphB4的表达与CerBb-2及肿瘤组织学分级呈正相关(P<0.05);与ER、PR及淋巴结转移元相关性(P>0.05).结论 EphB4 在乳腺癌的发展中起着重要作用.     

来氟米特和环孢素A对异种心脏移植排斥反应中核因子κB信号传导的抑制作用

目的 探讨联合应用来氟米特(LeD和环孢素A(CsA)对大鼠异种心脏移植排斥反应中核因子kB(NF-kB)信号传导通路中核因子出抑制因子激酶α/β(IKKα/β)、NF-kB P65、核因子kB抑制因子α(IkBα)、细胞问粘附分子-1(ICAM-1)表达以及NF-kB DNA结合活性的影响.方法 以NIH小鼠为供者,Wismr大鼠为受者,施行颈部心脏移植,CsA组受者术后接受CsA腹腔注射,Lef组受者术后接受Lef灌胃,联合用药组受者术后接受CSA和Lef治疗,另设术后不接受任何药物处理的空白对照组.术后观察移植心脏存活时间,发生排斥反应时,切取移植心脏,进行组织病理学观察,采用免疫组织化学和Western印迹法检测各组移植心肌组织中IKKα/β、NF-kB P65、IkBa和ICAM-1的表达,凝胶电泳迁移率法检测NF-kBDNA结合活性.结果 空白对照组、CsA组、Lef组及联合用药组移植心脏的存活时间分别为(2.17±0.41)d、(2.50±1.05)d、(4.17±1.33)d和(6.50±2.56)d,联合用药组明显长于其它3组(P<0.05),Lef组明显长于空白对照组(P<0.05).4个组心肌组织中IKKα/β、NF-KB P65、IKBα和ICAM-1的表达由强到弱依次为空白对照组、CsA组、Lef组、联合用药组,其电泳条带积分吸光度值显示,Lef组的IKKα/β、NF-kB P65、IkBα和ICAM-1的表达明显低于空白对照组和CsA组(P<0.05),而联合用药组明显低于其它3组(P<0.05).Lef组的NF-kBDNA结合活性明显低于空白对照组及CsA组,联合用药组的NF-kDNA结合活性明显低于其它3组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 联合应用Lef和CsA可显著延长大鼠移植的异种(小鼠)心脏的存活时间,这可能与NF-kB信号通路中的IKKα/β、NFkB P65、IkBα、ICAM-1表达及NF-kB DNA结合活性受到抑制有关.     

NF-κB抑制剂PDTC增敏TNF-α对乳腺癌细胞的毒性作用

目的 :探讨核因子κB(nuclearfactorkappaB)活化抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (pyrro1idinedithiocarbamate,PDTC)对肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF -α)细胞毒性作用的影响。方法 :用MTT法观察TNF -α、PDTC及二者联合作用对乳腺癌细胞系MCF - 7、MDA -MB - 4 35s体外生长的影响。将MDA -MB - 4 35s细胞接种于雌性BALB/c纯系小鼠肾包膜下复制出移植乳腺癌动物模型 ,观察TNF -α、PDTC及联合作用对体内移植肿瘤生长的影响。结果 :单用TNF -α(小于或等于 2 0 0 0U/ml)或PDTC均不影响两种乳腺癌细胞的体外生长 ,但是先PDTC(5 0 μmol)作用 1h ,再应用TNF -α(2 0 0 0U/ml)即可明显地抑制乳腺癌细胞的生长。动物实验中治疗组应用TNF -α(7.5× 10 6U/kg/次 ,2次 /日 ,ip) +PDTC(5 0mg/kg/次 ,2次 /日 ,ip) ,肿瘤平均体积为 1.0 8± 0 .32mm3 ,明显小于对照组平均瘤体 11.6 7± 0 .5 3mm3 (P <0 .0 1) ,单用TNF -α组(10 .96± 1.0 4mm3 )及PDTC组 (11.72± 0 .73mm3 )与对照组比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :NP -κB抑制剂PDTC能够显著增敏TNF -α对乳腺癌细胞的毒性作用 ,抑制乳腺癌细胞的生长。     

核因子κB在人乳腺癌组织中的表达及其意义

目的　探讨人乳腺癌组织中核因子κB(nuclearfactorkappaB ,NF κB)的表达及其激活与乳腺癌恶性潜能的关系。方法　应用免疫印迹杂交法 (Westernblot)测定 2 6例乳腺癌及 12例癌旁乳腺组织标本的NF κB p65蛋白表达水平 ,以及应用凝胶电泳迁移率法 (electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)测定NF κB的DNA结合活性。结果　乳腺癌组织中NF κB p65蛋白表达水平及NF κB的DNA结合活性均明显高于癌旁组织 (P <0 .0 1)。雌激素受体 (ER )阴性的乳腺癌组织中NF κB的活性显著高于ER阳性的乳腺癌组织 (P <0 .0 1)。有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中NF κB的活性高于无淋巴结转移的乳腺癌组织 (P <0 .0 5 )。结论　NF κB的活化可以影响乳腺癌的发展及恶性潜能。