抑制Rac1的活性对人肝癌细胞生长及侵袭能力的影响

目的 探讨抑制人肝癌细胞HepG2中Rac1的活性对其生长及侵袭能力的影响.方法 应用逆转录病毒载体,将Rac1基因的阴性突变体Rac1N17导入HepG2细胞,经嘌呤霉素筛选后获得表达Rac1N17的阳性细胞克隆Rac1N17-HepG2,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖抑制并绘制细胞生长曲线,细胞基质黏附实验检测对细胞的黏附能力的影响,Transwell法检测细胞侵袭能力的改变.结果 荧光镜下可见绿色荧光蛋白主要分布于HepG2细胞核中,在细胞质中也有少量表达,证实了病毒栽体质粒转染成功.MTT法表明Rac1的活性抑制后,HepG2细胞的增殖能力无明显变化(P>0.05);细胞基质黏附实验显示HepG2细胞与基质的黏附能力随着时间的延长而逐渐减弱(P<0.05);Transwell侵袭实验结果 显示Rac1的活性抑制后,Rac1抑制组穿过PET滤膜的HepG2细胞数明显少于对照组(P<0.05),表明其侵袭能力明显受抑制.结论 Rac1基因在肝癌细胞的黏附、侵袭及过程中发挥重要的作用,有望成为肝细胞癌基因治疗新的靶点.     

喉返神经的显露在甲状腺癌根治术中的意义

目的探讨喉返神经的显露在甲状腺癌根治性手术中的意义。方法回顾分析2003年7月至2006年12月间186例主动显露喉返神经的甲状腺癌根治手术病例资料。结果186例甲状腺癌均施行甲状腺全切或近全切除术。术中均成功显露双侧喉返神经,其中1例右侧非返喉下神经。喉返神经永久性损伤1例,暂时性损伤1例,永久损伤率为0．54％。结论甲状腺癌根治术中应常规在甲状腺下动脉周围寻找喉返神经,主动显露喉返神经不仅可减少喉返神经损伤的发生率,并可提高甲状腺癌手术的彻底性。     

经胸乳入路腔镜下甲状腺手术的临床应用

目的 探讨经胸乳入路腔镜下甲状腺手术的技巧和临床应用效果.方法 回顾分析2010年9月至2012年2月116例施行经胸乳入路腔镜下甲状腺手术的临床资料.112例完成腔镜手术,其中单侧腺叶大部切除94例,双侧腺叶大部分切除12例,甲状腺全切除4例,峡部切除2例.结果 平均手术时间115min,术后平均引流量75ml,术后平均住院时间5.4d,术后无低钙和喉返神经功能障碍症状.随访2～18个月,均未见复发,所有患者均对美容效果满意.结论 在严格掌握适应证的前提下,经胸乳入路腔镜下甲状腺手术是一种安全、有效和可行的手术方式,并且具有良好的美观效果.     

内皮祖细胞在肝细胞癌患者外周血中的生物学行为

目的：探讨肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）患者外周血中的内皮祖细胞（endothelial progeni-tor cells,EPCs）的生物学行为,以了解其在HCC侵袭和转移中所起的作用。方法：以40例肝癌患者和28例健康对照组为研究对象,流式计量外周血CD133＋/CD34＋双阳性细胞。并同时分离培养EPCs,7天后通过MTT法检测其增殖能力,Transwell法检测细胞迁移能力（即侵袭能力）,细胞体外小管形成实验检测细胞血管形成能力。结果：HCC患者外周血中EPCs增加,并且他们外周血中的EPCs的增殖能力、侵袭能力及体外血管生成能力均高于健康对照组（P〈0.05）。结论：内皮祖细胞可能在肝癌的生长和侵袭过程中起到了重要作用。     

Ephrin-A1/Fc融合蛋白对人肝癌细胞系Huh-7生物学特性的影响

目的 探讨Ephritr-A1基因在肝细胞癌发生、发展以及血管生成中的作用.方法 人肝癌细胞系Huh-7分别经Ephrin-A1/Fc融合蛋白和IgG/Fc作用后,MTT法绘制细胞生长曲线,细胞基质黏附实验检测对细胞黏附能力的影响,Transwe11法检测细胞侵袭能力的改变.通过裸鼠移植瘤模型的建立检测Ephrin-A1/Fc融合蛋白对Huh-7细胞体内致瘤能力的影响,并计算瘤体的微血管密度(MVD),判断其对血管生成的影响.结果 Huh-7细胞的黏附率为(131.25±9.57)%,细胞侵袭实验显示Ephrin-A1/Fc融合蛋白作用后,穿过滤膜的细胞数.明显多于IgG/Fc组和空白对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05);裸鼠成瘤实验结果 显示,6周后Ephrin-A1/Fc组裸鼠体积为(186.35±16.24)mm3,其差异均有统计学意义(P<0.05);而瘤体内的MVD值Ephrin-A1/Fc也明显高于IgG/Fc组和空白对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05).Ephrin-A1/Fc融合蛋白对Huh-7细胞并无增殖促进作用(P>0.05).结论 Ephrin-A1基因在肝细胞癌的侵袭及血管生成的过程中发挥重要的作用,因此有望成为肝细胞癌基因治疗新的靶点.     

乳管内乳头状瘤病的临床诊断经验

目的：总结乳管内乳头状瘤病的诊断经验。方法对713例乳头溢液患者的乳管镜检查结果中检出乳管内乳头状瘤病的病例进行分析及分型。结果乳管内乳头状瘤病共计42例（占总检出病例的16．34％）。其中包括单侧乳房单套乳管内多发肿瘤24例（占57．14％）,单侧乳房多套乳管内多发肿瘤13例（占30．95％）,双侧乳房多发肿瘤病例5例（占11．91％）。结论利用乳管镜对不同类型的乳管内乳头状瘤病进行准确分型,可以为临床上对此类疾病的诊疗提供合理的治疗策略和支持依据。     

中电导钙激动钾离子通道在原发性肝癌中的表达及其意义

目的：探讨中电导钙激动钾离子通道（SK4）在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达情况及意义。 方法：收集46例HCC患者手术标本的HCC组织与癌旁组织。用免疫组化法检测两种组织中SK4与血管内皮细胞生长因子（VEGF）在的表达,分析HCC组织中SK4与VEGF表达的相关性;用real-time PCR法检测两种组织中SK4 mRNA的表达,并分析SK4 mRNA表达与HCC临床病理因素的关系。用Western blot法检测两种组织中SK4蛋白的表达。 结果：免疫组化结果显示,肝癌组织中SK4和VEGF的阳性表达率均明显高于癌旁组织（均P<0.05）,且在HCC组织中SK4和VEGF阳性表达呈正相关（r=0.364,P<0.05）;real-time PCR结果显示,HCC组织中SK4 mRNA表达水平较癌旁组织明显上调（P<0.05）,且SK4 mRNA的高表达与肿瘤低分化及门静脉癌栓有关（均P<0.05）;Western blot结果显示,SK4蛋白在HCC细胞膜的表达明显高于癌旁肝细胞,但两者胞质SK4水平无明显差异。 结论：SK4在HCC组织中表达增高,其可能通过上调VEGF的表达等途径促进HCC细胞的侵袭转移。

     

负载肝癌肿瘤抗原的B淋巴细胞诱导特异性抗肿瘤免疫的实验研究

目的:探讨体外经小鼠肝癌细胞不同抗原致敏的CD40配体活化的B淋巴细胞诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)抗肿瘤免疫的能力.方法:分离、纯化T、B混合淋巴细胞,并在CD40L、rmIL-4联合作用下培养.然后分离T、B淋巴细胞以备用.将凋亡的肝癌细胞及其冻融裂解物作为实验组,1640培养基作为空白对照组分别与B淋巴细胞共同培养,检测培养后各组B细胞表面抗原呈递细胞标记(CD40、CD80、CD86)及主要组织相容性抗原的表达情况.利用混合淋巴细胞增殖实验检测T细胞增殖情况.以负载肿瘤抗原的B淋巴细胞诱导的CTL作为效应细胞,肝癌细胞Hepal-6为靶细胞,LDH释放实验检测杀伤活性.结果:负载肿瘤抗原的B淋巴细胞具有刺激T细胞增殖的能力,实验组的B淋巴细胞,其组织相容性分子及其刺激分子表达明显高于空白对照组,其对靶细胞的杀伤率与空白对照组比较经统计学分析差异有显著性.结论:负载肝癌肿瘤抗原的B淋巴细胞作为抗原呈递细胞诱导的CTL可有效产生特异性抗肝癌免疫作用.     

外伤性胆道损伤22例诊治报告

目的 探讨外伤性胆道损伤的诊治方法.方法 回顾性分析22例创伤性肝外胆道损伤的诊治资料.结果 22例均于术中确诊.其中,行单纯胆囊切除术5例,行胆囊切除加胆总管修补术8例,行胆囊切除加胆总管-空肠Roux-en-Y吻合术7例,行胆囊切除加肝总管-空肠Roux-en-Y吻合术2例.本组22例均治愈.结论 外伤性胆道损伤术...     

原发性甲状旁腺功能亢进症的诊断与外科治疗

目的 探讨原发性甲状旁腺功能亢进症(PHPT)的诊断和外科治疗经验.方法 回顾性分析2000～2006年行外科手术治疗的26例PHPT患者的临床资料.甲状旁腺腺瘤22例,甲状旁腺增生3例,甲状旁腺癌1例.所有患者均有血钙和血清甲状旁腺素(PTH)升高,全组平均血钙为(3.4±0.8)mmol/L,术前测血清PTH平均为(921.7±819.2)pg/ml.手术治疗以病变甲状旁腺切除术为主,占96.15%(25/26).结果 全组患者均为一次手术切除病灶,手术治疗过程中无一例术中死亡,无一例出现喉返神经损伤.术后第1、3、7天测血清PTH均在正常范围,无一例出现甲状旁腺功能减退,但全组患者术后均出现不同程度的低钙血症,血钙为1.8～2.2 mmol/L.术后随访17例,随访时间6个月至3年.14例患者血钙于6个月内恢复正常,并不需要额外补充钙剂;另2例骨折患者和1例骨痛患者于血钙正常后自行持续口服钙剂.随访中无一例出现PHPT复发或甲状旁腺功能减退.结论 PHPT根据临床症状和辅助检查可以确诊,甲状旁腺切除术是治疗PHPT的有效方法,术前的准确定位和术中监测血清PTH是手术成功的关键.