HLA新等位基因B*5827核苷酸序列的分析

目的 确认人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)新等位基因B*5827并分析其核苷酸序列.方法 用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针对1份HLA分型反应异常的血样进行基因分型,并用基因克隆测序技术正反向测定DNA序列.结果 测序结果显示HLA-B位点有1个与已知HLA等位基因序列均不同的新等位基因,该等位基因与HLA-B*5820序列同源性最高.但在第3外显子存在8个碱基的差异,分别为nt 290(G＞C)、nt 346(T＞A)、nt 390(A＞C)、nt 404(G＞C)、nt 413(C＞G)、nt 471(A＞G)、nt 486(A＞G)和nt 487(C＞A).碱基的不同导致了氨基酸不同nt 97(ser＞arg)、nt115(phe＞tyr)、nt 130(ser＞arg)、nt 157(thr＞ala)和nt 162(thr＞glu),其中nt 404和nt 413是同义突变.结论 该等位基因为HLA新等位基因,基因序列已提交至GenBank数据库,提交号为GU071234,于2010年1月被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*5827.

Abstract：

Objective To investigate the molecular basis for a novel human leukocyte antigen(HLA)allele B * 5827. Methods DNA from the proband was analyzed by polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide (PCR-SSO) typing. The amplified product was sequenced bidirectionally. Results Abnormal HLA-B locus was observed and its nucleotide sequence was different from the known HLA-B allele sequences, with highest homology to HLA-B * 5820 allele. It differs from HLA-B * 5820 by 8 nucleotide substitutions in exon 3, i. e. , nt 290 (G＞C), nt 346 (T＞A), nt 390 (A＞C), nt 404 (G＞C),nt 413 (C＞G), nt 471 (A＞G), nt 486 (A＞G) and nt 487 (C＞A), resulting in an amino acid change from ser＞arg at nt 97, phe＞tyr at nt 115, ser＞arg at nt 130, thr＞ala at nt 157 and thr＞glu at nt 162.Nucleotide differences of nt 404(G＞C) and nt 413(C＞G) did not change amino acid. Conclusion The sequences of the novel allele have been submitted to GenBank (access No. GU071234). A novel HLA class Ⅰ allele B * 5827 has been officially assigned by the WHO HLA Nomenclature Committee in Jan 2010.     

氚—胸腺嘧啶核苷掺入率对骨髓造血细胞低温保存效果的评价

本研究利用氚－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入率液体闪烁测定法对骨髓造血细胞低温保存后的活力进行了评价，并对台盼兰拒染率、粒－巨系造血祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率测定三种方法进行了比较，结果表明：＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率测定直接反应骨髓造血细胞冻存前后的ＤＮＡ合成状态，方法相对较简便，而且敏感性、可靠性高，克服了其他两种方法的局限性，值得推广应用。骨髓造血细胞在不同温     

SUCCESSFUL CORD BLOOD TRANSPLANTATION IN A CHILD WITH ADVANCED LIPOSARCOMA

A case with advanced liposarcoma was successfully treated byusing high-dose combination chemotherapy following cryopreserved cord bloodstem cell(CBSC)transplantation.The results showed that CBSC could be areplacement of bone marrow to rescue the haematopoietic suppression ofablative chemotheray.In contrast with allogeneous bone marrow transplanta-tion,CBSC infusion showed shorter duration of pancytopenia and less graft-versus-host reaction.     

不同分娩方式脐血生长激素水平的测定

【目的】探讨不同分娩方式对脐血生长激素(growth hormone,GH)的影响,以及脐血GH水平与胎儿生长发育的关系。【方法】取34例足月阴道产(其中20例脐动脉血)和23例剖宫产新生儿脐静脉血标本,以放射免疫分析法检测GH含量。应用SPSS 10.0软件进行t检验、直线相关分析。【结果】34例足月自然分娩组胎儿脐静脉血中GH含量为(32.29±16.58)μg/L,23例剖宫产组胎儿脐静脉组中GH含量为(20.3±7.50)μg/L,差异有非常显著性(P<0.01)。57例新生儿体重平均值为(3432±346)g,身高平均值为(48.87±1.59)cm,以直线相关关系分析,脐静脉血中GH含量与体重和身高均呈正相关关系(r分别为0.833、0.837,P均P<0.05)。【结论】不同分娩方式对脐血GH产生不同的影响;脐血中GH水平与胎儿的体格发育有密切的关系。     

脐血巨核系造血祖细胞的初步研究

用甲基纤维素法培养１５例新生儿脐血巨核系造血祖细胞（ＣＦＵ－Ｍｅｇ），观察了ＣＦＵ－Ｍｅｇ的生长特性、集落产率与接种细胞数的相关性，并与成人骨髓及外周血ＣＦＵ－Ｍｅｇ的数量进行了比较。结果表明，脐血中富含ＣＦＵ－Ｍｅｇ，且分裂快、子代细胞多，形成集落早呈现活跃的增殖状态，其数量低于成人骨髓但个体间差异明显，２６．７％的样本ＣＦＵ－Ｍｅｇ产率高于骨髓。接种细胞数量与ＣＦＵ－Ｍｅｇ的产率在一定范围内呈良好的线性关系。     

单克隆—组织化学技术对小儿急性淋巴细胞白血病分型诊断的研究:附31例报告

近10年来,随着单克隆抗体(单抗)技术的发展,对急性淋巴细胞性白血病(ALL)的免疫学分型越来越细。我们自1987年开始用单克隆—组织化学技术对小儿ALL进行免疫分型,结果如下。     

小儿白血病治疗的远期后果

随着小儿白血病治疗的进展,缓解率越来越高,缓解时间越来越长。因此治疗的远期后果愈来愈明显地被人们所认识和重视。从现有的报道来看,经过若干年一系列的化疗和放疗之后,大多数病人无明显的不良后果。但是,大部分抗癌药和放射线毕竟对机体有害,在杀灭白血病细胞的同时,或多或少对正常组织或器官造成了损伤。这些损伤有的可持续多年,甚至终生不愈。对一个医护人员来说,了解这些,在整个治疗过程中做到心中有数,在不影响缓解的前提下,尽可能防范于未然,是十分重要的。     

脐血T淋巴细胞亚群的研究

本文用３Ｈ—ＴｄＲ和ＡＰＡＡＰ法研究了脐血淋巴细胞转化功能（ＬＴ）、脐血血清的特性、混合淋巴细胞反应（ＭＬＣ）及Ｔ细胞亚群，结果表明脐血淋巴细胞对丝裂原的反应与正常成人外周血淋巴细胞无明显差异；脐血血清对ＰＨＡ和ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞转化有抑制作用；脐血之间、脐血与成人外周血之间的ＭＬＣ反应均较成人外周血之间的ＭＬＣ反应弱，且有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。脐血细胞表型尚未成熟，脐血ＣＤ３＋细胞数减低，ＣＤ４＋和ＣＤ８＋细胞数及其比率近似于成人，细胞数之和大于ＣＤ３＋细胞数。     

端粒酶活性在骨髓间充质干细胞中的表达

目的：探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells MSCs)端粒酶活性的表达并检测其部分生物学特性。方法：取正常成人骨髓用含10%新生牛血清的LG-DMEM培养液培养、扩增。流式细胞仪行细胞表面抗原检测,细胞化学染色鉴定其生物学特性,观察其在地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C特定培养条件下向成骨细胞分化的能力,采用TRAP（Telomerase repeat amplification protoco1 assay)-银染法测定其端粒酶的活性。结果：分离培养获得的贴壁细胞,碱性磷酸酶染色阳性。流式细胞仪检测CD34、CD45呈阴性表达,CD29、CD44呈阳性表达。经向成骨细胞诱导3周后,可得到成骨细胞,经茜素红染色得到证实。TRAP-银染法证实MSCs表达一定的端粒酶活性。结论：体外分离培养的MSCs可以向成骨分化,表达一定的端粒酶活性,具有干细胞的特性。     

山东地区5844例脐血HLAⅠ类等位基因多态性分析

目的：研究山东地区脐带血HLAⅠ类（HLA—A，-B）等位基因的分布特征，探讨中国其他地区及世界不同种族利用山东脐血供者进行造血干细胞移植的可能性。方法：应用PCR-SSO方法对山东地区5844例无血缘关系的汉族健康新生儿脐带血进行了HLA-A，-B等位基因的分布调查。结果：HLA-A等位基因，检出20种；HLA-B等位基因，检出46种。通过与不同地域汉族人群的比较显示：在不同种族的人群中有其各自独特的人群分布特征，在不同地域的同一民族人群中亦有其独特的地理分布特征。结论：山东脐血HLAⅠ类基因具有多态性，能够代表山东汉族人群HLA的分布特征，北方人在山东脐血库中最容易寻找到HLAⅠ类等位基因相合的异基因脐血供者，而南方人找到的机率较北方人稍低。