免疫分子佐剂ctxB在pVAX1中的初步应用

目的 构建霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的真核表达质粒pVAX1-ctxB,并观察其在真核细胞中的蛋白表达情况.方法 利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1 -ctxB,通过脂质将其转染至CHO细胞中诱导蛋白表达,GM1 -ELISA法检测其蛋白表达产物.结果 重组质粒pVAX1-ctxB经酶切可得到与ctxB大小相同的片段,GM1 -ELISA法证实经转染的CHO细胞可分泌霍乱毒素B亚单位(ctxB)蛋白.结论 成功构建重组表达质粒pVAX1- ctxB,其蛋白表达产物具有ctxB蛋白活性,为下一步加强基因防龋疫苗效价奠定了基础.     

603抗心律失常作用的实验研究

本文利用多种心律失常的动物模型研究603(盐酸N-(β-二乙胺乙基)-N-邻甲苯基-3,4,5-三甲氧基苯甲酰胺)的抗心律失常作用。 在改良的Lawson小鼠氯仿模型中,腹腔注射603的治疗指数(LD_(50)/ED_(50))和安全范围(LD_5/ED_(95))分别为3.38和1.87,与奎尼丁和茚丙胺相近似,而稍逊于利多卡因。在大鼠乌头碱模型中,603恒速注射的有效量为9.1±2.0mg/kg,治疗指数(最小致死量/最小有效量)为22.5,而利多卡因的有效量为30±6.6mg/kg,治疗指数仅为2.6。603灌服200mg/kg也有预防乌头碱诱发心律失常的作用。在狗哇巴因模型中,603的有效量为10.1±3.3 mg/kg,利多卡因则为31.1±22mg/kg。实验结果表明,603的抗心律失常作用优于利多卡因,且在个体中的差异较小,所用剂量也易于控制。     

拟胆碱药和抗胆碱药用以研究情感障碍和应激的乙酰胆碱假说

机体的应激反应包括胃肠道、心血管、行为、镇痛、免疫、内分泌、精神行为和精神病理等多种变化。动物实验表明,应激时的各种表现可能通过中枢神经递质包括去甲肾上腺素(NA)、多巴胺、5-羟色胺(5-HT)和γ-氨基丁酸、GABA)等的复杂变化。乙酰胆碱(ACh)是一种中枢和外周植物神经系统的重要递质,也可能参予应激反应。本文概述应用拟胆碱药和抗胆碱药作为工具,研究ACh 在应激时行为、神经内分泌和心血管反应的作用。应激引起的ACh 活性变化     

罕见B(A)亚型的血清学特征及基因序列分析

目的：分析罕见的B(A)亚型血清学特征及基因测序结果。方法：选取2013 年3月至2021年6月温州医科大学附属第二医院的8 例ABO血型正反定型不一致或抗原减弱的标本,分别采用序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）法检测ABO基因分型,直接测序法进行基因测序分析,聚凝胺法与A型、B型、AB型、O型供血者进行交叉配血。结果：8 例标本血清学正定型结果表现为A弱B型,基因测序表现为B(A)型,其中基因型B(A).04/O.01.02 2例、B(A).02/O.01.02 2例、B(A).04/O.01.01 2例、B(A).04/A.01.01 1例、B(A).02/O.01.01 1例;与O型、B型供血者交叉配血主测均阴性,与AB型供血者交叉配血次测阴性。结论：罕见的B(A)亚型基因型以B(A).04、B(A).02为主,其血清学表现特征“A弱B强”。     

抗心律失常新药棓酰苯胺的毒性研究

提要对樯酰苯胺(603马来酸盐)的毒性研究,分为小鼠急性毒性、狗的亚急性毒性和小鼠致畸试验三个方面进行。给小鼠口服即灌胃(po)、腹腔注射(ip)和静脉注射(iv)的LD_(50)分别为1145±257、236.84±30.1和65.8±5.9mg/kg,连续给药7～10d,蓄积毒性不明显。狗的亚急性毒性试验,用本药肌肉注射(im)每天15 mg/kg,连续给药6周,主要反应产生癫痫样的惊厥、流涎、恶心、呕吐、体重减轻。其中一条狗因惊厥反复发作而死亡,病理切片见到肝细胞坏死和肾小球明显充血。血象、心电图、肝肾功能和尿常规未见异常。致畸试验未见胎仔畸变,但却发现约2％的胎仔有胸骨骨化迟缓现象。     

蜂毒肽对新生大鼠心肌细胞Na^＋,K^＋—ATP酶基因表达的影响

目的　观察蜂毒肽对新生大鼠培养心肌细胞Na ,K ATP酶α1和 β1亚基mRNA的表达。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术。药物与培养的心肌细胞温育 1h后 ,观察蜂毒肽对Na ,K ATP酶基因表达的影响。用GAPDHmRNA作为内参照。　结果　蜂毒肽对α1亚基mRNA表达有显著促进作用。经GAPDH校正 ,光密度值对照组为 0 .47± 0 .14(n =5 ) ,蜂毒肽 0 .0 1mmol/L组为 0 .6 6± 0 .10 (n =6 ,P <0 .0 5 ) ,哇巴因 1mmol/L组为 0 .6 7± 0 .0 9(n =6 ,P <0 .0 5 )。蜂毒肽 0 .0 1mmol/L组和哇巴因 1mmol/L组对Na ,K ATP酶β1亚基mRNA表达无显著影响。结论　蜂毒肽 0 .0 1mmol/L对Na ,K ATP酶α1亚基mRNA表达有促进作用 ,但对 β1亚基mRNA的表达无促进作用     

冠心病患者血浆中凝血酶活化的纤溶抑制物测定的意义

目的 了解冠心病患者急性期血浆中凝血酶活化的纤溶抑制物(TAFI)活性与抗原水平的变化.方法 用ELISA与发色底物法分别检测72例急性心肌梗死(AMI)患者、54例心绞痛患者和45名对照血浆中TAFI抗原及活性;同时用Clauss法检测血浆中的纤维蛋白原(Fib).结果 AMI组与心绞痛组之间以及二者与对照组之间的血浆TAFI抗原及活性水平的差异无统计学意义(P＞0.05),男性与女性之间差异也无统计学意义(P＞0.05);血浆TAFI抗原与活性之间有一定的相关性(r=0.692,P＜0.05);AMI组、心绞痛组与对照组之间血浆Fib水平的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 冠心病患者发生AMI时,血浆中TAFI的活性与抗原水平没有显著的变化.     

温州地区乙型肝炎病毒基因型分布调查及意义

目的 调查乙型肝炎病毒(HBV)感染者的HBV基因型分布,探讨HBV基因型与临床的相关性.方法 用SP-nPCR法检测469例HBV感染者的HBV基因型.用荧光定量PCR法检测HBV DNA载量,用ELISA法检测HBV血清学标志物.结果 469份标本分出基因型430例,HBV基因型分布为:A型2.6%(11,430),B型34.9%(150/430),C型49-8%(214/430),B/C型12.8%(55/430),未检出D、E、F基因型;无症状携带者(ASC)和慢性乙肝患者(CH)以C、B基因型为主,肝硬化(LC)和肝癌(HCC)以C基因型占绝对优势.基因型分布与性别无关.30岁以下人群感染以B基因型为主.30岁以上则以C基因型为优势.结论 SP-nPCR法适用于慢性HBV感染者(病人和携带者)的基因分型和流行病学调查.HBV感染以C、B基因型为主,存在B,C混合基因型和A基因型.C基因型感染与肝硬化和肝细胞癌相关.     

登革病毒高度保守的HLA-A*1101限制性T细胞表位鉴定和体内免疫反应研究

目的：鉴定登革病毒2型（DENV-2）HLA-A*1101限制性T细胞表位并探讨其诱导的T细胞反应的特征。方法：基于DENV-2的氨基酸序列,采用T细胞表位预测软件预测HLA-A*1101限制性候选T细胞表位;基于HLA-A*1101转基因小鼠,采用ELISPOT实验、ELISA实验和CD8+T细胞（CTL）杀伤实验研究候选表位的HLA-A*1101限制性和所诱导的T细胞反应的特征。结果：在合成的14条候选表位中,9条肽（NS1161-170、NS1263-272、NS36-15、NS4b44-53、NS333-42、C58-67、E30-38、NS3576-584和NS4a72-80）免疫HLA-A*1101转基因小鼠可诱导产生肽特异性分泌IFN-γ的T细胞。除了分泌IFN-γ,C58-67和NS3576-584特异性T细胞也可分泌TNF-α,而E30-38特异性T细胞更可同时分泌TNF-α和IL-6。DENV-2感染的HLA-A*1101转基因小鼠体内也可检测到针对NS4b44-53、NS333-42、C58-67、E30-38、NS3576-584和NS4a72-80的分泌IFN-γ的T细胞。采用上述6条肽的混合物免疫HLA-A*1101转基因小鼠所诱导的效应细胞可显著杀伤DENV-2感染的小鼠脾单核细胞。结论：本研究鉴定出了9条全新的DENV-2特异性HLA-A*1101限制性T细胞表位。     

转化酶抑制剂的降压机制

口服有效的转化酶抑制剂(CEI)如巯甲丙脯酸或MK 421等,业已成功地作为抗高血压药进入临床。最初认为,CEI的降压机制在于抑制转化酶使循环的血管紧张素Ⅱ(ANG Ⅱ)减少,从而减弱ANG Ⅱ的直接升压作用。然而有证据表明,在高血压病人和实验性高血压动物,不论血浆中肾素-血管紧张素系统是否兴奋,CEI均有降压作用。由于转化酶也是缓激肽的主要降解酶,故CEI亦能增加外原性缓激肽的血管扩张作用。此外,尚有些与转化酶抑制无关的作用,如血管平滑肌对钠通