淋巴细胞浸润肿瘤的调节机制

淋巴细胞归巢受机体组织微环境的调控,肿瘤形成时机体微环境的变化影响淋巴细胞的迁移和浸润。肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltration lymphocyte,TIL）作为重要的抗肿瘤免疫细胞,其分布和浸润程度与肿瘤发生、发展以及预后密切相关。淋巴细胞浸润肿瘤的调节机制可能涉及肿瘤脉管对淋巴细胞浸润的正反两方面的调节,黏附分子和趋化因子介导淋巴细胞外渗、募集、肿瘤抗原定位淋巴细胞浸润程度以及其他免疫细胞影响淋巴细胞浸润等。如何引导淋巴细胞向肿瘤迁移、能否创造利于瘤内浸润的微环境等,对于加速TIL临床转化,使肿瘤患者更大程度获益具有重要意义。     

淫羊藿素通过抗氧化损伤延缓CCl4诱导的大鼠肝硬化进程

目的探讨淫羊藿素延缓大鼠肝硬化进程的作用及可能机制。方法用不同浓度淫羊藿素处理经CCl4损伤的体外培养大鼠原代肝细胞,测定细胞培养液中ALT、AST和MDA浓度、细胞内SOD含量及凋亡细胞数量。建立CCl4诱导的大鼠肝硬化模型,用淫羊藿素处理后检测各组大鼠血清ALT、AST、ALB、GLB浓度,并观察大鼠肝组织病理学变化和胶原蛋白Ⅰ表达情况。结果CCl4损伤可使原代大鼠肝细胞培养上清中ALT、AST活性和MDA含量以及细胞凋亡率升高,细胞内SOD活性降低。用淫羊藿素预处理后,其培养上清中ALT、AST活性和MDA含量以及细胞凋亡率均明显低于凋亡模型组和药物载体组,细胞内SOD活性则明显高于模型组和药物载体组,差异有统计学意义(P＜0.05或0.01)。体内研究结果显示,与模型组比较,淫羊藿素处理可降低肝硬化模型大鼠血清ALT、AST水平,改善肝功能指标(P＜0.05)并减少胶原蛋白Ⅰ沉积,减轻肝硬化程度。结论淫羊藿素可能通过抗氧化损伤延缓CCl4诱导的肝纤维化向肝硬化发展的进程。     

人ZEB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定

上皮细胞-间充质转化(EMT)与恶性肿瘤的侵袭与转移密切相关~([1]).锌指增强子结合蛋白1(ZEB1)是目前发现的最强的EMT诱导因子,与肿瘤的恶性进展相关~([2]).为进行ZEB1与肝癌关系和基因治疗的研究,本实验构建靶向ZEB1基因的表达RNA干扰的慢病毒表达载体.     

内质网应激诱导的细胞凋亡与小鼠肝脏缺血再灌注损伤的关系

目的：探讨内质网应激诱导的细胞凋亡在肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）中的作用。方法：建立小鼠肝局部HIRI的模型,随机分为假手术组和实验组,每组动物8只。检测两组间内质网应激分子伴侣BiP,活化caspases-4,活化caspases-3,细胞凋亡、血清谷丙转氨酶和组织学的改变。 结果：在再灌注6 h后实验组肝组织BiP,活化caspases-4,活化caspases-3蛋白的表达增高,出现大量凋亡细胞,伴明显的血清谷丙转氨酶水平增高和肝组织学损害。结论：内质网应激诱导的细胞凋亡可能参与肝IRI。     

表达嵌合性受体的T细胞:一种新的肿瘤免疫治疗策略1

尽管早在20世纪80年代末,过继性免疫疗法就被成功地用于转移性黑色素细胞瘤的治疗,然而获得针对大多数其他类型肿瘤的特异性细胞毒T淋巴细胞(Cytotxic T Lymphocyte,CTL)却很困难.虽然抗体可特异性识别肿瘤抗原,但由于抗体进入组织的能力以及杀伤肿瘤的效应均较差,所以直接注射抗体对肿瘤进行免疫治疗的疗效并不理想.近年来发展了一种新的免疫治疗策略,即根据CTL对靶细胞的识别特异性依赖于T细胞受体(T-Cell Receptor,TCR)的发现,将能特异性识别并结合肿瘤细胞表面抗原或受体的抗体或配体与T细胞受体的细胞内成分融合成嵌合性T细胞受体(Chimeric T Cell Recepter,cTCR),从而产生一种新型的具有高度肿瘤特异性的CTL.cTCR可赋予T细胞持久的预先决定的新配体识别特异性.转染有cTCR 的CTL以主要组织相容性复合物(Major Histocompatibility Complex,MHC)非限制性方式选择性地靶向和杀伤肿瘤细胞或病毒感染的细胞.国际上已有一些实验室对表达cTCR的CTL进行了研究.本文就有关内容作一综述.     

肝癌血清岩藻糖基化AFP含量与α-L-岩藻糖苷酶活性的相关分析

采用改良的分光光度法及豌豆凝集素亲和免疫电泳同步测定90例肝细胞癌(HCC)血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活性和岩藻糖基化甲胎蛋白(AFP)含量。相关分析表明,HCC血清AFU活性与岩藻糖基化AFP相对含量无关(r=0.099),与岩藻糖基化AFP绝对含量亦无关(r=0.23)。将90例HCC按岩藻糖基化AFP相对含量不同(以25％为界)分组,两组血清AFU活性分别为535±220 nmol·ml~(-1)·h~(-1)和550±180 nmol·ml~(-1)·h~(-1),相差不显著(P>0.05)。若以血清AFU活性高低(以550 nmol·ml~(-1)·h~(-1)为界)分组,两组血清岩藻糖基化AFP相对含量分别为40％±23％和45％±22％,差异亦不显著(P>0.05)。提示,肝脏病变时AFP糖链结构的变化不是血清AFU参与的结果,可能来自于糖链生物合成途径的改变。     

胃癌组织中p53、p63、p73基因突变和蛋白表达的研究

本研究分析了p5 3、p6 3、p73基因在慢性胃炎、胃溃疡、慢性萎缩性胃炎和胃癌组织中基因突变和蛋白表达情况,探讨p6 3和p73基因在胃癌发生和临床诊断中的意义。资料与方法1.一般资料:标本来自昆明医学院附属第一、第三医院2 0 0 2年1月至6月手术切除和胃镜室活检,包括12例慢性胃炎,15例胃溃疡,2 1例慢性萎缩性胃炎和6 6例胃癌。根据随后的术中和术后病理结果判断胃癌患者有无淋巴结转移。标本在液氮中保存,一部分抽提DNA ,另一部分制成厚约5 μm的切片行免疫组化染色。2 .PCR引物设计和合成:参照NCBI数据库和文献,用Primer 5 0软件自…     

肝癌血清α-L-岩藻糖苷酶对甲胎蛋白糖基上岩藻糖的水解作用

采用改良的分光光度法及豌豆凝集素亲和免疫电泳,初步研究了肝细胞癌(HCC)患者血清α—L一岩藻糖苷酶(AFU)对甲胎蛋白(AFP)糖基上岩藻糖的水解活性,旨在探讨HCC酶标记物与蛋白质标记物在生化代谢过程中的相互关系。结果表明:(1)当牛AFU(美国Sigma)以0.3U/ml含量与岩藻糖化AFP纯品同溶于pH4.5,0.025mol/L柠檬酸钠缓冲液,在37℃温育24h后发现,人AFP分子上的岩藻糖基可     

CCL20 通过AKT/MMP3 轴而非EMT途径诱导结肠癌SW480 细胞的侵袭和转移

[摘要] 目的：探讨趋化因子CCL20/CCR6促进结肠癌SW480细胞侵袭和迁移的分子机制。方法：筛选高表达CCR6 的结肠癌SW480细胞,加入外源性重组人CCL20后,采用Transwell、划痕愈合实验检测其侵袭和迁移能力,以免疫荧光、WB实验检测SW480细胞EMT标志蛋白、AKT信号蛋白以及靶标蛋白MMP3 的表达;通过MK2206 阻断实验验证AKT信号是其作用机制,通过TCGA数据库资源（https://portal.gdc.cancer.gov/）分析CCL20和MMP3在结直肠癌组织中的表达水平及其相关性。结果：趋化因子CCL20能够明显促进结肠癌SW480细胞侵袭和迁移（均P<0.01）,其间并不伴随细胞的EMT变化,而是通过AKT信号的激活及下游靶标蛋白MMP3 表达上调是其诱因之一;阻断AKT信号能够明显抑制SW480细胞侵袭和迁移能力,且下调MMP3 的表达水平（P<0.05 或P<0.01）。TCGA 平台数据提示,结肠癌组织中CCL20 和MMP3 的表达明显高于正常肠黏膜组织,且两者呈明显正相关（r=0.051,P<0.01）。结论：趋化因子CCL20 通过AKT/MMP3 信号轴而非EMT机制促进结肠癌SW480 细胞的侵袭和迁移。