G蛋白偶联受体56胞外端融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备

目的:制备G蛋白偶联受体56(G protien-coupled recepter 56,GPR56)的高效抗体,为其功能及分子机制的深入研究提供灵敏、高效的免疫学检测工具。方法:以肝癌细胞株MHCC-97H的cDNA为模板,利用PCR技术扩增GPR56 N端序列(661~1 073 bp),并构建重组表达载体pGEX4T-1-GPR56N。阳性克隆经酶切、测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达。表达产物经Western blot初步鉴定后,用GST磁珠分离纯化,纯化后蛋白与免疫佐剂混合直接免疫家兔制备抗血清。阳性血清用ELISA、Western blot、免疫组织化学等技术对细胞或组织中的GPR56进行鉴定和分析。结果:成功构建重组表达载体pGEX4T-1-GPR56N,GPR56N与GST的融合蛋白(GST-GPR56)在原核系统中进行了高效的可溶性表达,制备的兔抗人GPR56抗体经Western blot和免疫组织化学分析结果表明,该抗体可同时对人源性和鼠源性的GPR56进行特异性检测。结论:成功对GPR56蛋白N端序列进行了原核表达和纯化,制备的抗GPR56多克隆抗体具有较高的特异性,为GPR56功能及分子机制的深入研究奠定了坚实的基础。     

iRoot BP Plus用于恒牙深龋选择性去龋后间接牙髓治疗的临床疗效评估

目的:观察对深龋或深龋伴可复性牙髓炎行选择性去龋并使用iRoot BP Plus行间接牙髓治疗的临床疗效和影响因素，探讨对此类疾病治疗方法的可行性及适应症选择。方法:选择诊断为深龋或深龋伴可复性牙髓炎，且接受选择性去龋治疗的患者42例，在牙科放大镜下操作，以生物陶瓷材料iRoot BP Plus行间接牙髓治疗，分别于术后术后2周、3个月、6个月观察分析各种因素对疗效的影响。结果:患者性别、术前症状、术后即刻症状、窝洞洞型、充填材料对术后6个月的治疗效果均无影响。结论:对诊断为深龋或深龋伴可复性牙髓炎的成熟恒牙，选择性去龋和iRoot BP Plus间接牙髓治疗可获得一定疗效，性别、术前症状、术后即刻症状、窝洞洞型、充填材料均不影响疗效。     

自组装肽RADA16及其衍生物用于药物递送的研究进展

自组装肽RADA16具有两亲性，可与不同类型的药物相互作用，其在生理条件下自发组装形成含水量超过99%的纳米纤维网格结构，模拟体内细胞外基质的孔隙度和结构，不仅为细胞提供适宜生长的微环境、促进受损组织的修复与重建，还具有良好的载药能力；当RADA16的C端或N端被特定的功能肽修饰时，既保留RADA16原有的功能，又使RADA16自组装水凝胶具有更强大的功能。该文综述了基于离子互补型自组装肽RADA16在药物传递领域的研究进展，探讨了基于RADA16及其衍生物的载药系统在生物医学中的应用前景和研究方向。     

《内经》温法浅析

温法,系八法之一,又称祛寒法,是用温热药治疗寒证的方法[1]。《内经》中没有关于温法的专篇论述,但在162篇原文中,载有＂温＂字内容就多达58篇,涉及＂温＂内涵的篇章亦广泛,笔者对《内经》含有＂温＂的原文内容粗略归纳,其含义及特点主要体现在以下几个方面：     

D/E中和肉汤对碘伏棉挤出液中和效果的观察

目的：观察D/E中和肉汤对碘伏棉挤出液的中和效果。方法：采用《消毒技术规范》（2002年版）中的中和剂悬液定量鉴定法，试验菌选用金黄色葡萄球菌，通过同比稀释和调节(1)、(2)组反应管内菌浓度的方法进行试验。结果：将碘伏棉挤出液稀释5倍，并调高(1)、(2)组反应管菌浓度至3.8×109CFU/mL，用同比稀释的D/E中和肉汤进行中和剂鉴定试验，结果符合中和剂鉴定要求。结论：D/E中和肉汤可作为碘伏棉挤出液的中和剂，用于后续杀菌试验。     

肝脏类器官研究的文献计量学分析

背景：近些年，肝脏类器官的发展使其成为国际肝病研究领域的热点，但目前仍未有文献对其进行文献计量学分析。目的：基于文献计量学与可视化分析探索近20年肝脏类器官的热点趋势。方法：从Web of Science(科学网，WOS)核心合集中检索2002-01-01/2022-11-12肝脏类器官的相关文献，运行Origin、Office和CiteSpace软件进行文献计量与可视化分析，通过生成图表的方式来统计分析文献的年发文量、国家、机构、作者、期刊和关键词等内容。结果与结论：肝脏类器官研究领域近20年的发文量、被引频次、加入研究的机构和人员总体呈现上升趋势，说明该领域发展迅速关注度也逐渐升高。在该领域中，美国的发文量最多、影响力最强，虽然投入大量的时间与精力，但是在众多研究机构中美国单个研究机构的发文量并非最高；中国发文量仅次于美国，中国科学院和复旦大学是国内发文量最多的机构。荷兰乌得勒支大学是发文量最多的机构，发文量最高的作者是Clevers H，共引频次最高的文章是“Long-term culture of genome-stable bipotent stem cells from a...     

miR-125b对肝脏血管新生调控作用的实验研究

目的 探讨miR-125b对肝脏血管新生的调控作用，为肝纤维化的防治提供新的靶点。方法 用miR-125b模拟物和抑制物对人肝窦内皮细胞进行转染，而后使用qRT-PCR和ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)、分化抗原簇31(CD31)、血管性血友病因子(vWF)、Ⅳ型胶原(CollagenⅣ)、层粘连蛋白(LN)的mRNA和蛋白表达，荧光探针检测一氧化氮(NO)的表达；扫描电镜检测人肝窦内皮细胞表面窗孔的改变；血管形成实验观察各组血管新生情况；双荧光素酶报告基因实验验证miR-125b与VEGF的靶向关系。结果 qRT-PCR和ELISA检测显示与阴性对照组相比，miR-125b模拟物转染后VEGF、CD31、vWF、CollagenⅣ、LN的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后VEGF、CD31、vWF、CollagenⅣ、LN的mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);荧光探针检测显示与阴性对照组相比，miR-125b模拟物转染后NO平均荧光强度表达下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后NO平均荧光强度表达增加(...