黄连NRAMP3基因的克隆与生物信息学分析＊

目的 克隆黄连（Coptis chinensis Franch.）中自然抗性相关巨噬细胞蛋白（Natural Resistance-Associated Macrophage Protein，NRAMP）的编码基因，并进行生物信息学分析。方法 从黄连基因组中比对NRAMP3基因，并根据比对的基因序列设计特异性引物，经PCR扩增得到的黄连NRAMP3编码序列，进行克隆、测序和生物信息学分析，并利用qPCR技术对黄连NRAMP3基因进行时空表达分析。结果 得到黄连NRAMP3基因cDNA序列，全长1617 bp，编码538个氨基酸，通过与GenBank上的其他蛋白序列比对，将其命名为CcNRAMP3；序列分析显示，黄连NRAMP3基因编码的氨基酸序列包含一个典型的NRAMP结构域（PF01566），有12个跨膜结构域，亚细胞定位于液泡膜上，具有疏水性强的特点。二级结构中肽链构象主要包括α-螺旋与无规则卷曲两部分；三级结构模型具有葡萄球菌锰转运突变体（MntH）的晶体结构。利用系统进化关系分析推测它可能具有转运重金属元素Cd功能。对黄连NRAMP3基因的组织表达分析表明，CcNRAMP3基因在黄连叶片中表达量最高。在遭受镉胁迫时，在须根中表达量先升高后降低，该基因很可能主要在根部对镉进行响应并发挥作用。结论 本研究首次通过克隆得到黄连NRAMP3基因，并运用生物信息学方法对其理化性质、结构特征等进行了分析预测，这些结果将为黄连NRAMP3基因的功能研究以及其对镉转运的调控机制提供理论依据和基因资源。     

4起疏通下水道致急性硫化氢中毒事故报道

正随着社会经济的发展,城市规模在迅速的扩张。作为城市配套的下水道建设也进入高速发展期,而下水道属局限空间(confined space),在新建及维护过程中导致的硫化氢中毒病例也屡见不鲜。我院地处杭城东部经济技术开发区内,处于城市扩张的前沿,因此,由于疏通下水道导致的硫化氢中毒事件频频发生我们的身边,令人痛惜。现将我院近年来接诊的4起类似的硫化氢中毒案例总结如下,以利于交流学习,并引起相关部门的重视,减少类似悲剧的重演。     

肉苁蓉苯乙醇总苷抗肝癌作用的实验研究

目的：研究肉苁蓉苯乙醇总苷（CPhGs）的抗肝癌作用,并探讨其可能的作用机制。方法：采用前肢右侧腋部皮下注射法建立小鼠肝癌H22荷瘤模型,实验设空白对照组、肝癌H22荷瘤模型组、肝复乐阳性治疗组（1 351.5 mg/kg）、CPhGs高剂量组（500 mg/kg）、中剂量组（250 mg/kg）、低剂量组（125 mg/kg）,共6组,每组10只。除空白对照组和模型组外,其余各组分别灌胃给予肝复乐或CPhGs,连续10 d。期间监测小鼠的一般状况,观察各组H22荷瘤小鼠瘤体生长情况,实验结束时,摘眼球取血,酶联免疫（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和甲胎蛋白（AFP）含量;分离脾脏、肝脏,称质量,计算脏器系数;完整剥取瘤体,计算各组小鼠的肿瘤抑制率;HE染色观察瘤体病理组织学变化。结果：荷瘤模型组动物腋下肿瘤出现早且生长最快,CPhGs低、中剂量组次之,高剂量组和阳性治疗组瘤体生长较慢。与模型组比较,CPhGs中、高剂量组瘤质量均明显降低（P < 0.05）,各剂量组抑癌率随CPhGs剂量增加依次升高（P < 0.05）;阳性治疗组和CPhGs各剂量组脾脏系数均明显升高及肝脏系数均明显降低（P < 0.05）;CPhGs中、高剂量组和阳性治疗组IL-2含量均明显升高（P < 0.05）,而AFP含量均明显降低（P < 0.05）;CPhGs各剂量组和阳性治疗组TNF-α含量均明显降低（P < 0.05）。病理结果发现CPhGs各剂量组小鼠肝癌细胞生长受到抑制、数目较少、异质性降低、并伴有大量坏死细胞。结论：CPhGs能降低肝癌H22荷瘤小鼠肝脏损伤,并对其肿瘤生长有抑制作用,可能与CPhGs降低荷瘤小鼠血清中AFP含量及提高荷瘤小鼠免疫能力有关。     

HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定对婴儿乙型肝炎疫苗无/弱应答的影响

目的 检测新生儿外周血干扰素-γ（IFN-γ）和白介素-10（IL-10）含量,探讨HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定对婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗无/弱应答的影响。方法 采用双向性队列研究方法,选择2011年7月至2013年1月在太原市第三人民医院产科分娩的321对HBsAg阳性孕妇及新生儿,根据HBsAg阳性孕妇妊娠中晚期替比夫定服用情况将其分为服药组和未服药组,对新生儿全程接种乙肝疫苗并随访至12月龄。采用电化学发光法（ECLIA）和荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）分别检测母亲、新生儿及婴儿外周血HBV血清学标志物与HBV DNA,ELISA检测新生儿外周血IFN-γ、IL-10含量。结果 乙肝疫苗无/弱应答率为17.99%。非条件logistic回归显示,HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定是婴儿乙肝疫苗无/弱应答的保护因素（aRR=0.119,95%CI：0.014~0.974）;以新生儿血清IFN-γ、IL-10含量中位数为界分为高含量组与低含量组,研究发现服药组发生新生儿血清IFN-γ、IL-10高含量的可能性较大（aRR=8.684,95%CI：1.977~38.140;aRR=5.330,95%CI：1.278~22.236）,新生儿血清IFN-γ、IL-10高含量组发生乙肝疫苗免疫无/弱应答的可能性较小（aRR=0.300,95%CI：0.105~0.857;aRR=0.104,95%CI：0.030~0.354）。结论 HBsAg阳性母亲妊娠中晚期服用替比夫定发生婴儿乙肝疫苗无/弱应答的可能性较小,其可能通过促进新生儿IFN-γ和IL-10分泌来降低婴儿乙肝疫苗无/弱应答发生风险。     

血液净化中易出现的问题及其预防措施

血液净化中心是进行血液透析的重要科室,是保证患者生命安全以取得透析成功的重要工作场所,血液净化中心护理人员必须具备崇高的医德和奉献精神,要有熟练的技能和广博的知识.否则在工作中会出现许多意想不到的护理问题,给患者带来身心方面的痛苦,甚至造成死亡.所以,必须引起广大护理同行的注意和重视,作者根据工作中的临床经验和所见所闻,现将容易出现的护理问题及防范措施作一简要总结.     

多重连接探针扩增结合熔解曲线法鉴别南、北板蓝根掺杂

目的 针对南、北板蓝根在市场流通和中医临床用药中混用现象,建立多重连接探针扩增结合熔解曲线法来快速准确地鉴别两者.方法 针对南、北板蓝根ITS2序列设计两对特异性探针,通过DNA变性、杂交、连接、扩增和进行熔解程序建立MLPA-熔解曲线,根据Tm值的差异进行鉴别,并对其探针特异性和检测灵敏度进行考察.结果 在特异性试验...     

200例高压氧结合化疗治疗晚期乳腺癌临床疗效观察

目的 探讨高压氧结合化疗治疗晚期乳腺癌的临床疗效和不良反应.方法 将200例晚期乳腺癌患者分为A组和B组,每组各100例,A组接受高压氧加CAF方案治疗,B组接受单纯CAF方案治疗,均完成2～3周期的治疗,通过X 线、B 超、CT、骨扫描、血常规、肝肾功能及临床检查,并对其进行疗效和不良反应评价.结果 A组与B组的总缓解率有明显差异,分别为79.00%、57.00%（P＜0.05）.中位生存期A组较B长.毒副作用都能耐受,但A组不良反应较B组轻,重度反应A组较B组少.结论 高压氧结合化疗能较好地提高治疗晚期乳腺癌疗效,并能有效地降低化疗对机体的毒副作用,值得临床推广应用.     

免疫阻断乙型肝炎病毒母婴传播多中心研究

目的 探讨孕产妇乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性率及乙型肝炎病毒（HBV）母婴传播阻断的效果。方法 2008－2012年,通过多中心队列研究,对湖北省、山西省、广东省、新疆维吾尔自治区等地的孕产妇进行HBsAg筛查;对上述地区部分医院入院分娩的HBsAg阳性母亲及8～12个月龄婴儿进行随访观察,所有标本检测乙型肝炎血清标志物(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb),部分标本检测HBV DNA。结果　筛查孕妇82214例,HBsAg阳性4924例,阳性率6.0%。随访HBsAg阳性母亲及8～12个月龄婴儿1371对,婴儿免疫阻断失败率3.1%（42/1371）,HBsAg及HBeAg双阳性母亲婴儿的免疫阻断失败率为8.2%。免疫阻断失败的婴儿其母亲均为HBeAg阳性且HBV DNA≥6 log10 copies/mL。HBeAg阳性母亲孕期注射乙型肝炎免疫球蛋白(hepatitis B immune globulin, HBIG)及未注射HBIG组,其婴儿免疫阻断失败率差异无统计学意义(8.8% vs. 8.1%, P=0.807)。结论　多中心调查显示目前孕产妇HBsAg阳性率6.0%,HBV母婴阻断失败率3.1%。HBsAg及HBeAg双阳性且HBV DNA≥6 log10 copies/mL 的孕妇应为母婴阻断的重点人群。孕妇孕期注射HBIG不能提高HBV母婴阻断效果。     

写在我们结婚十周年之际

我和妻子是在一次聚会中认识的。她,体型丰腴,面容姣好,气质高雅。我和几位男同胞在私下里给她的评语只有两个字:性感。不少人想追她,但都怯于表露。我很自信,虽然我个头小。我大着胆子给她去了一封直奔主题的求爱信。我收到了她的回信,她委婉地拒绝了我,但我从中还是看到了一丝希望——她很欣赏我的自信。此后,我俩书信不断,