SHH信号通路在血小板源性生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用研究

目的探讨sonic hedgehog(SHH)信号通路是否在血小板源性生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中被活化,研究SHH信号通路是否参与PDGF诱导的VSMC增殖。方法体外培养人VSMC,施加PDGF刺激后应用激光共聚焦显微成像、Western-Blot及qRT-PCR检测SHH信号通路分子mRNA的表达变化;分别应用慢病毒介导的RNAi及SHH信号通路特异抑制剂cyclopamine阻断SHH通路后,用细胞计数、BrdU掺入法及Ki67染色评价细胞增殖情况。结果激光共聚焦显微成像及Western-blot及qRT-PCR均显示PDGF能够活化SHH信号通路蛋白shh、patched1及Gli2的表达;阻断SHH信号通路后,PDGF诱导VSMC增殖的作用明显减弱。结论 SHH信号通路在PDGF诱导的VSMC增殖中有重要作用。     

颈动脉分叉处肿块的诊断与治疗

目的探讨颈动脉分叉处肿块的诊断和手术治疗方法。方法回顾性分析2004年2月—2007年11月收治的11例颈动脉分叉处肿块患者的临床资料。结果 11例中7例为颈动脉体瘤,其中6例手术,1例拒绝手术;4例为神经鞘瘤,均手术治疗。10例手术均完整切除肿瘤,2例行自体大隐静脉移植颈动脉重建术。6例手术者获0.5～3年随访,效果良好。结论颈动脉分叉处肿块的性质临床诊断较难,尤其颈动脉体瘤与神经鞘瘤鉴别困难。术前应明确肿块与颈部大血管的关系及脑供血情况,术中应充分保证颈内动脉血供,保护神经,并尽量减少局部组织粘连及瘢痕形成机会。     

经皮透光负压旋切术治疗下肢深静脉血栓形成继发皮肤溃疡的临床研究

目的：探讨下肢深静脉血栓形成（DVTS）继发皮肤溃疡的微创治疗方法。方法：选择DVTS继发皮肤溃疡患者116例,其中经皮透光负压旋切术治疗72例72条下肢（A组）,非手术治疗44例44条下肢（B组）。于A组术后5、20、120和360 d（即B组入院后8、23d、出院后97、337 d）记录皮肤的感染率、坏死率、色素减退率、创面收缩率、溃疡愈合率及溃疡复发率等6项临床指标。结果：术后5 d A组皮肤感染率和皮肤坏死率低于B组（P〈0.05）;术后20 d A组创面收缩率与色素减退率较B组显著改善（P〈0.05）;术后120 d A组溃疡愈合率较B组显著升高（P〈0.05）;术后360 d溃疡复发率A组显著低于B组（P〈0.05）。结论：经皮透光负压旋切术治疗DVTS继发皮肤溃疡效果良好,具有微创性、可操作性、可控制性等特点,可作为外科治疗方法之一。     

原癌基因Wip1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨原癌基因Wip1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、Western印迹方法,检测70例乳腺癌组织、癌旁组织、20例正常乳腺组织中Wip1 mRNA和蛋白表达情况,同时对Wip1高表达与临床病理因素的关系进行了比较研究.结果 RT-PCR:乳腺癌组织、癌旁组织、正常乳腺组织Wip1 mRNA的基因表达值分别为:0.715±0.087、0.175±0.021、0.154±0.022.乳腺癌组织比癌旁组织、正常乳腺组织明显升高(P<0.01).免疫组织化学:3种组织中Wip1蛋白高表达率分别为62.9%(44/70)、2.9%(2/70)、0(0/20).乳腺癌组织比癌旁组织、正常乳腺组织明显升高(P<0.01).Western印迹:3种组织Wip1蛋白相对含量分别为0.688±0.151、0.251±0.043、0.234±0.044.乳腺癌组织比癌旁组织、正常乳腺组织明显升高(P<0.01).Wip1高表达与肿瘤大小、年龄、TNM分期、腋窝淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达无关,与p53表达呈负相关.结论 Wip1 mRNA和蛋白在乳腺癌组织中高表达,促进乳腺癌的发生和发展.Wip1可能成为乳腺癌基因治疗新的靶点.     

塞来昔布抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成

目的研究塞来昔布对实验性大鼠腹主动脉瘤形成的抑制作用。方法Wister大鼠24只,随机分为2组,实验组12只,对照组12只。实验组术后胃灌注塞来昔布,对照组胃灌注生理盐水。观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁组织学改变,并用免疫组织化学技术和分子原位杂交技术检测基质金属蛋白酶2和9的表达。结果 灌注两周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率8.33％,对照组大鼠腹主动脉瘤形成率100％,两组差异有显著意义(P<0.01)实验组大鼠动脉壁组织基质金属蛋白酶2和9的表达为弱阳性或阴性,对照组动脉壁组织中两着表达明显增高。原位杂交检测结果表明两组mRNA表达强度无明显差异。结论塞来昔布能够通过抑制动脉瘤组织中基质金属蛋白酶2和9的表达来阻止动脉壁组织弹力纤维的降解,并抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成。这为人类对小腹主动脉瘤的药物治疗提供了可行性的理论依据。     

CT血管成像术在胭动脉陷迫综合征的应用

目的探讨CT血管成像术（CTA）在动脉陷迫综合征（PAES）诊断中的应用价值。方法回顾性分析8例经手术病理证实的PAES患者的CTA资料，其中4例行数字减影血管造影（DSA）检查。结果CTA图像可清晰显示8例患者动脉与周围组织之间的关系，均可见异常走行的腓肠肌内侧头及其肌腱或纤维组织束压迫动脉。CTA能清晰显示动脉狭窄闭塞的部位、范围、程度、侧枝循环形成情况及动脉与周围组织间的关系。结论CTA诊断PAES准确率100％，明确病因诊断优于DSA。     

反义c-myb寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

目的研究反义c-myb寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxy-nucleotides,ODN)对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响.方法移植静脉外周涂加有反义c-mybODN的F127凝胶,于术后1周及2周测量平均厚度、观察血管内膜内c-myb蛋白表达情况.结果手术后1周和2周,移植静脉内膜的平均厚度、内膜中c-myb蛋白的表达在反义c-mybODN组均减少,并存在量效关系(P<0.01).而只用F127胶组及正义ODN组均无抑制作用.结论反义c-mybODN对移植静脉内膜增生有抑制作用,并存在量效关系.此作用可能是通过抑制血管内膜内细胞c-myb蛋白的表达来实现的.     

不同浓度的纤维蛋白原对移植静脉内膜增生的作用

目的：研究不同浓度的纤维蛋白原（fibrinogen,FG）对移植静脉内膜增生（intimal hyperplasia,IH )的作用。方法：建立移植静脉IH模型,在9例血管移植术中取正常人大隐静脉(human saphenous vein,HSV）行体外培养,培养液中施加不同浓度的FG。培养14d后,应用组织学、5′－BrdU免疫组化染色,计算机图像分析,测量内膜与中膜厚度、面积比,计数5′－BrdU阳性细胞比,观察不同浓度的FG对IH的影响。结果：（1）FG浓度在2.5mg/ml时：培养静脉片的内膜与中膜厚度比为0.387;内膜与中膜面积比为0.396;5′－BrdU阳性细胞比为0.544。（2）FG浓度在5.0mg/ml时：其内膜与中膜厚度比为0.421;内膜与中膜面积比为0.382;5′－BrdU阳性细胞比为0.501。（3）二者与对照组（不含FG）的内膜与中膜厚度比0.215;内膜与中膜面积比0.229;5′－BrdU阳性细胞比0.363,比较差异均在显著性（P＜0.05）。2.5mg/ml和5.0mg/ml两组之间相比差异无显著性（P＞0.05）。（4）FG浓度在0.5mg/ml时,上述项检测指标与对照组相比,差异无显著性9P＞0.05）。结论：高浓度的FG对IH有直接促进作用,提示血管移植术后局部高浓度FG可导致再狭窄和闭塞;低浓度的FG对IH无明显影响,提示临床上降 治疗对再狭窄可能有一定的防治作用。     

内皮素和一氧化氮与老年动脉硬化闭塞症相互关系的探讨

目的 从分子生物学角度探讨内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）与动脉硬化闭塞症（ＡＳＯ）的相互关系。方法 选择９６例ＡＳＯ患者和８６只模型,利用放射免疫、Ｇｒｉｓｓ、光电比色和逆转录ＰＣＲ方法检测血浆ＥＴ、ＮＯ和血管一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性、ＥＴｍＲＮＡ和ＮＯＳｍＲＮＡ表达情况。结果 ＡＳＯ患者和模型均存在高ＥＴ血症和低ＮＯ血症,ＡＳＯ病变血管存在低ＮＯＳ活性、低ＮＯＳｍＲＮＡ表达和高ＥＴｍＲＮＡ表     

雌激素缺乏对大鼠腹主动脉瘤模型形成的影响

目的:建立雌激素缺乏的动物模型并在此基础上建立腹主动脉瘤(abdominalaorticaneurysm,AAA)模型,研究雌激素缺乏对AAA形成中的影响及其作用机制。方法:雌性Wistar大鼠20只,随机分为实验组和对照组,各10只。实验组(切除卵巢)和对照组(假手术)分别于术后1周用弹性蛋白酶灌注肾下腹主动脉制成AAA模型。14d后用放射免疫法检测血清E2的含量,用免疫组化及RealTimeRTPCR测定动脉瘤组织基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)2和MMP9的mRNA及蛋白的表达。结果:实验组与对照组比较雌激素水平显著降低,P<0.01。其动脉瘤扩张率分别为(160.52±18.38)%和(101.30±6.73)%,P<0.01;MMP2mRNA的相对表达量分别为0.128±0.070和0.014±0.006,P<0.01;MMP9mRNA的相对表达量分别为1.50±0.43和0.33±0.11,P<0.01;MMP2的表达率分别为(48.51±9.63)%和(25.33±3.15)%,P<0.01;MMP9的表达率分别为(46.46±5.91)%和(24.78±2.30)%,P<0.01。结论:在AAA形成的过程中雌激素缺乏可导致MMP2和MMP9的mRNA表达增强,MMP2和MMP9合成及炎性细胞浸润的增加,进一步促进AAA的形成。