全自动血球分析仪STKS与流式尿液分析仪UF-100计数CSF白细胞

目的观察比较STKS与UF-100用于CSF白细胞数的测定情况。方法用血球仪STKS与流式尿液分析仪UF-100来分析50例CSF标本,而且将结果与手工计数(Neubauerschamber)比较。结果对两种分析仪中,STKS在大于400×106/L,UF-100在小于600×106/L时,有较好的线性与准确性,在低浓度范围时,UF-100的计数更具优越性(UF-100CV3.1～4.5%;STKSCV20～30%)。与手工计数法比较,绝大部分是符合的而有一些标本的结果是有差异。STKS是假性高白细胞计数,而UF-100却是假性低细胞计数。结论目前,这两种自动化分析仪均不能完全用于CSF的细胞计数,特别是STKS。但如技术与软件问题得到解决,两种分析仪作为CSF常规分析将得以实现。     

免疫分子佐剂ctxB在pVAX1中的初步应用

目的 构建霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的真核表达质粒pVAX1-ctxB,并观察其在真核细胞中的蛋白表达情况.方法 利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1 -ctxB,通过脂质将其转染至CHO细胞中诱导蛋白表达,GM1 -ELISA法检测其蛋白表达产物.结果 重组质粒pVAX1-ctxB经酶切可得到与ctxB大小相同的片段,GM1 -ELISA法证实经转染的CHO细胞可分泌霍乱毒素B亚单位(ctxB)蛋白.结论 成功构建重组表达质粒pVAX1- ctxB,其蛋白表达产物具有ctxB蛋白活性,为下一步加强基因防龋疫苗效价奠定了基础.     

精子动态参数在精液质量分析中的应用

目的 探讨精子动态参数在精液质量分析中的应用价值.方法 严格按照WHO技术规范,对2343例来我院男科门诊就诊的患者精液进行常规指标和精子动态参数分析.结果 (1)正常精液组和异常精液组各项精子动态参数比较,均存在统计学差异.(2)随着精子存活率的下降,VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、STR下降明显,BCF呈上升趋势,而LIN、WOB差别无显著性.(3)与密度活力正常组比较:少精组除LIN、STR有所增加,MAD、BCF有所下降,差别有统计学意义外,其余5项参数差别无统计学意义;弱精组除MAD无统计学差异外,其余8项参数均有统计学差异;少弱精组除MAD和ALH无统计学差异外,其余7项参数均有统计学差异.结论 精子的动态参数是评估精液质量的重要指标,将其与精液常规分析相结合,可为男性生育能力评价提供有效的依据.     

一种致遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症的新突变(Ser250Phe)的鉴定与功能分析

目的 探讨Ser250Phe突变致遗传性凝血因子Ⅶ(coagulation factorⅦ,FⅦ)缺陷的分子机制.方法 用STA-R全自动血凝分析仪检测先证者及家系成员的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thrombinoplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)及凝血酶时间(thrombin time,TT)；一步法及ELISA分别检测先证者及家系成员凝血因子Ⅶ活性及抗原；PCR扩增先证者及其家系成员因子7基因(factor 7 gene,F7)所有外显子及侧翼序列,直接测序分析；PCR介导质粒DNA定点诱变法构建F7 Ser250Phe突变表达质粒,将表达质粒瞬时转染HEK293细胞,一步法测定培养上清FⅦ活性及ELISA及Western印迹测定培养上清及细胞裂解液FⅦ抗原；同时将F7表达质粒与高尔基体或内质网定位的荧光质粒共转染CHO细胞进行亚细胞定位分析.结果 先证者及家系成员APTT、TT及FIB均正常,而先证者PT、FⅦ活性及抗原分别为36.5 s、4.0％及130.2 ng/mL；测序发现先证者F7基因存在g.15975G＞A(IVS6-1 G＞A)与g.16750 C＞ T(Ser250Phe)双杂合突变,其父亲为g.16750 C＞T杂合子,母亲为g.15975G＞A杂合子,妹妹不携带这两种突变；HEK293细胞上清中FⅦ250Phe活性为(4.12±0.61)％(以FⅦ250Ser载体转染细胞培养上清FⅦ活性作为100％),培养上清中FⅦ250Ser与FⅦ250Phe抗原水平分别为(37.77±2.30)ng/mL和(4.02±0.52) ng/mL;而细胞裂解液中FⅦ250Ser与FⅦ250Phe抗原水平分别为(172.45±2.25) ng/mL和(130.51±2.32) ng/mL;Western印迹分析示转染了FⅦ250Phe载体的HEK293细胞培养上清无可检测FⅦ抗原,而在细胞裂解液中检测到FⅦ抗原,与ELISA检测结果一致；在CHO细胞表达的重组FⅦ250Phe绿色荧光信号能与核周内质网红色荧光信号重合,而且也与高尔基体红色信号重合,与重组FⅦ250Ser一致.结论 复合IVS6-1G＞A与Ser250Phe突变是导致患者遗传性凝血因子Ⅶ缺乏的原因；FⅦSer250Phe突变未见报道,其能正常合成,并转运至内质网及高尔基体,但不能有效分泌至细胞外,可能于细胞内部分降解或由于半衰期缩短而分泌后迅速降解.     

Wiskott-Aldrich综合征诊断治疗体会

目的 通过对Wiskott-Aldrich综合征(WAS)的临床经过、实验室检查和治疗的综合分析,来提高对该疾病的认识.方法 收集WAS患儿临床资料,先证者的外周血、血片及父母的外周血,应用聚合酶链反应(PCR)扩增后直接基因测序来诊断.结果 WAS是一种单拷贝基因缺陷病,连锁分析将WAS蛋白(WASP)基因定位位于X染色体短臂,基因序列中包括错义、无义、剪接位点突变及插入、缺失等,其母多为杂合子.结论 在儿科的血小板减少性疾病中,结合小年龄发病,伴有湿疹、反复感染史,均需要排除WAS.     

尿液电导率、渗透量及比重三者之间关系的初探

目的：了解尿液电导率，渗透量及比重之间的关系。以便利用电导率的方法来测定尿渗透量，方法：用UF－100、冰点渗透压仪及干化学试剂条分别测这50例正常人的尿液。结果：电导率与渗透量有良好的相关性（y=23.5x 119.9,r=0.92)，而与比重的相关性极差（y=3.9x10-4x 1.006,r=0.74)；渗透量与比重之间的相关性也极差（y=30401.1x-30245.5,r=0.64).高浓度葡萄糖、蛋白质对尿液渗透量有影响。而对尿液电导率没有明显的影响。结论：经一定的修正，可以设计用电导率的测定方法来间接测定尿液渗透量。     

间尼索地平对血管钙超负荷大鼠主动脉钙积累的作用(英文)

目的:在组织和细胞水平探讨间尼索地平(m-Nis)对血管钙超负荷(VCO)大鼠主动脉钙积累的作用。方法:建立大鼠VCO模型,用原子吸收分光光度法和电子探针微分析法分别测定主动脉总钙和动脉平滑肌亚细胞钙。结果:m-Nis(1—15mg·kg~(-1))对VCO大鼠主动脉总钙升高作用弱,且量效关系呈钟罩形。m-Nis 2.5mg·kg~(-1)对总钙升高抑制为24％。维拉帕米12.5mg·kg~(-1)疗效略优于m-Nis。m-Nis2.5mg·kg~(-1)对主动脉中膜平滑肌细胞的胞浆和线粒体钙升高有明显抑制,抑制率分别为72％和76％,对胞核钙升高抑制稍小。结论:m-Nis对VCO大鼠主动脉主要抑制血管平滑肌细胞内尤其是胞浆和线粒体钙超负荷,而对组织间质钙沉积作用较弱。     

异型南五味子丁素对氧自由基的作用

由异型南五味子［Ｋａｄｓｕｒａｈｅｔｅｒｏｃｌｉｔａ，（Ｒｏｘｂｃｒａｉｂ］植物根部分离的联苯环辛烯类木脂素具有明显的抗脂质过氧化作用，其中异型南五味子丁素（ｈｅｔｅｒｏｃｌｉｔｉｎＤ，ＨＤ）对Ｆｅ２＋ｖｉｔＣ诱导的肝匀浆脂质过氧化的抑制作用最强...     

硒化卡拉胶对果蝇的吃食,交配和寿命的影响

用黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的标准野生型品系Oregen K研究硒化卡拉胶对果蝇的吃食、交配和寿命的影响。结果表明,含硒量6ppm-338ppm硒化卡拉胶能明显增加雌蝇的吃食次数;113ppm和338ppm硒化卡拉胶能明显增加果蝇的交配次数,6ppm-338ppm硒化卡拉胶能明显延长雌蝇的半数寿命、平均寿命和最高寿命,也能延长雄蝇的半数寿命和平均寿命,但对雄蝇的平均寿命无显著影响。     

硒化卡拉胶对小鼠的降血糖作用

给正常小鼠灌胃硒化卡拉胶(Se-c)180mg/kq qd,连用11d,可使其血糖降低。四氧嘧啶糖尿病小鼠灌胃Se-c38.9,64.8,108,180mg/kg qd,连用11d,有明显的抗高血糖作用。用Se-c180mg/kg qd×10预处理的小鼠,腹腔注射肾上腺素后30min,其血糖值明显低于正常对照组,而腹腔注射葡萄糖后30～240min,其血糖均值虽然比正常小鼠低,但统计未见明显差异(P>0.05,n=10)。结果提示Se-c可能有降血糖作用。