PI3K/AKT信号通路在TGFβ1致人腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt通路在转化生长因子β1(TGFβ1)体外诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)上皮-间质细胞转分化(EMT)过程中的作用。方法从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞。观察TGFβ1对人腹膜间皮细胞Akt磷酸化的影响,在不同时间点检测p-Akt的表达水平。采用免疫印迹方法检测应用PI3K特异性抑制剂Wortmannin对TGFβ1诱导后细胞内p-Akt、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏附蛋白(E-Cadherin)表达的影响。结果10ng/mLTGFβ1刺激HPMC0.5h后p-Akt水平开始升高,1h后达到顶峰,2h后逐渐减弱。TGFβ1诱导HPMC48h后α-SMA表达显著升高,E-cadherin表达显著下降;同时加用Wortmannin则p-Akt、α-SMA表达明显抑制。结论PI3K/Akt信号系统参与TGFβ1介导的人腹膜间皮细胞EMT过程,提示对其通路的抑制可有效阻止TGFβ1介导的腹膜纤维化。     

RIFLE和AKIN标准在评价住院急性肾损伤患者病死率及其相关危险因素中的应用

目的：应用风险期、损伤期、衰竭期、丧失期、终末期肾病（risk,injury,failure,loss,end stage kidney disease,RIFLE）和急性。肾损伤网络（acute kidney injury network,AKIN）两种标准评价住院急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）患者的病死率及其相关危险因素。方法：分析2006年2月至2011年1月中南大学湘雅二医院各临床科室收治的AKI患者的临床资料,分别采用RIFLE和AKIN标准对已诊断为AKI的病例重新确认AKI诊断并分级,比较两种标准诊断的住院AKI各期患者临床特征、院内病死率及其相关危险因素;应用logistic回归分析筛选出影响AKI院内病死率的相关危险因素。结果：采用RIFLE标准诊断出1020例、AKIN标准诊断出1027例AKI患者。RIFLE和AKIN标准的所有AKI患者及其相对应各期患者的院内病死率、住院天数、完全恢复率两两比较,差异均未见统计学意义（P〉0．05）。单因素方差分析显示,死亡组AKI患者的年龄、肾前性疾病、院内AKI、机械通气、低血压、多器官功能衰竭数目、急性肾小管坏死个体严重程度指数（ATN—ISS评分）、血清钾离子浓度与存活组患者比较均差异有统计学意义（P〈0．05）。多因素logistic回归分析筛选出年龄≥65岁、院内AKI、低血压、多器官功能衰竭数目、ATN—ISS评分、血清钾离子浓度为影响AⅪ患者院内病死率的独立危险因素。结论：RIFLE和AKIN标准对住院AKI患者近期预后的评价具有相同科学价值,且AKI分级与住院AKI患者的预后有关。     

多器官功能障碍综合征时血管内皮细胞损伤的研究

目的 采用"创伤失血性休克-内毒素"二次打击建立大鼠多器官功能障碍综合征(MODS)动物模型,观察MODS所致血管内皮细胞损伤以及MODS过程中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达变化.方法 将SD大鼠90只随机分为对照组、全身炎症反应综合征组(SIRS组)和MODS组.对照组24只,其余2组各33只.对照组不放血和注射内毒素.SIRS组和MODS组用钳夹动物一侧股骨造成骨折和放血的方法复制大鼠创伤失血性休克的动物模型,使休克持续1 h后进行复苏.复苏成功30 min后仅MODS组腹腔注射内毒素(2 mg/kg).从MODS组在注射内毒素后开始计算,3组大鼠在24、36、48 h随机取8只处死并采集标本检测肺组织1CAM-1-mRNA表达,测定血液中内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)含量以及循环内皮细胞(CEC)数量.结果 MODS组ICAM-1mRNA表达在36 h时较24 h时明显升高(P<0.05),48 h进一步升高(P<0.05).相同时间点ICAM-1mRNA表达量在MODS组高于SIRS组(P<0.05),SIRS组高于对照组(P<0.05).SIRS组和MODS组随时间延长CEC数量逐渐增加,3个时间点相互之间的差异均有统计学意义(P<0.5).相同时间点CEC数量在MODS组高于SIRS组(P<0.05),在SIRS组高于对照组(P<0.05).MODS组NO含量36h时较24 h时明显升高,48 h时又下降,并且低于24 h时(P<0.05),相同时间点NO含量在MODS组高于SIRS组(P<0.05),在SIRS组高于对照组(P<0.05).MODS组随时间延长ET-1含量逐渐增加,48 h ET-1含量同24h时的差异有统计学意义(P<0.05).相同时间点ET-1含量在MODS组高于SIRS组(P<0.05),在SIRS组高于对照组(P<0.05).结论 SIRS和MODS时均有血管内皮细胞的损伤,MODS时更为严重和明显,表现为黏附分子表达增强,NO和ET-1分泌紊乱.     

转化生长因子β与腹膜纤维化:基因治疗的靶点

转化生长因子β(TGF-β)是一大类多功能调节细胞生长、分化的细胞因子，它参与了机体许多生理和病理过程，现在越来越多的证据表明，TGF-β可能是肝纤维化、肾纤维化、腹膜纤维化的重要细胞介质。本文重点讨论TGF-β的结构与功能、TGF-β与腹膜纤维化的关系，TGF-β在腹膜纤维化治疗中的潜在价值。     

非典型急性药物性间质性肾炎致急性肾功能衰竭五例分析

临床上急性药物性间质性肾炎逐渐增多,占急性间质性肾炎的50％以上,其临床表现多种多样,具有药物过敏症状如发热、皮疹、关节痛等。其典型症状的病例报道较多,而不具过敏表现的非典型病例报道较少,作者等收治不典型病例5例,现报道如下。     

高渗与低渗造影剂对原有肾损害大鼠肾毒性的研究

研究高、低渗造形剂（泛影葡胺、欧乃派克）对甘油肾损害大鼠肾毒性及氨氯地平的保护作用。结果表明：高渗造影剂组血清尿素氨和血清肌酐、肾组织磷脂酶Ａ２、脂质过氧化物含量，肾小管损害积分均明显高于低渗造影剂组及甘油对照组（Ｐ＜０．０５）。氨氯地平预防组肾损害明显轻于高渗适影剂组。提示低渗造影剂肾毒性较小，氨氯地平对泛影葡胺肾毒性有保护作用。     

国产依普定治疗肾性贫血的临床观察

贫血是慢性肾功能衰竭常见并发症之一,其主要原因是体内红细胞生成素(EPO)生成绝对或相对不足,补充外源性EPO是治疗该类疾病的一种理想方法。同类进口药物价格昂贵,不适合我国国情。本文采用价格较廉的国产EPO(依普定)治疗肾性贫血,旨在进一步观察其临床效果。     

肌酐水解酶基因工程菌的构建及功能研究

目的 构建肌酐水解酶的重组质粒转染至大肠杆菌中,研究其蛋白的表达及活性。方法根据Genbank上肌酐水解酶基因序列(D45424.1),进行生物合成,得到肌酐水解酶基因片段C,聚合酶链反应(PCR)扩增后,与质粒GV296连接,构建成重组质粒GV296-C,转染至大肠杆菌BL21(DE3),构建成基因工程菌GV296-C/BL21(DE3)。进行十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)分析后,测定培养液肌酐浓度变化。结果成功构建重组质粒GV296-C,电泳显示目的片段约为0.783Kb,测序结果与D45424.1基因序列一致。重组质粒GV296-C转染至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经SDS-PAGE分析酶蛋白的分子量约为29KD。结论成功构建工程菌GV296-C/BL21(DE3),诱导后高效表达肌酐水解酶,具有水解肌酐活性。     

硝普钠和摇摆对腹膜透析病人腹膜溶质转运的影响

在 12例稳定、无腹膜炎的持续性非卧床腹膜透析 (CAPD)住院病人中 ,观察硝普钠和摇摆对腹膜透析病人溶质转运的影响。分别计算标准腹膜平衡试验 (PET)中尿素氮、肌酐的 4h清除率以及溶质面积转运系数 (MTAC) ,记录当天总引流量 ,并测定引流液中总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G的含量。结果表明 ,硝普钠和摇摆均能增加腹膜透析时小分子溶质转运 ,摇摆对腹膜透析时大分子蛋白质丢失的影响较硝普钠小。提示腹膜透析时适当活动可以提高对小分子溶质的清除而不影响大分子蛋白的丢失。