人血清氧化低密度脂蛋白自身抗体的提取和初步鉴定

目的提取和鉴定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)自身抗体.方法采用溴化氰活化的Sepharose 4B交联Ox-LDL制备免疫吸附层析柱,从正常人血清中提取抗Ox-LDL自身抗体,采用ELISA法鉴定其免疫反应性,散射免疫比浊法分析自身抗体种类.结果用NaHCO3、醋酸盐和KCNS溶液洗脱,分别收集洗脱峰.8份正常人血清中均收集到Ox-LDL自身抗体,与Ox-LDL均具有良好的反应性.自身抗体种类中以IgG为主,其次为IgM.结论此法提取的抗Ox-LDL自身抗体同Ox-LDL具有良好的反应能力.     

低密度脂蛋白循环免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制物的作用

目的探讨低密度脂蛋白循环免疫复合物(LDL-IC)对U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法分别采用不同浓度的天然低密度脂蛋白(N-LDL)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)及其免疫复合物作用U937细胞,通过半定量RT-PCR分析U937细胞中MMP-1和TIMP-1基因表达的变化。结果正常U937细胞几乎不表达MMP-1,而高表达TIMP-1。N-LDL对细胞MMP-1和TIMP-1 mRNA表达没有影响。Ox-LDL能引起MMP-1轻度表达,但显著地下调TIMP的表达;而天然、氧化LDL的循环免疫复合物均非常显著地增加MMP-1和降低TIMP-1的mRNA表达(P<0.001),且较Ox-LDL对MMP-1的作用更为显著(P<0.001),并具剂量效应。结论N-LDL-IC和Ox-LDL-IC增强U937细胞MMP-1 mRNA表达,下调其抑制物TIMP-1的表达。     

中国健康人血清胆固醇酯转运蛋白水平

为研究中国健康人血清胆固醇酯转运蛋白水平和分布特征,采用"Sandwich"酶免疫法测定了1128例健康人群血清胆固醇酯转运蛋白水平,结果为1.84±1.55mg/L,胆固醇酯转运蛋白水平倾向于低浓度的偏态分布,女性胆固醇酯转运蛋白水平明显高于男性(分别为2.40±1.65mg/L和1.49±1.37mg/L,P<0.001).胆固醇酯转运蛋白水平与年龄之间呈显著的负相关(r=-0.19,P<0.001),与其他各项血脂浓度间均无相关性.     

脂蛋白(a)与心血管疾病的关系

脂蛋白(a)[Lp(a)]结构类似于低密度脂蛋白(LDL),高水平Lp(a)是一种公认的心血管疾病危险因子。体内存在氧化型Lp(a)更易于促进动脉粥样硬化的发生发展。Lp(a)中的载脂蛋白(a)[apo(a)]存在异质性,研究显示其危险性可能是由于apo(a)等位基因水平差异引起的,而且apo(a)的多态性影响到Lp(a)水平的临床测定,如何降低apo(a)对结果的影响还需要更多深入研究。目前针对高Lp(a)水平的人群尚无统一的治疗标准,但降脂治疗有益于预防心脑血管疾病的发生。     

采用自身抗体建立氧化脂蛋白(a)水平的ELISA检测法

目的提取和鉴定人血清中氧化脂蛋白（a）[ox-Lp（a）]自身抗体，建立ox-Lp（a）ELISA检测法并进行临床研究。方法采用溴化氰活化的sepharose4B交联ox-Lp（a）制备免疫吸附层析柱，从正常人血清中提取抗ox-Lp（a）自身抗体，分析其免疫反应性。分别建立以抗ox-Lp（a）的自身抗体、抗氧化LDL（ox-LDL）多克隆抗体为包被抗体，酶标抗载脂蛋白（a）[apo（a）]为检测抗体的ox-Lp（a）ELISA检测法，并对100例冠心病患者和100名健康体检人群进行分析。结果8份正常人血清中均存在抗ox-Lp（a）自身抗体，与ox-Lp（a），ox-LDL均具有良好的反应性；再经亲和层析除出抗ox-LDL自身抗体后，2份标本同ox-Lp（a）仍具有较高的反应性。同对照组相比，本组冠心病患者血浆Lp（a）水平显著升高[（279．6±162．7）mg／L比（206．3±126．4）mg／L，P〈0．01]；ox-Lp（a）水平亦明显增加（P〈0．01），采用自身抗体和抗ox-LDL抗体建立的ELISA法测定结果分别为：（24．3±33．4）μg/ml比（8．4±9．3）μ/ml和（13．0±13．8）μ/ml比（7．3±9．7）μ/ml；两种ELISA法间结果高度相关（r=0．78，P〈0．01）。结论提取的人血清ox-Lp（a）自身抗体可识别apo（a）和apoB氧化位点，采用自身抗体建立的ox-Lp（a）检测法能更真实、准确地反应体内Lp（a）的氧化状态，冠心病患者ox-Lp（a）水平显著升高。     

儿童肾病综合征患者血浆氧化低密度脂蛋白及其免疫复合物水平

目的分析儿童肾病综合征（NS）患儿血浆氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）及其免疫复合物（LDL-IC）水平的变化。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定106例活动期儿童NS患儿、42例恢复期儿童NS患儿和155名健康对照者ox-LDL和LDL-IC水平,同时对受检者血脂水平进行检测。结果恢复期及活动期NS患儿的ox-LDL水平均高于对照组（P〈0.05、P〈0.01）,且活动期高于恢复期（P〈0.01）;活动期NS患儿LDL-IC水平高于恢复期NS患儿和对照组（P〈0.01）。NS患儿ox-LDL、LDL-IC分别与总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和尿素（Urea）呈正相关,与白蛋白（A lb）呈负相关。活动期NS患儿经类固醇治疗后,A lb水平升高,ox-LDL、LDL-IC、TC、TG和LDL-C水平下降。结论 NS患儿ox-LDL及LDL-IC水平明显升高,可能参与动脉粥样硬化的发生、发展过程。     

应用单克隆抗体的脂蛋白(a)免疫比浊测定

目的建立血清脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］单克隆抗体免疫比浊测定法。方法应用四株载脂蛋白（ａ）［ａｐｏ（ａ）］单克隆抗体，配制成全液体、双试剂，于自动分析仪二点反应法检测Ｌｐ（ａ）。结果检测试剂与纤维蛋白溶酶原和ａｐｏＢ无交叉反应，甘油三酯（１５ｍｍｏｌ／Ｌ）、胆红素（１５０μｍｏｌ／Ｌ）、血红蛋白（５００ｍｇ／Ｌ）对测定无干扰，检测范围０～１０００ｍｇ／Ｌ。该法与ＥＬＩＳＡ对照，结果无显著差异，ｒ＝０．９９。批内ＣＶ分别为２．５％［脂蛋白（ａ）７８５ｍｇ／Ｌ］和３．５％［脂蛋白（ａ）３００ｍｇ／Ｌ］，批间ＣＶ分别为３．９％和５．５％。结论ａｐｏ（ａ）单克隆抗体免疫比浊测定血清Ｌｐ（ａ）具有特异、灵敏、简便、快速和适用于自动分析等优点。     

应用单克隆抗体的脂蛋白（a）免疫比浊测定

目的 建立血清脂蛋白（ａ）「Ｌｐ（ａ）」单顾隆抗体免疫比浊测定法。方法 应用四株载脂蛋白（ａ）「ａｐｏ（ａ）」单克隆抗体，配制成全液体、双试剂，于自动分析仪二点反应法检测Ｌｐ（ａ）。结果 检测试剂与纤维蛋白溶酶原和ａｐｏＢ无交叉反应，甘油三酯（１５ｍｍｏｌ／Ｌ）、胆红素（１５０μｍｏｌ／Ｌ）、血红蛋白（５００ｍｇ／Ｌ）对测定无干扰，检测范围０－１０００ｍｇ／Ｌ。该法与ＥＬＩＳＡ对照，结果无显著差异     

小而密低密度脂蛋白胆固醇直接测定法与肝素镁沉淀法的比较

目的 比较直接测定法和肝素镁沉淀法测定小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)间相关性,初步评价直接测定法的准确度和特异度.方法 选取健康人血清标本20例,分别采用直接测定法和沉淀法测定其sdLDL-C水平,分析两种方法结果的相关性;并对直接测定法进行方法学评价.结果 直接测定法和沉淀法测定血清sdLDL-C的结果高度相关(r=0.889,P＜0.0l),且无显著性差异(t=1.567,P＞0.05).直接测定法在sdLDL-C浓度为0.25～1.09 mmol/L的范围内,线性关系良好(Y=0.970 2X-0.028 6,r=0.992);批内CV平均为3.19％,批间CV平均为3.69％;平均回收率为101.7％;115 μmol/L胆红素、5 g/L血红蛋白和14.5 mmol/L三酰甘油对测定结果无影响.结论 直接法测定sdLDL-C测定范围广,精密度、准确度和特异度较好,抗干扰能力强,可应用于临床.     

microRNA与心血管疾病血管重建的研究进展

血管重建是血管壁急慢性损伤后发生的适应性或病理性改变,其过程主要涉及内皮细胞(ECs)及平滑肌细胞(SMCs)的增殖、迁移、凋亡与表型转换。研究表明,微小核糖核酸(miRNAs)是血管重建中的重要调节因子。该文就miRNAs在血管重建相关疾病中的作用机制及其临床应用研究进展作一综述,主要关注miRNAs如何通过调节ECs及SMCs的功能从而在动脉粥样硬化、肺动脉高压、支架后再狭窄等疾病的发生、发展中发挥作用。