冷沉淀的临床应用进展

冷沉淀是用新鲜冰冻血浆（FFP）在1～6℃无菌条件下分离出沉淀在血浆中的冷不溶解物质,并在1小时内冻结而制成的成分血,对血友病A出血疗效显著。近年来,冷沉淀及其制剂不仅用于治疗血友病,也越来越多地用于各种手术、创伤引起的凝血机制障碍等出血性疾病。     

人红细胞冻干程序优化的实验研究

目的 探讨冻干程序中几种参数设置对红细胞冻干复水后回收率的影响.方法 将红细胞装入细管分别用四种模式对其进行降温,降温完成后将细管取投入25℃水浴中,对其外形变化进行比较判断玻璃化的程度;将冻好的样品放入冻干机搁板上,温度分别设置为-40、-50、-60、-70和-80℃,对样品进行冻干;对干燥开始不同温度、升温速率、红细胞样品在每一温度干燥的时间等多因素加以比较;最后测定了红细胞残余含水量.结果 直接将样品投入液氮中降温,保护液在冷冻或溶化过程中形成玻璃化而未出现冰晶.搁板温度为-70℃和-80℃时红细胞回收率没有显著性差异(P>0.05),这两组与其他各温度下的回收率均有显著性差异(P<0.01).E程序下的红细胞和血红蛋白回收率最高,分别为83.14%±9.55%和85.33%±11.42%.与其他各程序间存在显著差异(与A、B、C相比P<0.01;与D相比P<0.05).随着残余含水量的增多,细胞回收率呈正相关的增加趋势.结论 冻干中采用液氮快速降温,搁板温度预冷至-70℃,开始干燥时的温度越接近样品最初在搁板的平衡温度,红细胞升华干燥阶段升温速率越均匀缓和,红细胞的冻干效果越好.     

Capture-R法与微柱凝胶法在不规则抗体筛查中的应用

目的探讨Capture-R法与微柱凝胶法在不规则抗体筛查中的临床应用价值。方法采用微柱凝胶法与Capture-R法对600份临床患者标本做不规则抗体筛查平行试验,对抗体筛查阳性标本进行抗体鉴定。分析比较两种方法在不规则抗体筛查试验中的灵敏度和特异性。结果微柱凝胶法和Capture-R法阳性检出率分别为3.17%（19/600）和2.83%（17/600）,两种方法灵敏度比较差异无统计学意义（P〉0.05）;特异性分别为89.47%（17/19）和100.00%（17/17）,两种方法特异性比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Capture-R法在不规则抗体筛查试验中的灵敏度和特异性均达到微柱凝胶法检测水平,可有效检出有临床意义的红细胞抗体,提高临床输血安全。     

低剂量辐照对人外周血淋巴细胞的影响

目的 研究人外周血中淋巴细胞亚群对相同辐照剂量下不同辐照次数处理模式时的辐照敏感性差异,为免疫性疾病治疗提供一种新思路。方法 采集志愿者外周血,分离提取外周血淋巴细胞,用总剂量为300 mGy分别辐照6次(50 mGy/次)、3次(100 mGy/次)、2次(150 mGy/次),每次照射间隔24 h,每个剂量最后一次照射后24 h检测凋亡、增殖、周期、细胞因子。结果 与对照比较,经照射处理后的淋巴细胞凋亡率明显增加;在50 mGy/次照射剂量组中CD3^-CD56⁺NK>CD3⁺T>CD3^-CD19⁺B细胞,细胞因子分泌量呈现上升趋势;100 mGy、150 mGy/次照射剂量组中CD3^-CD56⁺NK>CD3^-CD19⁺B>CD3⁺T细胞,细胞因子分泌呈现下降趋势。50 mGy、100 mGy和150 mGy/次的X射线照射处理后,淋巴细胞增殖...     

孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术的建立

本研究目的是建立孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术,用于ABO血型不合引起的新生儿溶血病的产前诊断。根据ABO血型基因DNA全序列和mRNA序列设计4对引物,选择20例健康供者血浆,提取血浆中DNA进行扩增,探索最佳的血浆DNA提取及PCR扩增条件,初步建立单人ABO血型基因分型技术。将O型血浆DNA与A型或B型血浆DNA按1：1、2：1、4：1、8：1、10：1、20：1、40：1、100：1进行混合,模拟孕妇外周血胎儿与孕妇自身ABO基因混合状态,建立混合ABO血型基因分型技术。选取14例孕30周以上的孕妇外周血标本,进行胎儿ABO血型基因型鉴定,并对孕妇进行追踪,尽量获取胎儿出生以后的外周血标本进行ABO血型鉴定,以评价孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术的灵敏度与准确性。结果表明：单人血浆进行准确血型鉴定的最少模板DNA量约为0．625ng,500μl血浆提取的DNA量即可达到PCR扩增要求;当混合血浆中O型DNA所占比例≤10时,可以准确检测出非0基因的存在;14名O型孕妇外周血标本中9例标本扩增出非O型基因,5例未扩增出非0基因;通过血清学方法对5例胎儿出生后外周血进行ABO血型鉴定,其中A型3例,B型1例,O型1例,与其基因分型结果一致,符合率100％。结论：本研究建立的孕妇外周血胎儿ABO血型基因提取、分型技术,可以对妊娠中晚期胎儿ABO血型基因型进行准确鉴定,从而为新生儿溶血病的产前诊断与预防提供指导意见。     

血栓弹力图在患儿凝血功能检测中的应用进展

人类凝血系统在长期演变过程中,形成了1个复杂的动态平衡机制,这对维持机体稳态至关重要。而凝血系统的波动将导致严重疾病。众所周知,3—6月龄的婴儿凝血系统尚未完全成熟,新生儿及儿童生理性凝血与成人亦有所不同,新生儿常出现常规凝血试验指标异常。但其和临床症状之间的关系,如血栓形成或出血风险相关性依然不明确。人们对新生儿和儿童凝血功能的认识仍旧不足。血栓弹力图(thromboelastography,TEG)是血凝块形成动力学的描计图,能够反映血栓形成及降解的凝血过程全貌,属于血液流变学检测,一定程度上弥补了传统常规凝血试验的不足,为更好地评估患儿的凝血功能提供了有力保障。且相对常规凝血试验检查,TEG所需标本量小,适用于对儿科患者凝血状态的评估。     

ABO血型次侧不相合肾移植术后过客淋巴细胞综合征1例

目的对1例ABO血型次侧不相合二次异体肾移植术后,引起过客淋巴细胞综合征病例进行分析,探讨其血清学特点及临床输血策略。方法血型鉴定、抗体筛选、抗体鉴定、直接抗人球蛋白试验、效价测定、交叉配血选用卡式抗人球蛋白法进行试验,同时选用试管法进行血型鉴定、抗体筛选、抗体鉴定、放散试验、交叉配血。结果供者血型为O型,患者血型为B型,直接抗球蛋白试验阳性,热放散表明患者产生IgG抗-B,与O型辐照洗涤红细胞交叉配血相合,输注效果良好。结论 ABO非同型肾移植术后,应警惕发生过客淋巴细胞综合征,需输血治疗时应选择与供者血型相符的红细胞。     

头孢哌酮钠舒巴坦钠致药物溶血性贫血的分析

目的建立针对药物溶血性贫血的诊断流程。方法应用卡式抗人球蛋白法完成患者红细胞直接抗人球蛋白试验(DAT)及DAT分型检测,应用药物致敏红细胞方法检测患者血浆内的药物抗体,分析患者的溶血及凝血指标。结果患者DAT阳性,分型为IgG+C3型,血浆内存在针对头孢菌素类药物抗体;患者用药后Hb从122 g/L下降至80 g/L,PLT从90×10~9/L下降至17×10~9/L;LDH从用药前189.5μmol/L上升至347.2μmol/L,AST从25.7 U/L上升至63.5 U/L;患者用药后PT从用药前的13.4 s延长到20.9 s,APTT从35.8 s最长延长到56.6 s,INR从1.19延长到1.8。结论患者因使用头孢哌酮钠舒巴坦钠发生针对血液系统的不良反应,导致药物溶血性贫血。     

铜离子活化镉还原法测定血清中硝酸盐浓度

目的建立一氧化氮（ＮＯ）间接测定方法。方法用铜离子活化镉将血清中的硝酸盐（ＮＯ－３）还原为亚硝酸盐（ＮＯ－２），ＮＯ－２通过与Ｇｒｉｅｓｓ试剂的重氮、偶氮反应进行定量。结果ｐＨ在９．７时，活化镉还原ＮＯ－３能力最强，整个反应９０分钟到达平衡，最大还原率７１％。血清ＮＯ－３浓度为４１．７６μｍｏｌ／Ｌ时，批内变异系数（ＣＶ）为６．５３％，批间ＣＶ为１０．１５％。测定３１例健康人和３０例糖尿病病人血清中ＮＯ－３浓度，分别为２８．６２±１７．９７μｍｏｌ／Ｌ和７１．１７±２５．０９μｍｏｌ／Ｌ，二者差异有显著意义（Ｐ＜０．００１）。结论该方法简单、实用，不需要昂贵的试剂与设备，能够反映生物体内ＮＯ的代谢水平     

黄芪总黄酮对羟自由基所致V_（79）细胞DNA链断裂损伤的防护作用研究

报道黄芪总黄酮对羟自由基所致细胞ＤＮＡ损伤的防护效能。结果表明在黄芪总黄酮浓度为０．４ｇ·Ｌ－１时即有防护作用，当浓度为０．８ｇ·Ｌ－１时对羟自由基所致细胞ＤＮＡ链断裂损伤即有极显著的防护效果。