CAPD患者蛋白质丢失与腹透时间、PET及KT/Vurea的关系

对 16例新透析患者 (透析时间在 30d)和透析时间 >1年的 19例患者蛋白质丢失与透析时间、腹膜平衡试验 (PET)及尿素清除指数 (KT/Vurea)关系进行了分析。结果发现 :两组患者腹透液中 ,蛋白质丢失量比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。在PETD/Pcr值≥ 0 6 5患者腹透液中 ,蛋白质丢失量与PETD/Pcr值 <0 .6 5患者比较差异无显著性(P >0 .0 5 )。尿素清除指数 (KT/Vurea)≥ 2 0与KT/Vurea<2 0患者腹透液中蛋白质丢失量比较亦无统计学意义 (P >0 .0 5 )。提示 ,常规CAPD无腹膜炎患者腹透液中蛋白质丢失量与透析时间 ,小分子溶质转运 ,透析是否充分无相关性 ;进一步支持大分子蛋白质转运与小分子溶质转运可能为不同途径     

WNK4基因在M1细胞中瞬时和稳定表达的位置和作用

目的探讨WNK4（With No K=lysine）基因在鼠肾皮质集合管细胞（M1）中的表达位置和生理作用。方法构建PCSPT-mWNK4-kxx质粒,瞬时转染M1细胞株,采用免疫荧光法检测Myc抗原标记的WNK4基因在M1细胞中表达位置。构建PTrepWNK4质粒,转染M1Tet-Off细胞株,采用免疫荧光法检测Myc抗原标记的WNK4基因在稳定转染M1Tet-Off细胞中表达位置,采用免疫沉淀和Western blot检测WNK4蛋白质表达,采用电压计检测WNK4基因过表达对M1单层细胞跨上皮电阻（TER）的作用。结果瞬时转染野生型WNK4基因,其蛋白质主要在M1细胞的胞膜表达,部分在胞浆。在稳定转染的M1Tet-Off细胞株,野生型WNK4基因表达于细胞的胞膜,免疫沉淀和Western blot结果显示Myc抗原标记的野生型WNK4蛋白在M1Tet-Off细胞中表达。电生理研究显示野生型WNK4基因过表达显著降低M1单层细胞TER。结论野生型鼠WNK4基因主要在M1细胞的胞膜表达,部分表达在胞浆。WNK4基因过表达降低单层细胞跨上皮电阻,增加相邻细胞的通透性,为进一步研究WNK4基因在高血压中的分子机制及其在肾脏的生理功能打下基础。     

原发性肾病综合征抗凝治疗的评价

肾病综合征（ＮＳ）患者存在高凝状态，血栓栓塞并发症发生率高达８５％～３８％［１］，严重影响该病的治疗及预后。临床上多采用普通肝素（ＳＨ）和潘生丁治疗，但易引起严重出血和头痛等副作用，须监测凝血酶原时间，使用不便。低分子肝素（ＬＭＷＨ，速避凝）来自肝...     

黄芪液拮抗乳酸盐腹透液对人腹膜间皮细胞的损伤作用

目的 :研究黄芪液对乳酸盐腹透液致腹膜间皮细胞增殖及损伤作用的影响。方法 :采用胰蛋白酶 -ED TA消化法 ,从人腹膜组织中分离间皮细胞 ,并建立体外人腹膜间皮细胞 (HPMC)培养模型。以MTT法测定HPMC增殖程度 ,采用自动生化分析仪检测 ,培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)水平示细胞损伤程度。结果 :2 .5 %乳酸盐腹透液中加用黄芪液 (1mg/ml)与HPMC作用 4 5min ,其培养液中LDH水平较腹透液对照组明显降低(P <0 .0 1) ,HPMC增殖能力明显增强 (P <0 .0 1)。结论 :黄芪液能拮抗乳酸盐腹透液致HPMC的损伤。     

中西医结合治疗脾损伤20例

我院自1996—2002年共收治脾损伤20例，疗效满意，报告如下。     

蛋白磷酸酶2A 在肾间质纤维化中的作用

目的：探讨蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)在大鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)及TGF-β1刺激的人近端肾小管上皮细胞-2(human kidney proximal tubular epithelial-2,HK-2)的肾纤维 化模型中的作用。方法：1)15只雄性SD大鼠随机分成假手术组( sham组)、模型组(UUO组)和UUO+冈田酸(okadaic acid,OA)干预组(OA组),每组各5只。术后OA组每日给予1.8%酒精稀释的OA 30 μg/kg,胃管饲喂72 h,对照组和模型 组给予相等体积的1.8%酒精胃管饲喂,72 h后处死大鼠,收集血和肾组织,检测肾功能并采用免疫组织化学、Western 印迹和RT-PCR法检测肾组织PP2A的c亚基(PP2Ac)、纤维连接蛋白(fi bronectin,FN)、胶原-I(collagen-I,Col-I)、E-钙黏 蛋白(E-cadherin,E-cad)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白及mRNA的表达。2)采用台盼蓝排斥 实验及MTT 法找出适宜的OA浓度。常规培养HK-2细胞,随机分为对照组、TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/mL干预24 h)、TGF- β1+OA组(TGF-β1 5 ng/mL+OA 40 nmol/L,同时干预24 h),Western印迹检测肾小管上皮细胞PP2Ac,FN,Col-I,E-cad 和α-SMA 蛋白的表达。结果：1)肾功能表明UUO组尿素氮和肌酐较sham组升高,OA组尿素氮、肌酐均比UUO组下 降(均P<0.05)。免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR均显示：与sham组比较,UUO组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表 达升高,而E-cad表达下降(均P<0.05);与UUO组比较,OA组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表达下降,E-cad表达升高(均 P<0.05);2) OA 40 nmol/L为最适宜的实验质量浓度;Western印迹显示：与对照组比较,TGF-β1组PP2Ac,FN,Col-I 和α-SMA表达升高,E-cad表达下降(均P<0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+OA组PP2Ac,FN,Col-I和α-SMA表达下 降,E-cad表达升高(均P<0.05)。结论：PP2A能促进肾间质纤维化。     

Smad锚着蛋白在高糖诱导人肾小管上皮细胞细胞外基质沉积中的作用

目的:阐明Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor activation,SARA)在高葡萄糖诱导的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2细胞)细胞外基质(ECM)沉积中的作用及分子机制,探讨以SARA为靶点抑制高葡萄糖诱导的HK-2细胞ECM沉积的策略.方法:用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,通过Western Blot及实时定量PCR( Real-time PCR)检测纤维连接蛋白(FN)和I型胶原(Col I),进而检测转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的表达变化,通过细胞免疫荧光、Western Blot、Real-time PCR检测SARA的表达变化;分别转染全长SARA质粒[SARA(WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSRD)],检测转染后高糖诱导HK-2细胞FN及Col I表达的变化.结果:Western Blot及Real-time PCR结果显示,30mmol/L D-葡萄糖刺激后,HK-2细胞Col I蛋白及mRNA表达呈时间依赖性升高.高糖可诱导TGF-β1、Smad3蛋白及其mRNA表达呈时间依赖性上调;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调;高糖可促进Smad2和Smad3磷酸化,但Smad3的活化时间更长.而SARA的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性降低,细胞免疫荧光结果亦证实高糖刺激后SARA表达下降.与高糖组相比,转染SARA(WT)可使HK-2细胞FN和 Col I表达下调;转染SARA (dSBD)对高糖诱导的HK-2细胞FN和ColI表达无明显影响.结论:高糖诱导的HK-2细胞ECM沉积过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下调;过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,抑制TGF-β31信号传导,从而减少高糖诱导的HK-2细胞ECM分泌.     

我国手助腹腔镜与开腹脾切除术临床疗效比较的系统评价

目的:用系统评价的方法比较手助腹腔镜脾切除术与开腹脾切除术的临床效果.方法:收集1991年-2012年国内公开发表的有关比较手助腹腔镜脾切除术与开腹脾切除术的临床对照研究,筛选出符合条件的研究进行Meta分析.结果:经筛选后纳入符合标准的文献8篇,共419例患者,其中手助腹腔镜脾切除202例(手助组),开腹脾切除217例(开腹组).Meta分析结果显示手助组的手术时间较开腹组长,而术中出血量、胃肠功能恢复时间、住院时间均小于开腹组(均P＜0.05).结论:手助腹腔镜脾切除术具有术中出血量少、术后胃肠功能恢复快、住院时间短等优点.然而因该系统评价纳入研究多为非随机对照试验,研究中存在偏倚因素并可能会对最终结论造成影响,因此上述结论尚需谨慎对待,仍需进一步开展多中心、大样本随机对照试验来验证.     

不同复苏方式对失血性休克复苏后大鼠腹腔感染时TNF-α和IL-6的影响

目的:研究不同复苏方式对失血性休克复苏后大鼠腹腔感染时肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:将46只SD大鼠随机分为限制性液体复苏组和快速大量液体复苏组,观察复苏后2组大鼠的出血量、输液量、存活率;复苏后在腹腔注入内毒素,再将2组大鼠各随机分为2组,分别于2h、4h测定血清中的TNF-α和IL-6水平。结果:限制性液体复苏组的输液量及出血量明显少于快速大量液体复苏组,2组存活率比较差异有统计学意义(P<0.05);限制性液体复苏组大鼠的TNF-α和IL-6水平均低于相同时间点的快速大量液体复苏组(P<0.05)。结论:限制性液体复苏可明显降低出血量及死亡率,同时在复苏后继发腹腔感染时,限制性液体复苏可以降低大鼠的TNF-α和IL-6水平。